Очистка, структурная характеристика и противоаллергическое исследование полисахаридов из белой свежей кожи
Белая свежая кожа - это высушенная кожа корня Dictamnus dasycarpus Turcz., растения из семейства Рутовые (Rutaceae). Она содержит полисахариды, флавоноиды, алкалоиды, стероиды и другие компоненты и обладает эффектами очищения от жара и сырости, лечения влажных тепловых язв, рассеивания ветра и детоксикации. Его можно использовать для лечения таких кожных заболеваний, как тинеа педис, крапивница, кожный зуд и экзема, он обладает сильным противоаллергическим и противозудным действием. Существуют различные типы и сложные структуры полисахаридов, извлеченных из китайской травяной медицины, и большая их часть обладает различными биологическими действиями, такими как содействие иммунной регуляции, антиоксидантное, противовоспалительное, противовирусное, противоопухолевое и т.д.
Кожные аллергии, вызванные косметикой, в последние годы вызывают серьезную обеспокоенность потребителей. Основной причиной кожной аллергии являются IgE-опосредованные реакции гиперчувствительности I типа, в ходе которых происходит ряд сложных процессов, таких как сенсибилизация к аллергенам, активация и дегрануляция тучных клеток, ответ иммунных клеток, что в конечном итоге приводит к возникновению аллергических реакций. Тучные клетки являются эффекторными клетками в аллергических реакциях и играют важную роль в аллергических заболеваниях кожи и воспалительных процессах. Кожные аллергии тесно связаны с барьерной функцией кожи, неврологическими факторами и воспалительными реакциями.
RBL-2H3 (базофильные лейкозные клетки, RBL-2H3) - это подтип крысиной базофильной опухолевой клеточной линии, которая богата высокоаффинными рецепторами IgE на клеточной поверхности и обладает различными биологическими характеристиками тучных клеток. Она признана в качестве модели in vitro, заменяющей тучные клетки, которые можно пассировать и культивировать. β - Аминогексозилтрансфераза (β - HEX) является отличительной гранулой тучных клеток и основным медиатором при изучении дегрануляции тучных клеток. Тучные клетки подвергаются дегрануляции при стимуляции синтетическим полиаминовым стимулятором C48/80 (Compound 48/80). В этот период уровень высвобождения β - HEX соответствует степени дегрануляции тучных клеток и положительно коррелирует с высвобождением гистамина. Поэтому его часто определяют как индикатор дегрануляции тучных клеток. Клеточная мембрана является важной частью барьерной функции кожи, а улучшенный тест на гемолиз эритроцитов (RBC) позволяет определить защитную функцию антимикробных активных веществ на клеточной мембране по количеству гемоглобина, вытекшего из эритроцитов. Кроме того, свободные радикалы в организме человека могут атаковать клеточные мембраны и белки, что приводит к старению и гибели клеток. Ингибирование активности свободных радикалов может эффективно облегчить старение клеток, вызванное свободными радикалами, и поддержать барьерную функцию кожи.
Zhao et al. обнаружили, что неочищенный экстракт белой свежей кожи ингибирует C48/80 индуцированную дегрануляцию тучных клеток, снижает высвобождение гистамина и β - HEX и оказывает противоаллергическое действие; Zhang et al. выделили чистый полисахарид белой свежей кожи и проверили его противопсориазный эффект после модификации сульфатированием; Shi et al. подтвердили его противовоспалительную активность с помощью экспериментов по набуханию ушей и проницаемости капилляров у мышей; Cong et al. подтвердили, что водный экстракт белой свежей кожи может ингибировать DNCB-индуцированную гиперчувствительность замедленного типа (DTH) у мышей и обладает функцией ингибирования специфического клеточного иммунитета мышей. До сих пор, несмотря на то, что были проведены исследования по изучению противоаллергического эффекта сырого экстракта белой свежей кожи, не было проведено исследований по проверке противоаллергического эффекта основного компонента водного экстракта белой свежей кожи - полисахаридов белой свежей кожи. Поэтому в данном эксперименте были выделены полисахариды из Bai Xianpi, проведен физико-химический анализ их компонентов, эксперимент по ингибированию дегрануляции тучных клеток RBL-2H3 и другие исследования и анализы были проведены с целью изучения противоаллергического эффекта, обеспечивая теоретическую основу для изучения полисахаридов белой свежей кожи в качестве противоаллергических веществ.

В данном исследовании из белой свежей кожи был выделен и изолирован полисахарид CDPS, а затем очищен для получения полисахарида белой свежей кожи CDPS-1. Характеристика CDPS-1 была проведена с использованием методов ГФХ, ИХ и ИК-Фурье. CDPS-1 состоит в основном из альфа-гликозидных связей, его молекулярная масса составляет 2577Da. Он состоит в основном из фукозы, глюкозы, ксилозы, рамнозы и галактозы, с молярным соотношением 0,41:1,38:3:15:15,4:79,61. Были определены скорость ингибирования, скорость ингибирования гемолиза РБК и скорость клиренса DPPH CDPS на дегрануляцию β - HEX из клеток RBL-2H3. Результаты показали, что в диапазоне концентраций 0,5-1,0 мг/мл CDPS оказывал хорошее ингибирующее действие на высвобождение β - HEX и защиту клеточных мембран RBC, с пиковыми значениями 28,54% и 62,1%, соответственно, и скоростью клиренса более 25% для DPPH. Полисахариды белой свежей кожи, выделенные в этом эксперименте, обладают хорошим противоаллергическим действием, и можно предположить, что их защитные и антиоксидантные способности на клеточных мембранах играют определенную роль в противоаллергическом механизме.