Çıplak Mor Boncukların Anti H1N1 Aktif Bileşenlerinin ve Mekanizmalarının UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS, Ağ Farmakolojisi ve Deneysel Doğrulamaya Dayalı Olarak Araştırılması
Geleneksel Çin ilacı olan Callicarpa nudiflora Hook.&Arn., Verbenaceae familyasından Callicarpa nudiflora Hook.&Arn. bitkisinin kurutulmuş bir yaprağıdır. Çıplak Mor Boncuklar çoğunlukla Hainan, Guangxi, Guangdong ve diğer bölgelerde dağıtılmaktadır ve otantik üretim alanı Hainan Eyaletindeki Wuzhishan Bölgesidir. Çıplak Çiçek Mor İnci, Çin Halk Cumhuriyeti Farmakopesi'nin 2020 baskısına yeni eklenen tek geleneksel Çin ilacıdır. Tek taraflı preparatları olan Çıplak Çiçek Mor İnci Tabletleri ve Çıplak Çiçek Mor İnci Kapsülleri, aşırı kan ısısı ve toksisitenin neden olduğu solunum ve sindirim kanamalarını ve bakteriyel enfeksiyöz iltihapları tedavi etmek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Fitokimyacılar, fenilpropanoidler, flavonoidler, triterpenoidler, diterpenler, iridoidler, uçucu yağlar ve daha fazlası dahil olmak üzere çıplak mor incilerden 300'den fazla bileşik tanımlamıştır. Modern farmakolojik araştırmalar, çıplak çiçek mor incisinin anti-enflamatuar, antitrombotik, anti-tümör, antibakteriyel ve hepatoprotektif aktivitelere sahip olduğunu doğrulamıştır. Antiviral aktiviteye sahip geleneksel Çin tıbbının taranması sürecinde, çıplak çiçek mor incisinin ekstraktının iyi bir antiviral aktiviteye sahip olduğu bulunmuştur (H1N1 influenza virüsü, enterovirüs 71, vb. gibi). İnfluenza A virüsü enfeksiyonu, pnömoniye bağlı ölümlerin yaygın bir nedenidir. İnfluenza A virüsü ile şiddetli enfeksiyon, influenza A virüsünün neden olduğu ana ölüm nedenlerinden biri olan akut solunum sıkıntısı sendromu olarak bilinen bilateral akciğer infiltrasyonuna ve hipoksemiye neden olabilir. Bu deney, çıplak çiçek mor boncuğunun anti H1N1 aktivitesine odaklanmaktadır. Çıplak çiçek moru boncuğunun etkili kısımlarının kimyasal bileşimi ultra yüksek performanslı sıvı kromatografisi kuadrupol elektrostatik alan orbitrap MS kullanılarak tanımlanmış ve çıplak çiçek moru boncuğunun anti H1N1 mekanizması ağ farmakolojisi kullanılarak tahmin edilmiş ve deneysel olarak doğrulanmıştır. Çıplak çiçek moru boncuğunun H1N1'e karşı etki mekanizması ön araştırmaya tabi tutulmuştur.

callicarpa nudiflora
İnfluenza A virüsü, yaygın olarak kullanılan M2 kanal inhibitörlerine ve NA inhibitörlerine karşı çeşitli derecelerde direnç geliştirmiştir. Bu nedenle, anti influenza A için yeni ilaçlar veya tedavi yöntemleri bulmak çözülmesi gereken acil bir sorun haline gelmiştir. Geleneksel Çin tıbbı, influenza A virüsünün klinik tedavisinde önemli bir rol oynamıştır. Geleneksel Çin tıbbı teorisindeki bütünsel kavram, hastaları organik bir bütün olarak sistematik bir şekilde düzenlerken, ağ farmakolojisi, geleneksel Çin tıbbındaki bütünsel kavramla tutarlı olan bir ilaç bileşeni hedef yolu hastalık ağı oluşturarak ağdaki her bir düğümün biyolojik işlevleri ile hastalıklar arasındaki etkileşimi araştırır. Bu deney ilk olarak geleneksel Çin ilacı Çıplak Çiçek Mor İnci'nin ana anti H1N1 aktif bölgelerini taramış ve 34 kimyasal bileşeni tanımlamak için bölgeleri analiz etmiştir. Literatür ve veri tabanları birleştirilerek, ilaçların ve hastalıkların 67 örtüşen hedefi belirlendi. Çapraz hedeflerin zenginleştirme analizi yoluyla, EACN'nin H1N1'e karşı önemli biyolojik sürecinin protein fosforilasyonunun pozitif düzenlenmesi ve oksidatif strese yanıt olabileceğini tahmin ediyoruz. KEGG zenginleştirme analizi sonuçları, EACN'deki 19 bileşiğin 11 hedef aracılığıyla influenza A virüs yolu üzerinde etkili olduğunu göstermiştir. İlaç, PLG ve PRSS1'e etki ederek H1N1 virüsünün M2 kanalını etkiler ve PLG aracılığıyla nöraminidaz (NA) yoluna etki ederek virüs salınım sürecini de etkileyebilir. PLG ve PRSS1, EACN'nin doğrudan H1N1 üzerinde etkili olması için kilit hedefler olabilir. EACN, dökülme ve salınım süreçlerini etkileyerek H1N1'in çoğalmasını engelleyebilir. İlaç içeriği hedef yolu hastalık ağında, RELA ve NF - κ B1 en yüksek derece değerlerine sahip iki hedeftir. Bulundukları NF - κ B sinyal yolu IL1 β, TNF - α, IL-6 gibi faktörlerin ifadesini destekleyebilir ve enflamatuar yanıtı teşvik edebilir, bu da EACN'nin NF - κ B sinyal yolunu düzenlemek ve enflamasyonun vücuda verdiği zararı azaltmak için RELA ve NF - κ B1 gibi kilit hedefler üzerinde etkili olabileceğini düşündürmektedir. Ağ farmakolojisi tarafından öngörülen sonuçlara göre, EACN T hücresi sinyal yolaklarını düzenleyebilir, Th1 ve Th2 farklılaşmasını etkileyebilir ve bağışıklık düzenleyici etkiler gösterebilir. Bu nedenle, bu çalışmada EACN'nin H1N1 proliferasyonu üzerindeki inhibitör etkisini, anti-enflamatuar etkisini ve bağışıklık düzenleyici etkisini doğrulamak için hayvan deneyleri yapılmıştır. Deneysel sonuçlar, EACN'nin H1N1 enfeksiyonunun neden olduğu kilo kaybını ve akciğer indeksi artışını iyileştirebileceğini, fare akciğer dokusundaki viral yükü azaltabileceğini, fare akciğer dokusundaki patolojik hasarı hafifletebileceğini, periferik kan serumundaki TNF - α, IFN - γ, IL-1 β seviyelerini düşürebileceğini ve serum antikor IgG seviyesini artırabileceğini göstermiştir. Bu çalışmada ilk olarak Naked Purple Pearl'ün H1N1'e karşı aktif ekstraksiyon bölgelerini taramak için in vitro deneyler kullanılmış ve UPLC-Q-Hexactive-Orbitrap-MS ve ağ farmakolojisi kullanılarak EACN'nin H1N1'e karşı aktif bileşenleri tahmin edilmiştir. Tahmin edilen sonuçlar hayvan deneyleri ile doğrulanmış ve quercetin, myricetin, luteolin, kaempferol, quercetin, apigenin ve acacetin dahil olmak üzere H1N1'e karşı EACN'nin potansiyel aktif bileşenleri taranmıştır. Naked Purple Pearl'ün doğrudan virüs inhibisyonu, anti-enflamatuar etkiler ve bağışıklık düzenlemesi gibi çoklu yollar aracılığıyla anti H1N1 etkileri gösterebileceği ilk olarak gösterilmiştir. Sonraki deneylerde, seçilen monomerik bileşikleri doğrulamak ve EACN'nin anti H1N1 etkisinin mekanizmasını mRNA ve protein seviyelerinde daha fazla araştırmak için in vitro ve in vivo deneyler yapılması gerekmektedir.