Friss fehér bőrből származó poliszacharidok tisztítása, szerkezeti jellemzése és antiallergiás vizsgálata
A fehér friss héj a Rutaceae családba tartozó Dictamnus dasycarpus Turcz. szárított gyökérhéja. Poliszacharidokat, flavonoidokat, alkaloidokat, szteroidokat és egyéb összetevőket tartalmaz, és hő- és nedvességtisztító, nedves hőfájdalmak kezelésére, a szél elűzésére és méregtelenítésre alkalmas hatású. Használható bőrbetegségek, például tinea pedis, csalánkiütés, bőrviszketés és ekcéma kezelésére, és erős antiallergiás és viszketés elleni hatással rendelkezik. A kínai növényi gyógyászatból kivont poliszacharidok különböző típusú és összetett szerkezetűek, és nagy részük különböző biológiai aktivitásokkal rendelkezik, mint például az immunrendszer szabályozásának elősegítése, antioxidáns, gyulladáscsökkentő, vírusellenes, daganatellenes stb.
A kozmetikumok által okozott bőrallergiák az utóbbi években a fogyasztók számára komoly biztonsági problémát jelentenek. A bőrallergiák fő oka az IgE által közvetített I. típusú túlérzékenységi reakciók, amelyek egy sor összetett folyamaton mennek keresztül, mint például az allergén szenzibilizáció, a hízósejtek aktivációja és degranulációja, valamint az immunsejtek válasza, ami végül az allergiás reakciók megjelenéséhez vezet. A hízósejtek az allergiás reakciók effektor sejtjei, és fontos szerepet játszanak az allergiás bőrbetegségekben és a gyulladásos folyamatokban. A bőrallergiák szorosan kapcsolódnak a bőr barrier funkciójához, neurológiai tényezőkhöz és gyulladásos reakciókhoz.
Az RBL-2H3 (bazofil leukémiás sejtek, RBL-2H3) a patkány bazofil tumoros sejtvonal egyik altípusa, amely gazdag IgE nagy affinitású receptorokban a sejtfelszínen, és a hízósejtek különböző biológiai jellemzőivel rendelkezik. A hízósejtek in vitro helyettesítő modelljeként ismerik el, amely passzázsolható és tenyészthető. A β - Aminohexoszil-transzferáz (β - HEX) a hízósejtek egyik jellegzetes granulátuma és a hízósejtek degranulációjának vizsgálatában az egyik fő mediátor. A hízósejtek a C48/80 szintetikus poliamin stimuláns (48/80 vegyület) stimulálásakor degranulálódnak. Ebben az időszakban a β - HEX felszabadulási szintje összhangban van a hízósejtek degranulációjának mértékével, és pozitívan korrelál a hisztamin felszabadulással. Ezért gyakran a hízósejtek degranulációjának indikátoraként detektálják. A sejtmembrán a bőr barrier funkciójának fontos része, és a továbbfejlesztett vörösvérsejt (RBC) hemolízis teszt a vörösvértestekből kiszivárgó hemoglobin mennyisége alapján meghatározhatja az antimikrobiális hatóanyagok védőfunkcióját a sejtmembránon. Ezenkívül az emberi szervezetben a szabad gyökök megtámadhatják a sejtmembránokat és a fehérjéket, ami a sejtek öregedéséhez és halálához vezet. A szabad gyökök aktivitásának gátlása hatékonyan enyhítheti a szabad gyökök által okozott sejtöregedést és fenntarthatja a bőr barrier funkcióját.
Zhao és munkatársai megállapították, hogy a fehér friss bőr nyers kivonata gátolja a hízósejtek C48/80 indukálta degranulációját, csökkenti a hisztamin és a β-HEX felszabadulását, és antiallergiás hatással rendelkezik; Zhang és munkatársai izoláltak egy tiszta fehér friss bőr poliszacharidot, és igazolták a pszoriázis elleni hatását szulfátos módosítás után; Shi és munkatársai. igazolta gyulladáscsökkentő hatását egér fülduzzadási kísérletekkel és egér kapilláris áteresztőképességi kísérletekkel; Cong és munkatársai megerősítették, hogy a fehér friss bőr vizes kivonata képes gátolni a DNCB által kiváltott késleltetett típusú túlérzékenységet (DTH) egerekben, és gátolja az egér specifikus sejtes immunitást. Mostanáig, bár a fehér friss bőr nyers kivonatának antiallergiás hatásával kapcsolatban történt némi kutatási előrehaladás, nem volt olyan tanulmány, amely a fehér friss bőr vizes kivonatának fő összetevője - a fehér friss bőr poliszacharidok - antiallergiás hatását igazolta volna. Ezért ebben a kísérletben a Bai Xianpi-ből kivonták és izolálták a poliszacharidokat, és fiziko-kémiai elemzést végeztek az összetevőkről; az RBL-2H3 hízósejt degranulációs kísérletet és más kimutatásokat és elemzéseket végeztek az antiallergiás hatás tanulmányozása céljából, elméleti alapot nyújtva a fehér friss bőr poliszacharidok mint antiallergiás anyagok tanulmányozásához.
Ebben a tanulmányban a fehér friss bőrből extrahálták és izolálták a fehér friss bőr poliszacharidot CDPS-t, majd tovább tisztították, hogy fehér friss bőr poliszacharidot CDPS-1-et kapjanak. A CDPS-1 jellemzését GFC, IC és FT-IR módszerekkel végeztük. A CDPS-1 főleg alfa-glikozidos kötésekből áll, molekulatömege 2577Da. Főleg fukózból, glükózból, xilózból, ramnózból és galaktózból áll, 0,41:1,38:3:15:15,4:79,61 mólarányban. Meghatároztuk a CDPS gátlási arányát, az RBC hemolízis gátlási arányát és a DPPH clearance arányát az RBL-2H3 sejtek β - HEX degranulációs felszabadulására. Az eredmények azt mutatták, hogy a 0,5-1,0 mg/ml koncentrációtartományban a CDPS jó gátló hatással volt a β - HEX felszabadulására és az RBC sejtmembrán védelmére, 28,54% és 62,1% csúcsértékekkel, illetve 25% feletti DPPH clearance rátával. Az ebben a kísérletben kivont fehér friss bőr poliszacharidok jó antiallergiás hatással rendelkeznek, és feltételezhető, hogy a sejtmembránokra gyakorolt védő és antioxidáns képességeik bizonyos szerepet játszanak az antiallergiás mechanizmusban.