Recherche sur le contrôle de la qualité de Ge Hua basé sur l'empreinte digitale HPLC et la méthode d'évaluation multiple
Pueraria Flos est un bouton floral séché de Pueraria lobata (Willd.) Ohwi ou Pueraria thomsonii Benth, une plante de la famille des légumineuses. Elle est également connue sous le nom de Pueraria lobata, Pueraria lobata, Pueraria lobata, ou Epinephelus patchouli. Elle est mentionnée dans le "Record of Famous Doctors", le "Dian Nan Ben Cao" et le "Ben Cao Gang Mu", et a pour effet de dégriser, d'éliminer l'humidité et la chaleur, de soulager les désagréments et les nausées. La recherche moderne a montré que la pueraria lobata a des effets tels que la désintoxication, la réduction de la glycémie, la réduction des lipides sanguins, les antioxydants, la protection du myocarde et des propriétés similaires à celles des œstrogènes. Elle est largement utilisée comme matière première pour le développement de produits de santé tels que la désintoxication, la protection du foie, la réduction de la glycémie et des lipides sanguins, la lutte contre l'ostéoporose et la régulation immunitaire. Des études sur la composition chimique ont montré que Pueraria lobata contient principalement des flavonoïdes, des terpènes, des stéroïdes et des coumarines, dont la puérarine (Pu), la daidzine (Da), la daidzéine (Dae), la génistine (Ge), la génistine (Dae), la génistine (Dae) et la génistine (Dae), Genistin (Ge), Genistein (Gee), Kakkalide (Ka), Glycitin (Gl), Tectoridin (Td), Tectorigenin (Tg), et Tectorigenin-7-O-xylosylglucoside sont les principaux composants de Pueraria lobata. Tx) est le principal composant chimique. Le Ge Hua est principalement distribué en Asie du Sud-Est, mais c'est en Chine qu'il est le plus répandu. Shaanxi, Sichuan, Guangxi et Yunnan sont les principales zones de production de Ge Hua. Les normes publiées par le ministère et les normes relatives à la médecine traditionnelle chinoise dans différentes provinces stipulent clairement que les boutons floraux du kudzu sauvage et du kudzu rose sont les deux sources médicinales authentiques des fleurs de kudzu en Chine. Pour les distinguer, la première est appelée fleur de kudzu et la seconde fleur de kudzu rose. Notre groupe de recherche a constaté qu'il existe des différences significatives dans la composition chimique des deux. À l'heure actuelle, il n'existe que des normes départementales et locales pour le Ge Hua, ce qui entraîne une certaine confusion dans l'identification des variétés. Les indicateurs de contrôle de la qualité ne comprennent que les caractéristiques, l'identification et l'inspection, ce qui est trop simple. Il n'existe aucun rapport sur l'amélioration des normes de contrôle de la qualité.
Le spectre d'empreintes digitales est une méthode d'identification chromatographique complète, macroscopique et quantifiable, largement utilisée dans l'évaluation de la qualité de la médecine traditionnelle chinoise. Il peut refléter de manière exhaustive les différences dans les caractéristiques de composition chimique de la médecine traditionnelle chinoise, permettant ainsi de distinguer l'authenticité de la qualité. Cette étude a donc utilisé la CLHP pour établir les spectres d'empreintes digitales de Pueraria lobata de différentes origines ; En même temps, une méthode d'analyse d'évaluation unique et multiple (QAMS) a été établie sur cette base pour déterminer la teneur en Pu, Da, Dae, Ge, Gee, Ka, Gl, Td, Tg et Tx de Pueraria lobata, évaluer systématiquement les différences de qualité des matières médicinales de Pueraria lobata provenant de différentes zones de production, fournir une base empirique pour un contrôle complet et systématique de la qualité de Pueraria lobata, et fournir une référence pour la sélection et l'élevage de ressources génétiques de haute qualité de Pueraria lobata.

 

L'expérience a utilisé un détecteur à barrettes de diodes pour effectuer un balayage complet de la longueur d'onde de 10 flavonoïdes à 200-400nm. Les résultats ont montré que les spectres UV de Pu, Da, Dae, Ge, Gee, Ka, Gl, Td, Tg et Tx étaient similaires, avec une absorption maximale à la longueur d'onde de 256-274nm. Dans la condition de longueur d'onde de 265 nm, il a été constaté que les 10 composants testés présentaient une bonne séparation de la ligne de base et une ligne de base stable, ce qui peut répondre aux exigences de l'analyse quantitative. L'expérience a porté sur l'éthanol 75% ; l'éthanol 95% ; le méthanol 75% et 25 ml chacun de méthanol ont été utilisés comme solvants d'extraction. Lorsque le méthanol a été choisi comme solvant d'extraction, le nombre de pics chromatographiques était approprié et facile à séparer. L'expérience a également examiné les méthodes de traitement par ultrasons et par reflux thermique, et a finalement choisi les ultrasons pendant 30 minutes, qui sont une méthode simple et efficace. L'expérience a également examiné les systèmes de phase mobile tels que le méthanol et l'eau, l'acétonitrile et l'eau, la solution aqueuse d'acide phosphorique acétonitrile-0,2% et la solution aqueuse d'acide formique acétonitrile-0,2%. La sélection finale du système d'élution en gradient de la solution aqueuse d'acétonitrile 0,2 phosphate a permis d'obtenir un bon effet de séparation et une amélioration significative des résidus.
Pour faciliter le contrôle complet de la qualité de Pueraria lobata, divers composants représentatifs ayant une activité claire et une teneur élevée ont été sélectionnés comme composants indicateurs pour la détermination de la teneur en QAMS dans l'expérience, notamment Pu, Da, Dae, Ge, Gee, Ka, Gl, Td, Tg et Tx en tant que principaux composants chimiques. Les résultats de la mesure de la teneur de chaque composant, de la séparation chromatographique de chaque composant, ainsi que du prix et de la disponibilité des étalons de référence, montrent que Ka a une teneur élevée, un bon effet de séparation, une identification facile dans le spectre et qu'il se trouve dans la position médiane du spectre, ce qui est propice au calcul du temps de rétention relatif des pics chromatographiques des autres composants et à l'identification des pics chromatographiques. Le Ka a des propriétés stables, est peu coûteux et facile à obtenir, et a l'activité de réduire les lipides sanguins et la glycémie, d'améliorer la microcirculation et d'activer l'éthanol déshydrogénase. Par conséquent, le Ka a été choisi comme matériau de référence pour la détermination de la teneur en QAMS dans cette étude.
Le spectre d'empreintes digitales établi dans cette expérience peut caractériser efficacement les informations relatives à la composition chimique de Pueraria lobata. La méthode QAMS établie sur la base du spectre d'empreintes digitales peut déterminer efficacement la teneur des principaux principes actifs Pu, Da, Gl, Tx, Ge, Td, Dae, Ka, Gee et Tg dans Pueraria lobata et Pueraria lobata, ce qui peut refléter de manière exhaustive les informations sur la qualité globale des matières médicinales de Pueraria lobata. D'après les résultats de la détermination du contenu et de la carte thermique de regroupement, on peut intuitivement constater que Pueraria lobata et Pueraria lobata peuvent être divisées en deux catégories. Il existe des différences significatives dans les types et les teneurs des principaux ingrédients actifs dans 20 lots de Pueraria lobata et 10 lots de Pueraria lobata provenant de zones de production différentes. Les composants différentiels sont Ka, Da, Gl, Tx, Td et Ge. La raison est liée aux différentes sources de fleurs de kudzu et de fleurs de kudzu rose.
Actuellement, les boutons floraux séchés de Pueraria lobata et de Pueraria lobata sont inclus dans les sources de plantes médicinales. Étant donné les différences significatives entre les principaux ingrédients actifs de Pueraria lobata et de Pueraria lobata, leur efficacité clinique devrait également différer. Il convient donc de les distinguer et de les utiliser différemment dans le développement des produits et les applications cliniques. Dans le même temps, le Ge Hua présente un grand potentiel pour le développement de produits de santé, et il est urgent d'établir un système normalisé d'évaluation de la qualité du Ge Hua. Le spectre d'empreintes digitales établi par notre institut de recherche, combiné à la méthode d'évaluation "un test, plusieurs tests", permet de contrôler la qualité des matières médicinales de Pueraria lobata à plusieurs composants et plusieurs indices, tout en réduisant l'utilisation de matériaux de référence ; Les résultats expérimentaux peuvent servir de référence pour la modification et l'amélioration des normes de qualité de Pueraria lobata, ainsi que pour la sélection et l'amélioration des ressources génétiques de haute qualité de Pueraria lobata. Les perspectives d'application sont bonnes dans le cadre du mode d'évaluation de la qualité globale de la médecine traditionnelle chinoise.