Purificación, caracterización estructural y estudio antialérgico de polisacáridos de piel blanca fresca
La piel fresca blanca es la piel seca de la raíz de Dictamnus dasycarpus Turcz, una planta de la familia Rutaceae. Contiene polisacáridos, flavonoides, alcaloides, esteroides y otros ingredientes, y tiene los efectos de eliminar el calor y la humedad, tratar las úlceras por calor húmedo, disipar el viento y desintoxicar. Puede utilizarse para tratar enfermedades de la piel como la tinea pedis, la urticaria, el picor cutáneo y el eccema, y tiene potentes efectos antialérgicos y contra el picor. Hay varios tipos y estructuras complejas de polisacáridos extraídos de la fitoterapia china, y gran parte de ellos tienen diversas actividades biológicas, como promover la regulación inmunitaria, antioxidante, antiinflamatoria, antiviral, antitumoral, etc.
En los últimos años, las alergias cutáneas causadas por los cosméticos han constituido un importante problema de seguridad para los consumidores. La principal causa de las alergias cutáneas son las reacciones de hipersensibilidad de tipo I mediadas por IgE, que experimentan una serie de procesos complejos como la sensibilización a los alérgenos, la activación y degranulación de los mastocitos y la respuesta de las células inmunitarias, que en última instancia conducen a la aparición de reacciones alérgicas. Los mastocitos son células efectoras en las reacciones alérgicas y desempeñan un papel importante en las enfermedades alérgicas de la piel y los procesos inflamatorios. Las alergias cutáneas están estrechamente relacionadas con la función de barrera de la piel, los factores neurológicos y las reacciones inflamatorias.
RBL-2H3 (en células leucémicas basófilas, RBL-2H3) es un subtipo de línea celular tumoral basófila de rata, que es rica en receptores de alta afinidad IgE en la superficie celular y tiene varias características biológicas de los mastocitos. Se reconoce como un modelo de sustitución in vitro de mastocitos que puede pasificarse y cultivarse. La β - Aminohexosiltransferasa (β - HEX) es un gránulo distintivo de los mastocitos y un mediador importante en el estudio de la degranulación de los mastocitos. Los mastocitos sufren una degranulación cuando son estimulados por el estimulante sintético de poliamina C48/80 (Compuesto 48/80). Durante este período, el nivel de liberación de β - HEX es coherente con el grado de degranulación de los mastocitos y se correlaciona positivamente con la liberación de histamina. Por lo tanto, a menudo se detecta como un indicador de la degranulación de los mastocitos. La membrana celular es una parte importante de la función de barrera de la piel, y la prueba mejorada de hemólisis de glóbulos rojos (GR) puede determinar la función protectora de las sustancias activas antimicrobianas en la membrana celular por la cantidad de hemoglobina filtrada de los glóbulos rojos. Además, los radicales libres en el cuerpo humano pueden atacar las membranas celulares y las proteínas, provocando el envejecimiento y la muerte de las células. La inhibición de la actividad de los radicales libres puede aliviar eficazmente el envejecimiento celular causado por los radicales libres y mantener la función de barrera de la piel.
Zhao et al. descubrieron que el extracto crudo de piel fresca blanca inhibe la degranulación de mastocitos inducida por C48/80, reduce la liberación de histamina y β - HEX y tiene efectos antialérgicos; Zhang et al. aislaron un polisacárido puro de piel fresca blanca y verificaron su efecto antipsoriasis tras modificar su sulfatación; Shi et al. validaron su actividad antiinflamatoria mediante experimentos de inflamación de la oreja de ratón y experimentos de permeabilidad capilar de ratón; Cong et al. confirmaron que el extracto acuoso de piel fresca blanca puede inhibir la hipersensibilidad de tipo retardado (DTH) inducida por DNCB en ratones y tiene la función de inhibir la inmunidad celular específica del ratón. Hasta ahora, aunque se han realizado algunos avances en la investigación sobre el efecto antialérgico del extracto crudo de piel fresca blanca, no se ha realizado ningún estudio para verificar el efecto antialérgico del componente principal del extracto acuoso de piel fresca blanca: los polisacáridos de piel fresca blanca. Por lo tanto, en este experimento se extrajeron y aislaron polisacáridos de Bai Xianpi, y se realizaron análisis fisicoquímicos de sus componentes; se llevó a cabo el experimento de inhibición de la degranulación de mastocitos RBL-2H3 y otras detecciones y análisis con el objetivo de estudiar el efecto antialérgico, proporcionando una base teórica para el estudio de los polisacáridos de piel fresca blanca como sustancias antialérgicas.
En este estudio se extrajo y aisló piel fresca blanca, obteniéndose el polisacárido de piel fresca blanca CDPS, y se purificó aún más para obtener el polisacárido de piel fresca blanca CDPS-1. La caracterización del CDPS-1 se llevó a cabo mediante los métodos GFC, IC y FT-IR. El CDPS-1 se compone principalmente de enlaces alfa glicosídicos, con un peso molecular de 2577Da. Se compone principalmente de fucosa, glucosa, xilosa, ramnosa y galactosa, con una relación molar de 0,41:1,38:3:15:15,4:79,61. Se determinaron la tasa de inhibición, la tasa de inhibición de la hemólisis de los glóbulos rojos y la tasa de eliminación del DPPH de los CDPS en la liberación de la degranulación de β - HEX de las células RBL-2H3. Los resultados mostraron que dentro del rango de concentración de 0,5-1,0mg/mL, CDPS tuvo un buen efecto inhibitorio sobre la liberación de β - HEX y la protección de la membrana celular RBC, con valores pico de 28,54% y 62,1%, respectivamente, y una tasa de aclaramiento de más de 25% para DPPH. Los polisacáridos de piel fresca blanca extraídos en este experimento tienen buenos efectos antialérgicos, y se especula que sus capacidades protectoras y antioxidantes sobre las membranas celulares desempeñan un cierto papel en el mecanismo antialérgico.