Forschung zur Qualitätskontrolle von Ge Hua auf der Grundlage von HPLC-Fingerprint und Mehrfachbewertungsmethode
Pueraria Flos ist eine getrocknete Blütenknospe von Pueraria lobata (Willd.) Ohwi oder Pueraria thomsonii Benth, einer Pflanze aus der Familie der Hülsenfrüchte. Sie ist auch als Pueraria lobata, Pueraria lobata, Pueraria lobata oder Epinephelus patchouli bekannt. Sie wird in den "Aufzeichnungen berühmter Ärzte", "Dian Nan Ben Cao" und "Ben Cao Gang Mu" erwähnt und hat die Wirkung, nüchtern zu machen, Feuchtigkeit und Hitze zu beseitigen, Ärger und Übelkeit zu lindern. Die moderne Forschung hat gezeigt, dass Pueraria lobata Wirkungen wie Entgiftung, Senkung des Blutzuckerspiegels, Senkung der Blutfette, Antioxidantien, Schutz des Herzmuskels und östrogenähnliche Eigenschaften hat. Es wird in großem Umfang als Rohstoff für die Entwicklung von Gesundheitsprodukten wie Entgiftung, Leberschutz, Blutzucker- und Blutfettsenkung, Osteoporosebekämpfung und Immunregulierung verwendet. Studien zur chemischen Zusammensetzung haben gezeigt, dass Pueraria lobata hauptsächlich Flavonoide, Terpene, Steroide und Cumarine enthält, darunter Puerarin (Pu), Daidzin (Da), Daidzein (Dae), Genistin (Ge), Genistein (Gee), Kakkalid (Ka), Glycitin (Gl), Tectoridin (Td), Tectorigenin (Tg) und Tectorigenin-7-O-xylosylglucosid die wichtigsten Bestandteile von Pueraria lobata sind. Tx) ist der wichtigste chemische Bestandteil. Ge Hua ist hauptsächlich in Südostasien verbreitet, wobei die größte Verbreitung in China besteht. Shaanxi, Sichuan, Guangxi und Yunnan sind die Hauptanbaugebiete von Ge Hua. Die vom Ministerium herausgegebenen Normen und die Normen für die traditionelle chinesische Medizin in verschiedenen Provinzen haben eindeutig festgelegt, dass die Blütenknospen des wilden Kudzu und der rosa Kudzu die beiden authentischen medizinischen Quellen für Kudzu-Blüten in China sind. Um sie zu unterscheiden, werden erstere als Kudzu-Blüten und letztere als rosa Kudzu-Blüten bezeichnet. Unsere Forschungsgruppe hat herausgefunden, dass es erhebliche Unterschiede in der chemischen Zusammensetzung der beiden gibt. Gegenwärtig gibt es für Ge Hua nur abteilungsspezifische und lokale Normen, und die Sortenidentifizierung ist unklar. Die Indikatoren für die Qualitätskontrolle umfassen nur Merkmale, Identifizierung und Inspektion, die zu einfach sind. Es gibt keine Berichte über die Verbesserung der Qualitätskontrollstandards.
Das Fingerabdruckspektrum ist eine umfassende, makroskopische und quantifizierbare chromatografische Identifizierungsmethode, die bei der Qualitätsbewertung traditioneller chinesischer Medizin weit verbreitet ist. Sie kann die Unterschiede in der chemischen Zusammensetzung der traditionellen chinesischen Medizin umfassend widerspiegeln und damit das Ziel erreichen, zwischen Authentizität und Qualität zu unterscheiden. In dieser Studie wurden daher mittels HPLC Fingerabdruck-Spektren von Pueraria lobata aus verschiedenen Herkunftsländern erstellt; Gleichzeitig wurde auf dieser Grundlage eine Ein-Test-Mehrfachbewertungs-Analysemethode (QAMS) für die Bestimmung des Pu-, Da-, Dae-, Ge-, Gee-, Ka-, Gl-, Td-, Tg- und Tx-Gehalts in Pueraria lobata etabliert, die systematisch die Qualitätsunterschiede von Pueraria lobata-Arzneimitteln aus verschiedenen Produktionsgebieten bewertet, eine empirische Grundlage für eine umfassende und systematische Kontrolle der Pueraria lobata-Qualität liefert und als Referenz für die Auswahl und Züchtung von qualitativ hochwertigen Keimplasma-Ressourcen von Pueraria lobata dient.

 

Bei dem Experiment wurde ein Diodenarray-Detektor verwendet, um ein vollständiges Wellenlängen-Scanning von 10 Flavonoiden bei 200-400nm durchzuführen. Die Ergebnisse zeigten, dass die UV-Spektren von Pu, Da, Dae, Ge, Gee, Ka, Gl, Td, Tg und Tx ähnlich waren, mit einem Absorptionsmaximum bei einer Wellenlänge von 256-274nm. Unter der Wellenlängenbedingung von 265 nm wurde festgestellt, dass die 10 getesteten Komponenten eine gute Basislinientrennung und eine stabile Basislinie aufwiesen, was den Anforderungen der quantitativen Analyse entspricht. Im Experiment wurden 75% Ethanol, 95% Ethanol, 75% Methanol und jeweils 25 ml Methanol als Extraktionslösungsmittel verwendet. Bei der Wahl von Methanol als Extraktionslösungsmittel war die Anzahl der chromatographischen Peaks angemessen und leicht zu trennen. Im Rahmen des Versuchs wurden auch die Methoden der Ultraschall- und der thermischen Rückflussbehandlung untersucht, wobei man sich schließlich für eine 30-minütige Ultraschallbehandlung entschied, die eine einfache und effiziente Methode darstellt. Im Rahmen des Versuchs wurden auch mobile Phasensysteme wie Methanol-Wasser, Acetonitril-Wasser, wässrige Acetonitril-0,2%-Phosphorsäure-Lösung und wässrige Acetonitril-0,2%-Ameisensäure-Lösung untersucht. Die endgültige Auswahl des Gradientenelutionssystems mit Acetonitril und 0,2-Phosphatlösung führte zu einer guten Trennwirkung und einer deutlichen Verbesserung des Tailing.
Um die umfassende Qualitätskontrolle von Pueraria lobata zu erleichtern, wurden verschiedene repräsentative Komponenten mit klarer Aktivität und hohem Gehalt als Indikatorkomponenten für die Bestimmung des QAMS-Gehalts im Experiment ausgewählt, darunter hauptsächlich Pu, Da, Dae, Ge, Gee, Ka, Gl, Td, Tg und Tx als die wichtigsten chemischen Komponenten. Aus den Ergebnissen der Messung des Gehalts der einzelnen Komponenten, der chromatographischen Trennung der einzelnen Komponenten sowie des Preises und der Verfügbarkeit von Referenzstandards geht hervor, dass Ka einen hohen Gehalt, eine gute Trennwirkung und eine einfache Identifizierung im Spektrum aufweist und sich in der mittleren Position des Spektrums befindet, was die Berechnung der relativen Retentionszeit der chromatographischen Peaks anderer Komponenten und die Identifizierung der chromatographischen Peaks erleichtert. Ka hat stabile Eigenschaften, ist kostengünstig und leicht zu beschaffen und hat die Eigenschaft, die Blutfette und den Blutzucker zu senken, die Mikrozirkulation zu verbessern und die Ethanoldehydrogenase zu aktivieren. Daher wurde Ka in dieser Studie als Referenzmaterial für die Bestimmung des QAMS-Gehalts gewählt.
Das in diesem Experiment ermittelte Fingerabdruck-Spektrum kann die Informationen über die chemische Zusammensetzung von Pueraria lobata wirksam charakterisieren. Die QAMS-Methode, die auf dem Fingerabdruck-Spektrum basiert, kann den Gehalt der Hauptwirkstoffe Pu, Da, Gl, Tx, Ge, Td, Dae, Ka, Gee und Tg in Pueraria lobata und Pueraria lobata effektiv bestimmen, was die Gesamtqualität der medizinischen Materialien von Pueraria lobata umfassend wiedergeben kann. Anhand der Ergebnisse der Inhaltsbestimmung und der Clustering-Heatmap lässt sich intuitiv erkennen, dass Pueraria lobata und Pueraria lobata in zwei Kategorien unterteilt werden können. Bei 20 Chargen Pueraria lobata und 10 Chargen Pueraria lobata aus verschiedenen Anbaugebieten gibt es signifikante Unterschiede in den Arten und Gehalten der wichtigsten Wirkstoffe. Die unterschiedlichen Bestandteile sind Ka, Da, Gl, Tx, Td und Ge. Der Grund dafür liegt in den unterschiedlichen Quellen von Kudzu-Blüten und rosa Kudzu-Blüten.
Gegenwärtig werden die getrockneten Blütenknospen von Pueraria lobata und Pueraria lobata als Quelle für Heilkräuter genannt. Da sich die Hauptwirkstoffe von Pueraria lobata und Pueraria lobata erheblich unterscheiden, sollte auch ihre klinische Wirksamkeit unterschiedlich sein. Daher sollten sie bei der Produktentwicklung und klinischen Anwendung unterschieden und unterschiedlich verwendet werden. Gleichzeitig hat Ge Hua ein großes Potenzial für die Entwicklung von Gesundheitsprodukten, und es ist dringend erforderlich, ein standardisiertes System zur Qualitätsbewertung von Ge Hua zu schaffen. Das von unserem Forschungsinstitut entwickelte Fingerabdruck-Spektrum in Kombination mit der Methode der Mehrfachbewertung kann eine Qualitätskontrolle von Pueraria lobata-Medizinprodukten mit mehreren Komponenten und Indizes ermöglichen und gleichzeitig die Verwendung von Referenzmaterialien reduzieren; Gleichzeitig kann es zwischen Pueraria lobata und Pueraria lobata unterscheiden und die Qualität von Pueraria lobata unterschiedlicher Herkunft effektiv bewerten. Die experimentellen Ergebnisse können als Referenz für die Modifikation und Verbesserung der Qualitätsstandards von Pueraria lobata dienen und können als Referenz für die Auswahl und Züchtung von qualitativ hochwertigen Keimplasma-Ressourcen von Pueraria lobata dienen. Es hat gute Anwendungsperspektiven in der allgemeinen Qualitätsbewertung Modus der traditionellen chinesischen Medizin.