Erforschung der Anti-H1N1-Wirkstoffe und Mechanismen von Naked Purple Beads anhand von UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS, Netzwerkpharmakologie und experimenteller Validierung
Die traditionelle chinesische Medizin, Callicarpa nudiflora Hook.&Arn., ist ein getrocknetes Blatt der Pflanze Callicarpa nudiflora Hook.&Arn. aus der Familie der Verbenaceae. Nackte Purpurperlen sind hauptsächlich in Hainan, Guangxi, Guangdong und anderen Regionen verbreitet, wobei das eigentliche Produktionsgebiet der Bezirk Wuzhishan in der Provinz Hainan ist. Die Nackte Blume Purpurperle ist das einzige neu aufgenommene traditionelle chinesische Arzneimittel in der Ausgabe 2020 des Arzneibuchs der Volksrepublik China. Ihre einseitigen Zubereitungen, Naked Flower Purple Pearl Tabletten und Naked Flower Purple Pearl Kapseln, werden häufig zur Behandlung von Blutungen der Atemwege und des Verdauungstrakts sowie von bakteriellen, infektiösen Entzündungen eingesetzt, die durch übermäßige Blutwärme und Toxizität verursacht werden. Phytochemiker haben mehr als 300 Verbindungen in der Nackten Purpurperle identifiziert, darunter Phenylpropanoide, Flavonoide, Triterpenoide, Diterpene, Iridoide, ätherische Öle und mehr. Die moderne pharmakologische Forschung hat bestätigt, dass die Purpurperle entzündungshemmende, antithrombotische, antitumorale, antibakterielle und hepatoprotektive Eigenschaften besitzt. Beim Screening traditioneller chinesischer Medizin mit antiviraler Aktivität wurde festgestellt, dass der Extrakt der Nackten Purpurnen Perle eine gute antivirale Aktivität hat (z.B. H1N1-Grippevirus, Enterovirus 71, etc.). Die Infektion mit dem Influenza-A-Virus ist eine häufige Ursache für Todesfälle im Zusammenhang mit Lungenentzündung. Eine schwere Infektion mit dem Influenza-A-Virus kann zu einer beidseitigen Lungeninfiltration und Hypoxämie führen, die als akutes Atemnotsyndrom bekannt ist und eine der Hauptursachen für den Tod durch das Influenza-A-Virus darstellt. In diesem Experiment geht es um die Anti-H1N1-Aktivität der nackten violetten Perle. Die chemische Zusammensetzung der wirksamen Teile der nackten violetten Blume wurde mit Hilfe der Ultra-Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie Quadrupol elektrostatisches Feld Orbitrap MS identifiziert, und der Anti-H1N1-Mechanismus der nackten violetten Blume wurde vorhergesagt und experimentell mit Hilfe der Netzwerk-Pharmakologie überprüft. Der Wirkmechanismus der nackten lila Blume Perle gegen H1N1 wurde vorläufig erforscht.

Nacktblume (Callicarpa nudiflora)
Das Influenza-A-Virus hat in unterschiedlichem Maße Resistenzen gegen gängige M2-Kanal-Inhibitoren und NA-Inhibitoren entwickelt. Daher ist die Suche nach neuen Medikamenten oder Behandlungsmethoden gegen Influenza A zu einem dringend zu lösenden Problem geworden. Die traditionelle chinesische Medizin hat bei der klinischen Behandlung des Influenza-A-Virus eine wichtige Rolle gespielt. Das ganzheitliche Konzept in der traditionellen chinesischen Medizin Theorie systematisch regelt Patienten als ein organisches Ganzes, während Netzwerk-Pharmakologie erforscht die Interaktion zwischen den biologischen Funktionen der einzelnen Knoten im Netzwerk und Krankheiten durch den Aufbau einer Droge Komponente Ziel Weg Krankheit Netzwerk, das im Einklang mit dem ganzheitlichen Konzept der traditionellen chinesischen Medizin ist. In diesem Experiment wurden zunächst die wichtigsten aktiven Stellen der traditionellen chinesischen Medizin Naked Flower Purple Pearl gegen H1N1 untersucht und die Stellen analysiert, um 34 chemische Komponenten zu identifizieren. Durch die Kombination von Literatur und Datenbanken wurden 67 sich überschneidende Targets von Medikamenten und Krankheiten identifiziert. Durch die Anreicherungsanalyse von Kreuzzielen vermuten wir, dass der wichtige biologische Prozess von EACN gegen H1N1 die positive Regulierung der Proteinphosphorylierung und die Reaktion auf oxidativen Stress sein könnte. Die Ergebnisse der KEGG-Anreicherungsanalyse zeigten, dass 19 Verbindungen in EACN über 11 Targets auf den Influenza-A-Virus-Weg wirken. Das Medikament beeinflusst den M2-Kanal des H1N1-Virus, indem es auf PLG und PRSS1 einwirkt, und kann auch den Virusfreisetzungsprozess beeinflussen, indem es über PLG auf den Neuraminidase (NA)-Signalweg einwirkt. PLG und PRSS1 könnten die wichtigsten Angriffspunkte für EACN sein, um direkt auf H1N1 zu wirken. EACN kann die Vermehrung von H1N1 hemmen, indem es die Ausscheidungs- und Freisetzungsprozesse beeinträchtigt. Im Krankheitsnetzwerk des Wirkstoffs sind RELA und NF - κ B1 die beiden Ziele mit den höchsten Werten. Der NF-κ-B-Signalweg, in dem sie sich befinden, kann die Expression von Faktoren wie IL1-β, TNF-α und IL-6 fördern und die Entzündungsreaktion begünstigen, was darauf hindeutet, dass EACN auf wichtige Ziele wie RELA und NF-κ B1 einwirken kann, um den NF-κ-B-Signalweg zu regulieren und die Schäden durch Entzündungen im Körper zu verringern. Gemäß den von der Netzwerkpharmakologie vorhergesagten Ergebnissen kann EACN die T-Zell-Signalwege regulieren, die Th1- und Th2-Differenzierung beeinflussen und immunregulatorische Wirkungen ausüben. In dieser Studie wurden daher Tierversuche durchgeführt, um die hemmende Wirkung, die entzündungshemmende Wirkung und die immunregulatorische Wirkung von EACN auf die H1N1-Vermehrung zu überprüfen. Die experimentellen Ergebnisse zeigten, dass EACN den durch die H1N1-Infektion verursachten Gewichtsverlust und den Anstieg des Lungenindexes verbessern, die Viruslast im Lungengewebe der Mäuse reduzieren, pathologische Schäden im Lungengewebe der Mäuse lindern, die Werte von TNF-α, IFN-γ und IL-1-β im peripheren Blutserum senken und den Spiegel der Serumantikörper IgG erhöhen kann. In dieser Studie wurden zunächst in vitro-Experimente durchgeführt, um die aktiven Extraktionsstellen von Naked Purple Pearl gegen H1N1 zu screenen, und die Wirkstoffe von EACN gegen H1N1 mittels UPLC-Q-Hexactive-Orbitrap-MS und Netzwerk-Pharmakologie vorhergesagt. Die vorhergesagten Ergebnisse wurden durch Tierversuche verifiziert, und es wurden potenzielle Wirkstoffe von EACN gegen H1N1 untersucht, darunter Quercetin, Myricetin, Luteolin, Kaempferol, Quercetin, Apigenin und Acacetin. Es wurde vorläufig nachgewiesen, dass Naked Purple Pearl über mehrere Wege wie direkte Virushemmung, entzündungshemmende Wirkungen und Immunregulierung eine Anti-H1N1-Wirkung entfalten kann. In weiteren Experimenten müssen In-vitro- und In-vivo-Versuche durchgeführt werden, um die ausgewählten monomeren Verbindungen zu validieren und den Mechanismus der Anti-H1N1-Wirkung von EACN auf der mRNA- und Proteinebene weiter zu untersuchen.