Oprensning, strukturel karakterisering og antiallergisk undersøgelse af polysakkarider fra hvid, frisk hud
Hvid frisk hud er den tørrede rodhud af Dictamnus dasycarpus Turcz. en plante i Rutaceae-familien. Den indeholder polysaccharider, flavonoider, alkaloider, steroider og andre ingredienser og har den virkning, at den fjerner varme og fugt, behandler fugtige varmesår, fordriver vind og afgifter. Den kan bruges til at behandle hudsygdomme som tinea pedis, urticaria, hudkløe og eksem og har stærke antiallergiske og kløestillende virkninger. Der findes forskellige typer og komplekse strukturer af polysaccharider udvundet af kinesisk urtemedicin, og en stor del af dem har forskellige biologiske aktiviteter som f.eks. fremme af immunregulering, antioxidant, antiinflammatorisk, antiviral, antitumor osv.
Hudallergier forårsaget af kosmetik har været et stort sikkerhedsproblem for forbrugerne i de senere år. Hovedårsagen til hudallergi er IgE-medierede type I-overfølsomhedsreaktioner, som gennemgår en række komplekse processer såsom allergensensibilisering, mastcelleaktivering og degranulering samt immuncellerespons, hvilket i sidste ende fører til forekomsten af allergiske reaktioner. Mastceller er effektorceller i allergiske reaktioner og spiller en vigtig rolle i allergiske hudsygdomme og inflammatoriske processer. Hudallergier er tæt forbundet med hudens barrierefunktion, neurologiske faktorer og inflammatoriske reaktioner.
RBL-2H3 (basofile leukæmiceller, RBL-2H3) er en undertype af basofile tumorcellelinjer fra rotter, som er rige på IgE-receptorer med høj affinitet på celleoverfladen og har forskellige biologiske egenskaber ved mastceller. Den er anerkendt som en in vitro-erstatningsmodel for mastceller, der kan passeres og dyrkes. β - Aminohexosyltransferase (β - HEX) er et kendetegnende granulat for mastceller og en vigtig mediator i undersøgelsen af mastcelledegranulering. Mastceller gennemgår degranulering, når de stimuleres af det syntetiske polyaminstimulerende middel C48/80 (Compound 48/80). I denne periode er frigivelsesniveauet af β - HEX i overensstemmelse med graden af mastcelledegranulering og positivt korreleret med histaminfrigivelse. Derfor påvises det ofte som en indikator for mastcelledegranulering. Cellemembranen er en vigtig del af hudens barrierefunktion, og den forbedrede hæmolysetest for røde blodlegemer (RBC) kan bestemme den beskyttende funktion af antimikrobielle aktive stoffer på cellemembranen ved hjælp af mængden af hæmoglobin, der er lækket fra de røde blodlegemer. Derudover kan frie radikaler i menneskekroppen angribe cellemembraner og proteiner, hvilket fører til cellealdring og -død. Ved at hæmme aktiviteten af frie radikaler kan man effektivt lindre cellealdring forårsaget af frie radikaler og opretholde hudens barrierefunktion.
Zhao et al. fandt, at råekstraktet af hvid frisk hud hæmmer C48/80-induceret degranulering af mastceller, reducerer histamin- og β-HEX-frigivelse og har antiallergiske virkninger; Zhang et al. isolerede et rent polysaccharid af hvid frisk hud og verificerede dets antipsoriasis-effekt efter sulfateringsmodifikation; Shi et al. validerede dets antiinflammatoriske aktivitet gennem eksperimenter med hævelse af museører og kapillærpermeabilitet hos mus; Cong et al. bekræftede, at vandekstraktet af hvid frisk hud kan hæmme DNCB-induceret forsinket hypersensitivitet (DTH) hos mus og har den funktion, at det hæmmer musens specifikke cellulære immunitet. Selvom der indtil nu har været en del forskning i den antiallergiske virkning af råekstrakt af hvid frisk hud, har der ikke været nogen undersøgelse for at verificere den antiallergiske virkning af hovedkomponenten i vandekstrakt af hvid frisk hud - polysaccharider af hvid frisk hud. Derfor ekstraherede og isolerede dette eksperiment polysaccharider fra Bai Xianpi og udførte fysisk-kemisk analyse af dets komponenter; hæmningen af RBL-2H3 mastcelledegranuleringseksperimentet og anden påvisning og analyse blev udført med det formål at studere den antiallergiske effekt, hvilket gav et teoretisk grundlag for undersøgelsen af polysaccharider fra hvid frisk hud som antiallergiske stoffer.
I denne undersøgelse blev hvid frisk hud udvundet og isoleret for at opnå polysakkarid CDPS fra hvid frisk hud, og det blev yderligere oprenset for at opnå polysakkarid CDPS-1 fra hvid frisk hud. Karakterisering af CDPS-1 blev udført ved hjælp af GFC-, IC- og FT-IR-metoder. CDPS-1 består hovedsageligt af alfa-glykosidiske bindinger med en molekylvægt på 2577Da. Det består hovedsageligt af fucose, glukose, xylose, rhamnose og galactose med et molforhold på 0,41:1,38:3:15:15,4:79,61. Hæmningshastigheden, hæmningshastigheden for RBC-hæmolyse og DPPH-clearancehastigheden for CDPS på degranuleringsfrigivelsen af β-HEX fra RBL-2H3-celler blev bestemt. Resultaterne viste, at CDPS inden for koncentrationsområdet 0,5-1,0 mg/ml havde en god hæmmende effekt på frigivelse af β-HEX og beskyttelse af RBC-cellemembranen med topværdier på henholdsvis 28,54% og 62,1% og en clearancehastighed på over 25% for DPPH. De hvide polysaccharider fra frisk hud, der blev udvundet i dette eksperiment, har gode antiallergiske virkninger, og det spekuleres i, at deres beskyttende og antioxidante evner på cellemembraner spiller en vis rolle i den antiallergiske mekanisme.