Identification du scarabée sinensis et sa préparation par ions caractéristiques
Le ver du scarabée de terre a été mentionné pour la première fois dans le Classique de Materia Medica de Shennong, où il était classé dans la catégorie moyenne. Le scarabée sinensis Walker ou Steleophaga plancyi (Boleny) est le corps femelle séché d'Eupolyphaga sinensis Walker ou Steleophaga plancyi. Le coléoptère terrestre contient principalement des acides aminés, des protéines, des composés d'huile volatile et d'autres ingrédients tels que des alcaloïdes, des acides gras, des ingrédients actifs fibrinolytiques et des oligo-éléments. Le coléoptère a pour effet de disperser la stase sanguine, d'éliminer les nœuds fermes, la détumescence et la douleur, d'abaisser la poitrine et d'ouvrir les canaux, etc. Elle est utilisée pour les contusions et les blessures, les lésions des tendons et les fractures, la stase sanguine et l'aménorrhée, la stase sanguine post-partum et les douleurs abdominales, les signes et les gonflements. La recherche pharmacologique moderne montre que le scarabée de terre a des activités anticoagulantes, antitumorales, régulatrices des lipides sanguins, analgésiques, anti-inflammatoires et bactéricides, et qu'il est même appelé "le premier médicament à réguler le flux sanguin". Il est largement utilisé dans la pratique clinique (selon les statistiques de la base de données de Yaozhinet, 151 prescriptions de médicaments traditionnels chinois brevetés et de préparations simples contenant du coléoptère terrestre ont été recueillies), et la posologie est également importante. À l'heure actuelle, il existe deux types de carabes vendus sur le marché : les carabes sauvages et les carabes élevés artificiellement. Toutefois, comme le nombre de scarabées sauvages diminue d'année en année, les produits élevés artificiellement représentent une grande partie de l'application clinique, et le comportement de falsification artificielle et d'impureté se produit de temps en temps, ce qui peut conduire à une évaluation erronée uniquement par l'identification de leurs caractéristiques. Dans l'ensemble, les éléments de test inclus dans l'édition 2020 de la pharmacopée chinoise pour le ver de terre sont relativement simples et ne peuvent pas refléter de manière complète et précise l'authenticité et la qualité du ver de terre.

Le coléoptère terrestre contient principalement des acides aminés, des protéines, des composés d'huile volatile, etc. À ce stade, la recherche sur la qualité se concentre également sur ces composants. Ces dernières années, certains chercheurs ont également utilisé des méthodes de pharmacognosie moléculaire pour étudier l'authenticité des carabes. Par exemple, Chen et al. ont également établi la méthode d'identification des scarabées eupolyphaga et de leur faux scarabée de Phnom Penh par chromatographie et biologie moléculaire. Après comparaison des codes-barres ADN avec la base de données, la séquence de l'espèce la plus proche et sa comparaison peuvent être données, ce qui permet de déterminer clairement la source des variétés ; Lu et al. ont utilisé l'électrophorèse sur gel de polyacrylamide pour identifier les protéines de trois types de coléoptères terrestres et celles provenant du même endroit et d'endroits différents. Cette méthode présente une résolution élevée et une bonne reproductibilité. Toutefois, la technologie de la pharmacognosie moléculaire requiert des exigences élevées en matière de laboratoire et est difficile à promouvoir, avec certaines limitations. Dans la pharmacopée de la République populaire de Chine (édition 2020) (ci-après dénommée "pharmacopée chinoise"), seules l'identification microscopique et l'identification par couche mince figurent au chapitre de l'identification des matières médicinales du ground beetle sinensis, et cette méthode ne s'applique qu'à l'identification des matières premières. Pour le ground beetle sinensis extrait et les préparations formulées contenant du ground beetle sinensis, la méthode est peu transmissible et ne peut être distinguée efficacement.
En tant que biomarqueurs différant d'une espèce à l'autre, les peptides caractéristiques sont de plus en plus utilisés dans la recherche en médecine animale. Certains chercheurs ont réalisé des recherches sur la tortue A, la corne d'antilope, la colle de peau d'âne, la gomme de corne de cerf, le mille-pattes, la corne de cerf, etc. grâce à la technologie des peptides caractéristiques. Ses caractéristiques de bonne spécificité et de simplicité d'utilisation en font un outil plus facile à promouvoir dans les contrôles quotidiens. La technologie des peptides caractéristiques basée sur la détection par spectrométrie de masse peut simultanément définir plusieurs espèces d'ions peptidiques caractéristiques comme indicateurs de détection, ce qui devrait permettre d'identifier l'authenticité tout en déterminant avec précision les composants frelatés et en quantifiant relativement les composants frelatés. Les perspectives d'application sont vastes et prometteuses. La détermination des paires d'ions a été incluse dans les éléments d'identification de la colle de peau d'âne, de la colle de bois de cerf et de la colle d'écaille de tortue dans la pharmacopée chinoise (2020). L'apparition de peptides caractéristiques en tant qu'indicateurs de qualité dans le code juridique officiel de la Chine a également mis fin à la situation où les médicaments pour animaux n'ont pas de composants de contrôle de qualité spécifiques dans les normes juridiques. L'extrait utilise principalement l'eau comme solvant. Après décoction et ébullition des drogues animales telles que le scarabée terrestre, le collagène subit une dégradation non spécifique pour former des peptides solubles dans l'eau. Certains peptides peuvent être absorbés dans le sang à travers le biofilm et avoir divers effets biologiques. Toutefois, il n'existe pas de rapport sur l'identification du scarabée de terre sinensis et sa préparation par des ions caractéristiques dans le pays et à l'étranger. Dans cette étude, la technologie d'identification des ions caractéristiques susmentionnée a été utilisée comme référence pour identifier l'authenticité des scarabées terrestres, fournissant ainsi une référence pour la recherche sur la qualité des scarabées terrestres et de leurs préparations.

Le ground beetle sinensis s'est avéré efficace dans le traitement de diverses maladies, telles que le cancer, l'inhibition de la thrombose, l'amélioration de l'immunité et le traitement de la nécrose avasculaire de la tête fémorale. Récemment, il a été rapporté que le doryphore, la sangsue et le mille-pattes présentaient une efficacité clinique évidente dans l'endométrite. Toutefois, il est difficile d'identifier correctement les carabes et les prescriptions contenant des carabes. À l'heure actuelle, les tests de qualité des médicaments pour animaux se concentrent principalement sur des méthodes telles que la morphologie, la microscopie et l'analyse de la couche mince. En outre, la plupart des médicaments pour animaux contiennent des compositions similaires d'acides aminés et de nucléosides, ce qui entraîne également une ambiguïté dans l'identification et l'analyse de la qualité des variétés de médicaments pour animaux. Il est donc essentiel de développer et d'établir une série de méthodes analytiques exclusives pour l'identification et l'évaluation des médicaments pour animaux afin d'en contrôler et d'en évaluer la qualité. Ces dernières années, le modèle de contrôle de la qualité de la médecine traditionnelle chinoise basée sur l'analyse qualitative/quantitative des peptides caractéristiques a été progressivement popularisé et appliqué. La pharmacopée chinoise 2020 contient les méthodes exclusives d'identification des peptides de la colle de peau d'âne, de la gomme de corne de cerf et de la gomme d'écaille de tortue, mais il n'existe pas de méthode d'identification des ions caractéristiques du scarabée terrestre.
Les ions caractéristiques établis dans cette étude ont été détectés par la technologie de digestion des protéines en utilisant une solution de bicarbonate d'ammonium 1% comme solvant d'extraction et la trypsine pour l'hydrolyse enzymatique de l'échantillon ; Et la méthode d'extraction, le dosage enzymatique et le temps d'extraction des échantillons ont été étudiés, et les conditions optimales d'extraction ont été déterminées comme étant le reflux de chauffage (méthode d'extraction), 50 μ L (dosage enzymatique), et 30 minutes (temps d'extraction).

La méthode de contrôle de la qualité du ver de terre inscrite dans la pharmacopée de la République populaire de Chine étant relativement simple, il n'est pas rare de produire et de vendre de faux produits et de faire passer les produits de qualité inférieure pour des produits de qualité supérieure sur le marché du ver de terre. À l'heure actuelle, le prix du ver de terre continue d'augmenter sur le marché. Pour des raisons économiques, les contrevenants ont ajouté de l'alun, du sel et d'autres ingrédients aux médicaments à base de ver de terre afin d'augmenter leurs bénéfices, et ont même utilisé de faux produits pour remplacer les produits authentiques. En outre, le scarabée de Phnom Penh a également été inclus dans la norme de la médecine traditionnelle chinoise de la province de Guangdong et a été utilisé comme produit ménager local pendant longtemps. Toutefois, les recherches montrent que la composition du scarabée de Phnom Penh est différente de celle de l'Eupolyphaga et de l'Eupolyphaga ; dans le même temps, la décoction standard de différentes drogues animales a perdu la forme de morceaux de décoction et est difficile à identifier. Par conséquent, cette étude a établi une technologie d'identification des ions caractéristiques basée sur la spectrométrie de masse. Il s'avère que m/z 415.72 (double charge) → 406.72, 415.72 (double charge) → 667.34 peut être utilisé comme ion caractéristique pour l'identification du scarabée de terre sinensis. Grâce à l'application et à la détection de 24 lots de matières médicinales à base de scarabée de terre provenant de différentes sources, de 21 lots d'extraits de scarabée de terre, de 6 lots de préparations à base de scarabée de terre, de 6 médicaments pour animaux différents et de 3 types d'adultérants à base de scarabée de terre, la méthode de détection peut être appliquée à 2 scarabées de terre primitifs différents, ce qui confirme la spécificité de l'ion caractéristique, même s'il existe une distinction claire entre les produits intermédiaires et les préparations contenant du scarabée de terre qui ont perdu les propriétés des matières médicinales d'origine.
En outre, cette méthode est simple à utiliser, hautement reproductible et ne nécessite pas de processus de prétraitement complexe, ce qui réduit considérablement le seuil de mise en œuvre de cette méthode. Bien qu'un grand nombre d'études aient montré que la méthode d'identification des médicaments chinois traditionnels à base d'animaux à l'aide de peptides caractéristiques est raisonnable et réalisable, les méthodes d'évaluation de la qualité pertinentes doivent encore être enrichies et améliorées, ce qui constitue également une orientation importante pour les recherches futures sur le contrôle de la qualité des médicaments chinois traditionnels. En conclusion, la méthode établie dans cette étude permettra de combler efficacement les lacunes des normes d'inspection du scarabée et de ses morceaux de décoction, de résoudre le problème du scarabée dont l'authenticité ne peut être identifiée que par l'expérience traditionnelle pendant une longue période, d'améliorer son niveau de contrôle de la qualité et de fournir une référence pour la sécurité et l'efficacité des médicaments cliniques liés au scarabée.