Reinigung, strukturelle Charakterisierung und antiallergische Untersuchung von Polysacchariden aus weißer Frischhaut
Weiße frische Haut ist die getrocknete Wurzelhaut von Dictamnus dasycarpus Turcz, einer Pflanze aus der Familie der Rutaceae. Sie enthält Polysaccharide, Flavonoide, Alkaloide, Steroide und andere Inhaltsstoffe und wirkt hitze- und feuchtigkeitslösend, behandelt feuchte Hitzegeschwüre, vertreibt Wind und entgiftet. Es kann zur Behandlung von Hautkrankheiten wie Tinea pedis, Urtikaria, Juckreiz und Ekzemen verwendet werden und hat eine starke antiallergische und juckreizstillende Wirkung. Es gibt verschiedene Arten und komplexe Strukturen von Polysacchariden, die aus der chinesischen Kräutermedizin extrahiert werden, und ein großer Teil von ihnen hat verschiedene biologische Aktivitäten, wie z. B. die Förderung der Immunregulierung, Antioxidantien, entzündungshemmende, antivirale und Anti-Tumor-Wirkung usw.
Durch Kosmetika verursachte Hautallergien sind in den letzten Jahren zu einem wichtigen Sicherheitsproblem für die Verbraucher geworden. Die Hauptursache für Hautallergien sind IgE-vermittelte Überempfindlichkeitsreaktionen vom Typ I, die eine Reihe komplexer Prozesse durchlaufen, wie z. B. die Sensibilisierung für das Allergen, die Aktivierung und Degranulation von Mastzellen und die Reaktion von Immunzellen, die schließlich zum Auftreten allergischer Reaktionen führen. Mastzellen sind Effektorzellen bei allergischen Reaktionen und spielen eine wichtige Rolle bei allergischen Hauterkrankungen und Entzündungsprozessen. Hautallergien stehen in engem Zusammenhang mit der Barrierefunktion der Haut, neurologischen Faktoren und Entzündungsreaktionen.
RBL-2H3 (basophile Leukämiezellen, RBL-2H3) ist ein Subtyp der basophilen Tumorzelllinie der Ratte, die reich an hochaffinen IgE-Rezeptoren auf der Zelloberfläche ist und verschiedene biologische Eigenschaften von Mastzellen aufweist. Sie ist als In-vitro-Ersatzmodell für Mastzellen anerkannt, das passagiert und kultiviert werden kann. β-Aminohexosyltransferase (β-HEX) ist ein charakteristisches Granulat von Mastzellen und ein wichtiger Mediator bei der Untersuchung der Mastzelldegranulation. Mastzellen durchlaufen eine Degranulation, wenn sie durch das synthetische Polyamin-Stimulans C48/80 (Compound 48/80) stimuliert werden. Während dieses Zeitraums steht die Freisetzung von β-HEX im Einklang mit dem Grad der Mastzelldegranulation und korreliert positiv mit der Histaminfreisetzung. Daher wird es häufig als Indikator für die Mastzelldegranulation nachgewiesen. Die Zellmembran ist ein wichtiger Teil der Hautbarrierefunktion, und mit dem verbesserten Hämolysetest für rote Blutkörperchen (RBC) kann die Schutzfunktion antimikrobieller Wirkstoffe auf der Zellmembran anhand der Menge des aus den roten Blutkörperchen ausgetretenen Hämoglobins bestimmt werden. Darüber hinaus können freie Radikale im menschlichen Körper Zellmembranen und Proteine angreifen, was zu Zellalterung und Zelltod führt. Die Hemmung der Aktivität freier Radikale kann die durch freie Radikale verursachte Zellalterung wirksam abmildern und die Barrierefunktion der Haut aufrechterhalten.
Zhao et al. fanden heraus, dass der Rohextrakt aus weißer Frischhaut die C48/80-induzierte Degranulation von Mastzellen hemmt, die Freisetzung von Histamin und β-HEX reduziert und antiallergische Wirkungen hat; Zhang et al. isolierten ein reines Polysaccharid aus weißer Frischhaut und überprüften seine Anti-Psoriasis-Wirkung nach Sulfatierungsmodifikation; Shi et al. bestätigten seine entzündungshemmende Wirkung durch Experimente zum Anschwellen von Mäuseohren und zur Kapillardurchlässigkeit von Mäusen; Cong et al. bestätigten, dass der Wasserextrakt aus weißer Frischhaut die DNCB-induzierte verzögerte Hypersensitivität (DTH) bei Mäusen hemmen kann und die Funktion hat, die mäusespezifische zelluläre Immunität zu hemmen. Bis jetzt gab es zwar einige Forschungsfortschritte über die antiallergische Wirkung des Rohextrakts aus weißer Frischhaut, aber es gab keine Studie, die die antiallergische Wirkung des Hauptbestandteils des Wasserextrakts aus weißer Frischhaut - Polysaccharide aus weißer Frischhaut - überprüft hat. Daher wurden in diesem Experiment Polysaccharide aus Bai Xianpi extrahiert und isoliert und eine physikochemische Analyse ihrer Bestandteile durchgeführt. Die Hemmung der RBL-2H3-Mastzelldegranulation und andere Nachweise und Analysen wurden mit dem Ziel durchgeführt, die antiallergische Wirkung zu untersuchen und eine theoretische Grundlage für die Untersuchung von Polysacchariden aus weißer frischer Haut als antiallergische Substanzen zu schaffen.
In dieser Studie wurde weiße Frischhaut extrahiert und isoliert, um das weiße Frischhautpolysaccharid CDPS zu erhalten, und weiter gereinigt, um das weiße Frischhautpolysaccharid CDPS-1 zu erhalten. Die Charakterisierung von CDPS-1 wurde mit Hilfe von GFC-, IC- und FT-IR-Methoden durchgeführt. CDPS-1 besteht hauptsächlich aus alpha-glykosidischen Bindungen und hat ein Molekulargewicht von 2577Da. Es besteht hauptsächlich aus Fucose, Glucose, Xylose, Rhamnose und Galactose mit einem molaren Verhältnis von 0,41:1,38:3:15:15,4:79,61. Die Hemmungsrate, die Hemmungsrate der RBC-Hämolyse und die DPPH-Clearance-Rate von CDPS auf die Degranulationsfreisetzung von β-HEX aus RBL-2H3-Zellen wurden bestimmt. Die Ergebnisse zeigten, dass CDPS im Konzentrationsbereich von 0,5-1,0mg/mL eine gute hemmende Wirkung auf die β-HEX-Freisetzung und den Schutz der RBC-Zellmembran hatte, mit Spitzenwerten von 28,54% bzw. 62,1% und einer Clearance-Rate von über 25% für DPPH. Die in diesem Experiment extrahierten Polysaccharide der weißen Frischhaut haben eine gute antiallergische Wirkung, und es wird vermutet, dass ihre schützenden und antioxidativen Fähigkeiten auf Zellmembranen eine gewisse Rolle bei dem antiallergischen Mechanismus spielen.