UPLC ujjlenyomat és több komponens mennyiségi elemzése a rózsa standard főzetében
A rózsavirág, más néven rózsavörös, csangcsunvörös stb. a rózsafélék családjába tartozó Rosa chinensis Jacq. szárított virága. Kína különböző régióiban ültetik őket, és egész évben szüretelhetők. Akkor szedik, amikor a virágok kissé kinyíltak, és árnyékban vagy alacsony hőmérsékleten szárítják. A rózsavirágok gyógyászati értékét először Li Shizhen "Compendium of Materia Medica" című művében jegyezték fel. Íze édes, természete meleg, és a máj meridiánjához tartozik; a vérkeringést elősegítő, a menstruációt szabályozó és a májat nyugtató, depressziót enyhítő hatása van. Elsősorban különböző betegségek kezelésére használják, mint például a qi stagnálása és a vér pangása, menstruációs zavarok, mellkasi és bordatágulat és fájdalom. A rózsavirág különböző kémiai összetevőket tartalmaz, többek között flavonoidokat, fenolsavakat, aromás olajokat, tanninokat és pigmenteket, amelyek közül a flavonoidokat és a fenolsavakat tekintik a rózsavirág fő gyógyhatású összetevőinek. A flavonoidok a fő összetevők, beleértve a kvercetin, a kvercetin, a kaempferol-3-O-ramnoside, a kaempferol, a borostyánkősav, a galluszsav, az etil-gallát, a hiperozid, a hesperidin, az izokvercitrin stb. Ezek biológiai aktivitásukkal rendelkeznek, mint például vírusellenes, antioxidáns, immunerősítő és rákellenes hatásuk.
A hagyományos kínai orvoslás összetétele összetett, és farmakológiai hatásai több hatóanyag több célpontra, útvonalra és általános rendszerre gyakorolt szinergikus hatásán alapulnak, amelyek szabályozó hatást gyakorolnak a szervezetre. A hagyományos kínai orvoslás ujjlenyomata a hagyományos kínai orvoslás kémiai összetevőinek szisztematikus vizsgálatán alapul. Átfogóan megjeleníti a hagyományos kínai gyógyászat összetevőinek információit az anyagcsoportok szempontjából, tükrözve a hagyományos kínai gyógyászat kémiai összetevőinek általános helyzetét. Ez egy átfogó, számszerűsíthető és hatékony technikai eszköz. Ez a tanulmány a rózsavirág standard főzet 20 tételének ujjlenyomat-spektrumát UPLC-módszerrel és kémiai mintafelismerési technológiával kombinált UPLC-módszerrel állapította meg, elemezte és feltárta a rózsavirág standard főzetét befolyásoló fő jellemző komponenseket, és több indikátor komponens mennyiségi elemzését végezte el, annak érdekében, hogy referenciát nyújtson a rózsavirág standard főzetével kapcsolatos készítmények fejlesztéséhez és a minőségi szabványok kutatásához.

 

A szabványos főzet reprezentativitásának biztosítása érdekében ez a tanulmány felmérést végzett a rózsavirág nyersanyagok fő termelési területeinek információiról. Összesen 20 tétel mintát gyűjtöttek, beleértve a helyszíni mintákat a főbb és hiteles termelési területekről, mint például Baoding városból (Hebei tartomány), Zhoukou városból (Henan tartomány), Heze városból (Shandong tartomány), Linyi városból (Shandong tartomány) és Dali prefektúrából (Yunnan tartomány). A "Hagyományos kínai gyógyszerkészítmények minőségellenőrzésének és szabványos fejlesztésének műszaki követelményei" és az "Orvosi intézményekben a hagyományos kínai gyógyszerkészítmények főzőhelyiségének irányítási előírásai" vezérelvei szerint a szabványos főzet előkezelési módszereit (főzési idők, víz hozzáadása, főzési idő és egyéb mutatók és paraméterek) vizsgálják az optimális elkészítési folyamat meghatározása érdekében; alacsony hőmérsékleten történő koncentrálás és fagyasztva szárítás segítségével szabványos rózsaszín főzet fagyasztva szárított por készül.
Az ujjlenyomat-módszer kialakítása során vizsgálták az extrakciós oldószerek (metanol, 70% metanol, 50% metanol, etanol, 70% etanol, híg etanol), az extrakciós módszerek (ultrahang, reflux) és az extrakciós idők (10, 30, 45, 60 perc) hatását az ujjlenyomatra. Az extrakció megfelelőségét, a stabilitást és a könnyű kezelhetőséget figyelembe véve végül az 50% metanolos ultrahangos kezelésre esett a választás 30 percig. Egy diódasoros detektorral teljes hullámhosszú (200-400 nm) pásztázást végeztünk a standard rózsaleves mintákon, és összehasonlítottuk a különböző hullámhosszúságú kromatogramok csúcsszámát, válaszértékeit és felbontását. Az eredmények azt mutatták, hogy a 254 nm-es detektálási hullámhossz használata nagyobb kromatográfiás csúcsok számát és nagyobb válaszértékeket, stabil alapvonalat és kevesebb interferenciát eredményezett. Ugyanakkor megvizsgáltuk a mobil fázis vízfázisának, az oszlop hőmérsékletének és áramlási sebességének kromatográfiás feltételeit, és végül megállapítottuk, hogy 0,2% foszforsavoldatot használunk mobil fázis vízfázisként, 0,4 ml/perc áramlási sebességgel és 35 ℃ oszlophőmérséklettel.
Az ujjlenyomat-spektrumot a kémiai mintafelismerő technológiával kombinálva használták a különböző eredetű rózsavirágok standard főzetének elemzésére és összehasonlítására. Az eredmények azt mutatták, hogy a felügyelet nélküli HCA és PCA elemzés kimutatta, hogy a különböző eredetű minták négy kategóriába sorolhatók. Az OPLS-DA elemzés összesen 11 különböző biomarkert azonosított, főként flavonoidokat és fenolsav komponenseket, amelyek fontos szerepet játszottak a különböző eredetű rózsa standard főzetek megkülönböztetésében. Ezek minőségellenőrzési indikátorként szolgálhatnak a rózsa standard főzetekre, és átfogóbb referenciát biztosítanak a rózsaszerű granulátumok nyersanyagforrásaihoz.
Ebben a tanulmányban ujjlenyomat-spektrumokat használtak klaszterezéssel, főkomponens-elemzéssel, ortogonális részleges legkisebb négyzetek diszkriminancia-analízissel és több indexkomponens-tartalom meghatározásával kombinálva, hogy előzetes vizsgálatot végezzenek 20 tétel rózsa standard főzetének minőségéről. Ezzel a módszerrel gyorsan ki lehet szűrni azokat a kulcsfontosságú kromatográfiás csúcsokat, amelyek befolyásolják a különböző gyógyászati anyagtételek minőségét. Közülük a gallikusav, a csersav, a hiperozid, az izoquercitrin, az asztragalozid, a kvercitrin és a kvercetin nagy felbontású és referenciaanyag spektrális összehasonlításával azonosították. Az eredmények azt mutatták, hogy a magas fenolsav- és flavonoidtartalmú mintákat Henan tartományból gyűjtötték, és a HCA- és PCA-analízisben az S11-S13 kategóriákba tartoztak. A legalacsonyabb tartalmú mintákat Yunnan tartományból gyűjtötték, az S1-S6 első kategóriába tartoztak. Ez alapul szolgálhat a későbbi rózsaszín standard főzethez szükséges nyersanyaggyűjtés eredetének kiválasztásához. Jelenleg a kutatások azt mutatják, hogy a rózsavirágok főként flavonoidokat, flavonoid glikozidokat és fenolsavvegyületeket tartalmaznak, amelyek biológiai aktivitásuk révén antioxidáns, vírusellenes, gombaellenes, rákellenes, daganatellenes és öregedésgátló hatásúak. A későbbi szakaszban mélyreható kutatásokat fognak végezni a gyógyszerhatékonyság alapján, hogy referenciát biztosítsanak a rózsavirág standard főzetek és a kapcsolódó készítmények minőségellenőrzéséhez.