Определение содержания многокомпонентных веществ в коре корня фенхеля на основе UPLC и качественный анализ в разные периоды цветения цветков сливы
Мей имеет долгую и глубокую историю культивирования в Китае, с широким разнообразием сортов. Это многолетнее небольшое дерево или кустарник, цветы и плоды которого можно использовать в лечебных целях. Цветки сливы - одно из традиционных цветочных лекарственных растений в Китае. Согласно "Сборнику лекарственных средств", цветки сливы имеют плоскую природу, слегка кислый вкус и относятся к меридианам печени, желудка и легких. Он включен в Фармакопею Китайской Народной Республики (далее - "Китайская фармакопея") и получен из розового растения Prunus mume (Sieb.) Sieb Высушенные цветочные почки et Zucc. Оказывает успокаивающее действие на печень, растворяет мокроту и рассасывает узлы. Обычно используется для лечения ци цветков сливы, болей ци печени и желудка, депрессии и раздражительности, плохого аппетита и золотухи. Слива культивируется в различных регионах Китая, а основными районами, в которых используется цветение сливы, являются Цзянсу, Чжэцзян, Аньхой и другие регионы.
В настоящее время из цветков сливы можно выделить более сотни химических компонентов, в основном это летучие компоненты, флавоноиды, фенольные кислоты, продукты ацилирования, фенольные гликозиды и спиртовые гликозиды. Среди них фенольные кислоты и флавоноиды обладают различными фармакологическими свойствами, такими как антибактериальное, противовоспалительное, антиоксидантное и ингибирование выработки меланина, которые являются основной материальной базой для фармакологической активности цветков сливы. В текущей версии Китайской фармакопеи указаны три показателя определения содержания: хлорогеновая кислота, гиперозид и изокверцитрин. Чжэн и др. провели контроль качества на основе содержания шести компонентов в цветках сливы, включая рутин, гиперозид, изокверцитрин, кверцетин, каэмпферол и изорамнетин. Однако о содержании других флавоноидов не сообщалось, и исследований по контролю качества цветков сливы по-прежнему относительно мало.
Учитывая, что фенольные кислоты и флавоноиды являются основными веществами для фармакологических эффектов цветков сливы, данное исследование основано на обзоре литературы. В качестве индикаторов контроля качества были выбраны три репрезентативные фенольные кислоты - неохлорогеновая, хлорогеновая и криптохлорогеновая, а также шесть репрезентативных флавоноидных компонентов - гиперозид, изокверцитрин, рутин, кверцетин-3-O-глюкозид, нарингенин и каэмпферол-3-O-рутинозид. Был разработан метод UPLC для одновременного определения содержания девяти индикаторных компонентов в лекарственном сырье цветков сливы. Было собрано 45 партий лекарственного сырья цветков сливы, которые были разделены на три категории: стадия бутонизации, стадия пика цветения и стадия позднего цветения. Сравнивались и анализировались различия в их химическом составе.
Из-за сложного химического состава цветков сливы трудно оценить качество лекарственного сырья по изменениям в одном компоненте. Однако в данном исследовании тенденция изменения качества может быть определена путем одновременного измерения нескольких типов активных ингредиентов, чтобы отразить изменения в содержании в разное время. Согласно историческим записям в традиционной китайской медицине, существуют различия в качестве цветков сливы между теми, которые еще не распустились, и теми, которые распустились. Однако в настоящее время нет подробных отчетов об исследовании качества различных стадий роста. Поэтому сравнение качества цветков сливы в разные периоды цветения имеет большое значение для определения периода сбора цветков сливы.

Результаты определения содержания компонентов в данном исследовании показали, что содержание основных фенольных кислот, таких как неохлорогеновая и хлорогеновая кислоты, в лекарственном сырье цветков сливы в разные периоды цветения было наиболее высоким в стадии бутона, а содержание флавоноидов, таких как гесперидин, изокверцитрин и рутин, было наиболее высоким в период пика цветения. Изменения в содержании компонентов фенольных кислот согласуются с тенденцией, отмеченной в литературе, то есть содержание хлорогеновой кислоты уменьшается с увеличением стадии цветения от стадии бутона до конца цветения. Таким образом, основной причиной различий в периодах цветения цветков сливы являются различия в составе фенольных кислот.
В последние годы использование многокомпонентного анализа в сочетании с распознаванием химических моделей для анализа различий в образцах традиционной китайской медицины широко применяется в исследованиях по оценке качества традиционной китайской медицины. В данном исследовании изучался метод идентификации различных периодов цветения лекарственного сырья цветков сливы путем одновременного измерения содержания 9 компонентов в 45 партиях лекарственного сырья цветков сливы и их анализа с помощью химических моделей. По результатам HCA-анализа образцы цветков сливы трех периодов цветения были объединены в три категории, причем все образцы цветков сливы из стадии бутонизации были объединены в одну категорию, большинство образцов цветков сливы из позднего периода цветения - в одну категорию, а все образцы из периода пика цветения - в одну категорию. Результаты показали, что существуют значительные различия в составе лекарственного сырья цветков сливы в разные периоды цветения. Комбинируя PCA и PLS-DA, был проведен дальнейший анализ маркеров различий качества цветков сливы в разные периоды цветения. Результаты показали, что образцы цветков сливы в три периода цветения были значительно расположены в разных пространственных позициях, что отражает различия в образцах цветков сливы в разные периоды цветения. В то же время было обнаружено, что три компонента фенольных кислот, а именно неохлорогеновая кислота, хлорогеновая кислота и криптохлорогеновая кислота, вносят значительный вклад в дифференциацию образцов из разных периодов цветения. Это согласуется с выводом о том, что содержание основных компонентов фенольных кислот в разные периоды цветения цветков сливы неодинаково.
Таким образом, в данном исследовании был разработан метод определения содержания многочисленных компонентов в лекарственном сырье цветков сливы, что позволило повысить стандарты качества лекарственного сырья цветков сливы. В то же время, в сочетании с хемометрическим анализом, были выявлены различия в содержании компонентов фенольных кислот в разные периоды цветения цветков сливы, а также проведен контроль качества, отражающий признаки изменения качества цветков сливы.