Yer böceği sinensis'in tanımlanması ve karakteristik iyonlarla hazırlanması
Yer böceği solucanı ilk olarak Shennong'un Materia Medica Klasiği'nde kaydedilmiş ve orta sınıf olarak listelenmiştir. Yer böceği sinensis Walker veya Steleophaga plancyi (Boleny), Eupolyphaga sinensis Walker veya Steleophaga plancyi'nin kurutulmuş dişi gövdesidir. Yer böceği esas olarak amino asitler, proteinler, uçucu yağ bileşikleri ve alkaloidler, yağ asitleri, fibrinolitik aktif bileşenler ve eser elementler gibi diğer bileşenleri içerir. Yer böceği böceği, kan stazını dağıtma, sert düğüm, detümesans ve ağrıyı ortadan kaldırma, göğsü indirme ve kanalları açma vb. etkilere sahiptir. Morluklar ve yaralanmalar, tendon yaralanmaları ve kırıkları, kan stazı ve amenore, doğum sonrası kan stazı ve karın ağrısı, belirtiler ve şişlik için kullanılır. Modern farmakolojik araştırmalar, yer böceği böceğinin antikoagülan, anti-tümör, kan lipid düzenleyici, analjezik, anti-enflamatuar ve bakterisidal aktivitelere sahip olduğunu ve hatta "kan akışını düzenleyen ilk ilaç" olarak adlandırıldığını göstermektedir. Klinik uygulamada yaygın olarak kullanılmaktadır (Yaozhinet veri tabanının istatistiklerine göre, 151 geleneksel Çin patentli ilaç ve yer böceği böceği içeren basit preparat reçeteleri toplanmıştır) ve dozajı da büyüktür. Şu anda piyasada satılan iki tür yer böceği vardır: yabani ve yapay olarak yetiştirilmiş. Bununla birlikte, yabani yer böceği sayısı her geçen yıl azaldığı için, yapay olarak yetiştirilen ürünler klinik uygulamada büyük bir orana sahiptir ve yapay tağşiş ve safsızlık davranışı zaman zaman ortaya çıkmaktadır, bu da yalnızca özelliklerini belirleyerek yanlış değerlendirmeye yol açabilir. Genel olarak, Çin Farmakopesi'nin 2020 baskısında yer alan yer böceği kurdu altındaki test maddeleri nispeten basittir ve yer böceği kurdunun orijinalliğini ve kalitesini kapsamlı ve doğru bir şekilde yansıtamaz.

Yer böceği esas olarak amino asitler, proteinler, uçucu yağ bileşikleri vb. içerir. Bu aşamada, kalite ile ilgili araştırmalar da bu bileşenlere odaklanmıştır. Son yıllarda, bazı akademisyenler yer böceği böceklerinin özgünlüğünü incelemek için moleküler farmakognozi yöntemlerini de kullanmışlardır. Örneğin Chen ve arkadaşları, kromatografi ve moleküler biyoloji yoluyla eupolyphaga böceklerinin ve sahte yer böceği Phnom Penh'in tanımlama yöntemini de oluşturmuşlardır. DNA barkodlarını veri tabanı ile karşılaştırdıktan sonra, en yakın türün dizisi ve karşılaştırması verilebilir, bu da çeşitlerin kaynağını açıkça belirleyebilir; Lu ve arkadaşları, üç çeşit yer böceği böceğinin proteinlerini ve aynı ve farklı yerlerden gelenleri tanımlamak için poliakrilamid jel elektroforezi kullandılar. Yöntem yüksek çözünürlüğe ve iyi tekrarlanabilirliğe sahiptir. Bununla birlikte, moleküler farmakognozi teknolojisinin yüksek laboratuvar gereksinimleri vardır ve belirli sınırlamalarla teşvik edilmesi zordur. Çin Halk Cumhuriyeti Farmakopesi'nde (2020 Baskısı) (bundan böyle "Çin Farmakopesi" olarak anılacaktır), yer böceği sinensis tıbbi malzemelerinin tanımlanması maddesi altında yalnızca mikroskobik tanımlama ve ince tabaka tanımlama vardır ve bu yöntem yalnızca hammaddelerin tanımlanması için geçerlidir. Ekstrakte edilmiş yer böceği sinensis ve yer böceği sinensis içeren formüle edilmiş preparatlar için, yöntemin aktarılabilirliği zayıftır ve etkili bir şekilde ayırt edilemez.
Tür farklılığı olan bir biyobelirteç olarak karakteristik peptitler, hayvan tıbbı araştırmalarında giderek daha olgun hale gelmektedir. Bazı araştırmacılar, karakteristik peptit teknolojisi aracılığıyla kaplumbağa A, antilop boynuzu, eşek derisi tutkalı, geyik boynuzu sakızı, kırkayak, geyik boynuzu vb. araştırmalarını gerçekleştirmiştir. İyi özgüllük ve basit kullanım özellikleri, günlük incelemede tanıtılmasını kolaylaştırır. Kütle spektrometresi tespitine dayanan karakteristik peptit teknolojisi, aynı anda birden fazla türün karakteristik peptit iyonu bilgisini tespit göstergeleri olarak belirleyebilir; bu da, tağşiş edilmiş bileşenleri daha doğru bir şekilde belirlerken ve tağşiş edilmiş bileşenleri nispeten ölçerken özgünlük tanımlamasına ulaşması beklenmektedir. Geniş ve parlak uygulama olanaklarına sahiptir. İyon çifti tayini, Çin Farmakopesi'nde (2020) eşek derisi tutkalı, boynuz tutkalı ve kaplumbağa kabuğu tutkalı tanımlama maddelerine dahil edilmiştir. Karakteristik peptitlerin Çin'in resmi yasal kodunda kalite göstergeleri olarak yer alması, hayvan ilaçlarının yasal standartlarda belirli kalite kontrol bileşenlerine sahip olmaması durumuna da son vermiştir. Ekstrakt çoğunlukla çözücü olarak su kullanır. Yer böceği böceği gibi hayvansal ilaçlar kaynatıldıktan sonra, kolajen suda çözünür peptitler oluşturmak üzere spesifik olmayan bir bozunmaya uğrayacaktır. Bazı peptitler, çeşitli biyolojik etkiler göstermek üzere biyofilm yoluyla kana karışabilir. Bununla birlikte, yurtiçinde ve yurtdışında yer böceği sinensis'in tanımlanması ve karakteristik iyonlarla hazırlanması hakkında bir rapor bulunmamaktadır. Bu çalışmada, yukarıdaki karakteristik iyon tanımlama teknolojisi referans olarak kullanılarak, yer böceği böceklerinin orijinalliğini belirlemek için uygulanmış ve yer böceği böceklerinin ve preparatlarının kalite araştırması için bir referans sağlanmıştır.

Yer böceği sinensis'in kanser, trombozu önleme, bağışıklığı artırma ve femur başı avasküler nekrozunu tedavi etme gibi çeşitli hastalıkları tedavi etme etkinliğine sahip olduğu kanıtlanmıştır. Son zamanlarda, yer böceği, sülük ve kırkayağın endometritte belirgin klinik etkinlik gösterdiği bildirilmiştir. Bununla birlikte, yer böceği böceklerini ve yer böceği böceği içeren reçeteleri doğru bir şekilde tanımlamak zordur. Şu anda, hayvansal ilaçların kalite testleri çoğunlukla morfoloji, mikroskopi ve ince tabaka testi gibi yöntemlere odaklanmaktadır. Dahası, çoğu hayvansal ilaç benzer amino asit ve nükleozit bileşimleri içermekte, bu da hayvansal ilaç çeşitlerinin tanımlanması ve kalite analizinde belirsizliğe yol açmaktadır. Bu nedenle, hayvansal ilaçların kalite kontrolü ve değerlendirilmesi için hayvansal ilaçların tanımlanması ve değerlendirilmesine yönelik bir dizi özel analitik yöntemin geliştirilmesi ve oluşturulması çok önemlidir. Son yıllarda, karakteristik peptitlerin kalitatif / kantitatif analizine dayanan hayvansal geleneksel Çin tıbbının kalite kontrol modeli giderek yaygınlaşmakta ve uygulanmaktadır. Çin Farmakopesi 2020, eşek derisi tutkalı, geyik boynuzu sakızı ve kaplumbağa kabuğu sakızının özel peptit tanımlama yöntemlerini içerir, ancak yer böceği böceğindeki karakteristik iyonların tanımlama yöntemi yoktur.
Bu çalışmada belirlenen karakteristik iyonlar, ekstraksiyon çözücüsü olarak 1% amonyum bikarbonat çözeltisi ve numunenin enzimatik hidrolizi için tripsin kullanılarak protein sindirim teknolojisi ile tespit edilmiş; numunelerin ekstraksiyon yöntemi, enzim dozajı ve ekstraksiyon süresi araştırılmış ve optimum ekstraksiyon koşulları ısıtma reflü (ekstraksiyon yöntemi), 50 μ L (enzim dozajı) ve 30 dakika (ekstraksiyon süresi) olarak belirlenmiştir.

Çin Halk Cumhuriyeti Farmakopesi'nde kayıtlı olan yer böceği kurdunun kalite kontrol yöntemi nispeten basit olduğundan, yer böceği kurdu piyasasında sahte ürünlerin üretilip satılması ve kalitesiz ürünlerin üstün ürünlermiş gibi gösterilmesi nadir değildir. Şu anda, yer böceği solucanının fiyatı piyasada yükselmeye devam etmektedir. Kanun kaçakçıları, ekonomik çıkar sağlamak amacıyla, karlarını artırmak için yer böceği kurdu ilacına şap, tuz ve başka bileşenler eklemiş ve hatta gerçek ürünlerin yerine sahte ürünler kullanmışlardır. Buna ek olarak, Phnom Penh yer böceği de Guangdong Eyaletindeki geleneksel Çin tıbbı standardına dahil edilmiş ve uzun süredir yerel bir ev ürünü olarak kullanılmaktadır. Bununla birlikte, araştırmalar Phnom Penh yer böceğinin bileşiminin Eupolyphaga ve Eupolyphaga'dan farklı olduğunu göstermektedir; Aynı zamanda, farklı hayvan ilaçlarının standart kaynatma işlemi, kaynatma parçalarının şeklini kaybetmiştir ve tanımlanması zordur. Bu nedenle, bu çalışma kütle spektrometresine dayalı bir karakteristik iyon tanımlama teknolojisi oluşturmuştur. Yer böceği sinensis'in tanımlanması için karakteristik iyon olarak m/z 415.72 (çift yük) → 406.72, 415.72 (çift yük) → 667.34'ün kullanılabileceği bulunmuştur. Farklı kaynaklardan 24 parti yer böceği kurdu tıbbi malzemesinin, 21 parti yer böceği kurdu ekstraktının, 6 parti yer böceği kurdu preparatının, 6 farklı hayvan ilacının ve 3 çeşit yer böceği kurdu tağşiş maddesinin uygulanması ve tespiti yoluyla, tespit yöntemi, orijinal tıbbi malzemelerin özelliklerini kaybetmiş yer böceği kurdu içeren ara ürünler ve preparatlar arasında net bir ayrım yapsa bile, karakteristik iyonun özgüllüğünü doğrulayan 2 farklı ilkel yer böceği kurduna uygulanabilir.
Aynı zamanda, bu yöntemin kullanımı basittir, yüksek oranda tekrarlanabilir ve karmaşık bir ön işleme süreci yoktur, bu da bu yöntemin uygulama eşiğini büyük ölçüde azaltır. Çok sayıda çalışma, karakteristik peptidler kullanarak hayvan bazlı geleneksel Çin tıbbını tanımlama yönteminin makul ve uygulanabilir olduğunu göstermiş olsa da, ilgili kalite değerlendirme yöntemlerinin daha da zenginleştirilmesi ve iyileştirilmesi gerekmektedir; bu da geleneksel Çin tıbbının kalite kontrolü üzerine gelecekteki araştırmalar için önemli bir yöndür. Sonuç olarak, bu çalışmada oluşturulan yöntem, yer böceği ve kaynatma parçalarının denetim standartlarındaki eksiklikleri etkili bir şekilde tamamlayacak, yer böceğinin yalnızca uzun süredir geleneksel deneyim yoluyla özgünlüğü belirleyebilmesi sorununu çözecek, kalite kontrol seviyesini iyileştirecek ve yer böceği ile ilgili klinik ilaçların güvenliği ve etkinliği için bir referans sağlayacaktır.