Analyse quantitative et empreinte UPLC des composants multiples de la décoction de rose standard
Les fleurs de rose, également connues sous le nom de rose rouge, rouge de Changchun, etc., sont les fleurs séchées de Rosa chinensis Jacq. de la famille des Rosaceae. Elles sont plantées dans diverses régions de Chine et peuvent être récoltées tout au long de l'année. Elles sont cueillies lorsque les fleurs sont légèrement ouvertes et séchées à l'ombre ou à basse température. La valeur médicinale des fleurs de rose a été mentionnée pour la première fois dans le "Compendium of Materia Medica" de Li Shizhen. Son goût est doux, sa nature est chaude et elle appartient au méridien du foie. Elle a pour effet de favoriser la circulation sanguine, de réguler les menstruations et d'apaiser le foie pour soulager la dépression. Elle est principalement utilisée pour le traitement de diverses maladies telles que la stagnation du qi et la stase du sang, les troubles menstruels, la distension et la douleur de la poitrine et des côtes. Les fleurs de rose contiennent divers composants chimiques, notamment des flavonoïdes, des acides phénoliques, des huiles aromatiques, des tanins et des pigments, parmi lesquels les flavonoïdes et les acides phénoliques sont considérés comme les principaux ingrédients médicinaux des fleurs de rose. Les flavonoïdes sont les principaux composants, notamment la quercétine, la quercétine, le kaempférol-3-O-rhamnoside, le kaempférol, l'acide succinique, l'acide gallique, le gallate d'éthyle, l'hyperoside, l'hespéridine, l'isoquercitrine, etc. Ils ont des activités biologiques telles que des effets antiviraux, antioxydants, d'amélioration du système immunitaire et anticancéreux.
La composition de la médecine traditionnelle chinoise est complexe et ses effets pharmacologiques reposent sur les effets synergiques de plusieurs ingrédients actifs sur de multiples cibles, voies et systèmes globaux, exerçant des effets régulateurs sur l'organisme. L'empreinte digitale de la médecine traditionnelle chinoise repose sur l'étude systématique des composants chimiques de la médecine traditionnelle chinoise. Elle présente de manière exhaustive les informations relatives aux composants de la médecine traditionnelle chinoise du point de vue des groupes de substances, reflétant ainsi la situation globale des composants chimiques de la médecine traditionnelle chinoise. Il s'agit d'un moyen technique complet, quantifiable et efficace. Cette étude a établi les spectres d'empreintes digitales de 20 lots de décoction standard de fleurs de rose à l'aide de la méthode UPLC combinée à la technologie de reconnaissance des formes chimiques, a analysé et exploré les principaux composants caractéristiques qui affectent la décoction standard de fleurs de rose, et a effectué une analyse quantitative de plusieurs composants indicateurs, afin de fournir une référence pour le développement de préparations liées à la décoction standard de fleurs de rose et la recherche sur les normes de qualité.

 

Pour garantir la représentativité de la décoction standard, cette étude a mené une enquête sur les informations relatives aux principales zones de production des matières premières de la fleur de rose. Au total, 20 lots d'échantillons ont été collectés, y compris des échantillons sur site provenant de zones de production majeures et authentiques telles que la ville de Baoding dans la province de Hebei, la ville de Zhoukou dans la province de Henan, la ville de Heze dans la province de Shandong, la ville de Linyi dans la province de Shandong et la préfecture de Dali dans la province de Yunnan. Conformément aux principes directeurs des "Exigences techniques pour le contrôle de la qualité et l'élaboration de normes pour les granules de formules de médecine traditionnelle chinoise" et en référence aux "Spécifications de gestion pour la salle de décoction de médecine traditionnelle chinoise dans les établissements médicaux", les méthodes de prétraitement de la décoction standard (temps de décoction, ajout d'eau, temps de décoction et autres indicateurs et paramètres) sont étudiées afin de déterminer le processus de préparation optimal ; la concentration à basse température et la lyophilisation permettent de produire une poudre lyophilisée de décoction de rose standard.
Lors de l'élaboration de la méthode d'empreinte digitale, les effets des solvants d'extraction (méthanol, méthanol 70%, méthanol 50%, éthanol, éthanol 70%, éthanol dilué), des méthodes d'extraction (ultrasons, reflux) et des durées d'extraction (10, 30, 45, 60 minutes) sur l'empreinte digitale ont été étudiés. Compte tenu de l'adéquation de l'extraction, de la stabilité et de la facilité d'utilisation, le traitement par ultrasons au méthanol 50% a finalement été choisi pour une durée de 30 minutes. Un détecteur à barrettes de diodes a été utilisé pour effectuer un balayage complet des longueurs d'onde (200-400nm) sur des échantillons de soupe à la rose standard, et les nombres de pics, les valeurs de réponse et les résolutions des chromatogrammes à différentes longueurs d'onde ont été comparés. Les résultats ont montré que l'utilisation de 254 nm comme longueur d'onde de détection permettait d'obtenir un plus grand nombre de pics chromatographiques et des valeurs de réponse plus importantes, une ligne de base stable et moins d'interférences. Parallèlement, les conditions chromatographiques de la phase mobile eau, de la température de la colonne et du débit ont été étudiées, et il a finalement été décidé d'utiliser une solution d'acide phosphorique 0,2% comme phase mobile eau, avec un débit de 0,4 ml/min et une température de colonne de 35 ℃.
Le spectre d'empreintes digitales combiné à la technologie de reconnaissance des formes chimiques a été utilisé pour analyser et comparer la décoction standard de fleurs de roses de différentes origines. Les résultats ont montré que les analyses non supervisées HCA et PCA ont révélé que les échantillons de différentes origines pouvaient être regroupés en quatre catégories. L'analyse OPLS-DA a identifié un total de 11 biomarqueurs différentiels, principalement des flavonoïdes et des composants d'acide phénolique, qui ont joué un rôle important dans la distinction des décoctions standard de roses de différentes origines. Ils peuvent servir d'indicateurs de contrôle de la qualité des décoctions de roses standard et fournir une référence plus complète pour les sources de matières premières des granulés de roses.
Cette étude a utilisé les spectres d'empreintes digitales combinés au regroupement, à l'analyse des composantes principales, à l'analyse discriminante orthogonale des moindres carrés partiels et à la détermination du contenu des composantes multi-index pour mener une étude préliminaire sur la qualité de 20 lots de décoction de rose standard. Cette méthode permet de sélectionner rapidement les pics chromatographiques clés qui affectent la qualité de différents lots de matières médicinales. Parmi eux, l'acide gallique, l'acide tannique, l'hyperoside, l'isoquercitrine, l'astragaloside, la quercitrine et la quercétine ont été identifiés grâce à une comparaison spectrale à haute résolution et à celle de la substance de référence. Les résultats ont montré que les échantillons à forte teneur en acides phénoliques et en flavonoïdes provenaient de la province du Henan et appartenaient aux catégories S11-S13 dans les analyses HCA et PCA. Les échantillons les moins riches ont été prélevés dans la province du Yunnan et appartiennent à la première catégorie S1-S6. Ces résultats peuvent servir de base à la sélection de l'origine de la matière première collectée pour la décoction standard de rose qui suivra. À l'heure actuelle, les recherches montrent que les fleurs de rose contiennent principalement des flavonoïdes, des glycosides flavonoïdes et des composés d'acide phénolique, qui ont des activités biologiques telles que les antioxydants, les antiviraux, les antifongiques, les anticancéreux, les antitumoraux et les antivieillissement. À un stade ultérieur, des recherches approfondies seront menées sur la base de l'efficacité des médicaments afin de fournir des références pour le contrôle de la qualité des décoctions standard de fleurs de rose et des préparations connexes.