Exploration des composants actifs anti-H1N1 et des mécanismes des billes violettes nues sur la base de l'UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS, de la pharmacologie de réseau et de la validation expérimentale
Callicarpa nudiflora Hook.&Arn. est une feuille séchée de la plante Callicarpa nudiflora Hook.&Arn. de la famille des Verbenaceae. Les perles violettes nues sont principalement distribuées à Hainan, Guangxi, Guangdong et dans d'autres régions, la zone de production authentique étant le district de Wuzhishan dans la province de Hainan. La fleur nue perle violette est le seul médicament traditionnel chinois nouvellement ajouté dans l'édition 2020 de la pharmacopée de la République populaire de Chine. Ses préparations unilatérales, Naked Flower Purple Pearl Tablets et Naked Flower Purple Pearl Capsules, sont largement utilisées pour traiter les hémorragies respiratoires et digestives et les inflammations infectieuses bactériennes causées par une chaleur et une toxicité sanguines excessives. Les phytochimistes ont identifié plus de 300 composés dans les perles violettes nues, dont des phénylpropanoïdes, des flavonoïdes, des triterpénoïdes, des diterpènes, des iridoïdes, des huiles volatiles, etc. La recherche pharmacologique moderne a confirmé que la fleur nue de perle violette a des activités anti-inflammatoires, antithrombotiques, antitumorales, antibactériennes et hépatoprotectrices. Au cours du processus de sélection des médicaments traditionnels chinois ayant une activité antivirale, il a été constaté que l'extrait de fleur nue de perle violette avait une bonne activité antivirale (comme le virus de la grippe H1N1, l'entérovirus 71, etc.) L'infection par le virus de la grippe A est une cause fréquente de décès liés à la pneumonie. Une infection sévère par le virus de la grippe A peut provoquer une infiltration pulmonaire bilatérale et une hypoxémie, connues sous le nom de syndrome de détresse respiratoire aiguë, qui est l'une des principales causes de décès provoqués par le virus de la grippe A. Cette expérience porte sur l'activité anti-H1N1 de la perle violette à fleur nue. La composition chimique des parties efficaces de la fleur nue pourpre a été identifiée à l'aide de la chromatographie liquide à ultra-haute performance, de la spectrométrie de masse à champ électrostatique quadripolaire et le mécanisme anti-H1N1 de la fleur nue pourpre a été prédit et vérifié expérimentalement à l'aide de la pharmacologie de réseau. Le mécanisme d'action de la perle violette de fleur nue contre le H1N1 a fait l'objet d'une étude préliminaire.

callicarpa nudiflora
Le virus de la grippe A a développé divers degrés de résistance aux inhibiteurs du canal M2 et aux inhibiteurs de la NA couramment utilisés. Par conséquent, la recherche de nouveaux médicaments ou de nouvelles méthodes de traitement contre la grippe A est devenue un problème urgent à résoudre. La médecine traditionnelle chinoise a joué un rôle important dans le traitement clinique du virus de la grippe A. Le concept holistique de la théorie de la médecine traditionnelle chinoise régule systématiquement les patients comme un ensemble organique, tandis que la pharmacologie de réseau explore l'interaction entre les fonctions biologiques de chaque nœud du réseau et les maladies en construisant un réseau de voies cibles des composants des médicaments, ce qui est cohérent avec le concept holistique de la médecine traditionnelle chinoise. Cette expérience a d'abord examiné les principaux sites actifs anti-H1N1 du médicament traditionnel chinois Naked Flower Purple Pearl et a analysé les sites pour identifier 34 composants chimiques. En combinant la littérature et les bases de données, 67 cibles de médicaments et de maladies se chevauchant ont été identifiées. Grâce à l'analyse d'enrichissement des cibles croisées, nous supposons que le processus biologique important de l'EACN contre le H1N1 pourrait être la régulation positive de la phosphorylation des protéines et la réponse au stress oxydatif. Les résultats de l'analyse d'enrichissement KEGG ont montré que 19 composés d'EACN agissent sur la voie du virus de la grippe A par l'intermédiaire de 11 cibles. Le médicament affecte le canal M2 du virus H1N1 en agissant sur PLG et PRSS1, et peut également affecter le processus de libération du virus en agissant sur la voie de la neuraminidase (NA) par l'intermédiaire de PLG. PLG et PRSS1 peuvent être des cibles clés pour l'action directe de l'EACN sur le virus H1N1. L'EACN peut inhiber la prolifération du H1N1 en affectant ses processus d'excrétion et de libération. Dans le réseau de maladies de la voie des ingrédients médicamenteux, RELA et NF - κ B1 sont les deux cibles ayant les valeurs de degré les plus élevées. La voie de signalisation NF - κ B dans laquelle elles se trouvent peut promouvoir l'expression de facteurs tels que IL1 β, TNF - α, IL-6, et favoriser la réponse inflammatoire, ce qui suggère que l'EACN peut agir sur des cibles clés telles que RELA et NF - κ B1 pour réguler la voie de signalisation NF - κ B et réduire les dommages causés par l'inflammation à l'organisme. Selon les résultats prédits par la pharmacologie des réseaux, l'EACN peut réguler les voies de signalisation des cellules T, affecter la différenciation Th1 et Th2 et exercer des effets régulateurs sur le système immunitaire. Par conséquent, cette étude a mené des expériences sur des animaux pour vérifier l'effet inhibiteur, l'effet anti-inflammatoire et l'effet régulateur immunitaire de l'EACN sur la prolifération du virus H1N1. Les résultats expérimentaux ont montré que l'EACN peut améliorer la perte de poids et l'augmentation de l'indice pulmonaire causées par l'infection H1N1, réduire la charge virale dans le tissu pulmonaire de la souris, atténuer les dommages pathologiques dans le tissu pulmonaire de la souris, réduire les niveaux de TNF - α, IFN - γ, IL-1 β dans le sérum du sang périphérique et augmenter le niveau d'anticorps IgG dans le sérum. Cette étude a d'abord utilisé des expériences in vitro pour cribler les sites d'extraction actifs de Naked Purple Pearl contre le H1N1, et a prédit les ingrédients actifs d'EACN contre le H1N1 en utilisant l'UPLC-Q-Hexactive-Orbitrap-MS et la pharmacologie de réseau. Les résultats prédits ont été vérifiés par des expériences sur les animaux, et les ingrédients actifs potentiels de l'EACN contre le H1N1 ont été sélectionnés, y compris la quercétine, la myricétine, la lutéoline, le kaempférol, la quercétine, l'apigénine et l'acétine. Il a été démontré de manière préliminaire que le Naked Purple Pearl peut exercer des effets anti-H1N1 par de multiples voies telles que l'inhibition directe du virus, les effets anti-inflammatoires et la régulation immunitaire. Dans des expériences ultérieures, il est nécessaire de mener des expériences in vitro et in vivo pour valider les composés monomères sélectionnés et étudier plus en détail le mécanisme de l'effet anti H1N1 de l'EACN au niveau de l'ARNm et de la protéine.