Buyang Huanwu Dekoksiyonunun Nrf2/ARE Sinyal Yolu ile Aterosklerozu Önleme ve Tedavi Etme Mekanizması Üzerine Çalışma
Ateroskleroz (AS) kronik inflamatuar bir hastalıktır. AS hastalarında erken başlangıç sinsidir ve belirgin klinik bulgular yoktur, ancak hastalık ilerledikçe kalp ve beyin gibi hedef organlar ilerleyen aşamalarda etkilenebilir. Dünya Sağlık Örgütü (WHO) tarafından yapılan bir araştırmaya göre, orta yaşlı ve yaşlı insanlar hala kardiyovasküler advers olaylar için ana gruptur ve kardiyovasküler hastalık hastalarının yaklaşık 81%'si 65 yaş ve üzerinde ölmektedir. Bununla birlikte, son yıllarda AS hastalarının nüfusu da daha genç olma eğilimindedir. Çin'de kardiyovasküler ve serebrovasküler hastalıklardan muzdarip yaklaşık 300 milyon insan bulunmaktadır. AS'nin modern tıbbi tedavisi belirli bir etkinliğe sahip olsa da, AS'nin yüksek insidans oranını hala azaltamamaktadır ve uzun süreli uygulamadan sonra birçok yan etki ortaya çıkmaktadır. Bu nedenle, AS insidansının azaltılması en önemli öncelik ve ana akım araştırma yönüdür. Oksidatif stres, ateroskleroz gelişimine yol açan önemli faktörlerden biridir. İleri oksidatif protein ürünleri (AOPP) erken biyobelirteçler ve aterosklerozun bağımsız güçlü belirleyicileri olarak hizmet edebilirken, reaktif oksijen türleri (ROS) beyaz proteinlerin AOPP'ye oksidasyonunu teşvik ederek oksidatif stresin patlak vermesine yol açabilir; Malondialdehit (MDA), süperoksit dismutaz (SOD) ve glutatyon peroksidaz (GSH Px), temel olarak vücudun oksidatif stres durumunu yansıtabilen oksidatif stres yanıtının önemli biyobelirteçleridir. Bu üçü sıklıkla birbirleriyle etkileşime girerek vasküler endotel ve doku hücrelerinde oksidatif hasara yol açarak ateroskleroz oluşumuna neden olur. Araştırmalar, nükleer faktör E2 ile ilişkili faktör 2 (Nrf2)/antioksidan yanıt elemanı (ARE) sinyal yolunun oksidatif stresi düzenleyen önemli bir nükleer transkripsiyon faktörü olduğunu bulmuştur. Çoklu antioksidan proteinleri aktive edebilir ve hücre yaşlanması, apoptoz ve proliferasyon gibi çeşitli biyolojik süreçlere katılabilir.
Geleneksel Çin Tıbbı genellikle AS'nin ana patogenezinin, hastalığın temel nedeni olan pozitif qi eksikliğinde yattığına inanmaktadır; Balgam, kan stazı ve diğer patojenik faktörler önemli patojenik faktörler ve hastalığın başlangıcının göstergeleridir. Bu nedenle, AS'nin patogenezine yanıt olarak, bu çalışma "kalbi beslemek, kan stazını gidermek ve balgamı çözmek" temel yöntemini benimser ve AS'yi önlemek ve tedavi etmek için modifiye edilmiş Buyang Huanwu Tang kullanır. Buyang Huanwu Tang, Qing Hanedanlığı döneminde Wang Qingren'in "Yi Lin Gai Cuo" adlı eserinden alınan, kan dolaşımını teşvik eden ve qi'yi tonifiye eden klasik bir formüldür. AS'nin patogeneziyle uyumlu olan Gualou Xiebai Banxia Tang ile birleştirilmiştir. Ayrıca, her ikisinin de klinik uygulamada AS ile ilişkili hastalıklar üzerinde belirgin yan etkiler olmaksızın önemli terapötik etkileri vardır. Bu nedenle, bu çalışma Buyang Huanwu Tang'ı uygun şekilde modifiye etmeyi seçmiştir. Ön deneysel sonuçlar, modifiye Buyang Huanwu Tang'ın immün inflamatuar yanıtı, endoplazmik retikulum stresini düzenleyerek ve HMGB1 ve Wnt1 gibi sinyal yolaklarını etkileyerek, plak alanını azaltarak ve AS lezyonlarını hafifleterek AS'nin önlenmesi ve tedavisi üzerinde belirli bir etkiye sahip olduğunu göstermiştir. Bununla birlikte, spesifik etki mekanizması henüz aydınlatılmamıştır. Bu nedenle, bu çalışma modifiye Buyang Huanwu Tang'ın aterosklerotik plak oluşumu üzerindeki etkisini araştırmak ve modifiye Buyang Huanwu Tang'ın Nrf2/ARE sinyal yolu aracılığıyla aterosklerotik plakları düzenlediği spesifik mekanizmayı aydınlatmak için oksidatif stresi başlangıç noktası olarak almaktadır.

Modern tıbbın bir hastalık adı olarak, geleneksel Çin tıbbının eski kitaplarında "ateroskleroz" kaydı yoktur, esas olarak lümenin daralması, damar duvarının esnekliğinin azalması vb. gibi kan dolaşımının tıkanmasıyla kendini gösterir, bu nedenle "göğüs ağrısı, baş dönmesi, nabız tıkanıklığı" ve diğer kategoriler olarak sınıflandırılır. Geleneksel Çin Tıbbı, patogenezinin vücudun doğru qi'sinin eksikliğinde yattığına ve bunun da qi ve kanın zayıf dolaşımına yol açtığına inanmaktadır. "Yi Lin Gai Cuo" kitabında belirtildiği gibi: "Eğer qi zayıfsa, kan damarlarına ulaşamaz. Kan damarlarında qi yoksa, kalır ve durgunlaşır; "Compendium of Medicine", "felce elverişsiz nabız kanalları ve kan gazı tıkanıklığının neden olduğunu" kaydederek, kan stazının aterosklerozu indüklemesine teorik bir temel sağlar. Kalp eksikliği özellikle pozitif qi eksikliğinde önemlidir; kan stazı ve balgam bulanıklığı gibi patolojik faktörler hastalığın başlangıcının göstergesidir. Bu çalışma, AS patogenezi için "kalbin beslenmesi, kan stazının giderilmesi ve balgamın çözülmesi" temel prensibine dayanmaktadır. Formül Huangqi, Danggui Wei, Chishao, Chuanxiong, Taoren, Honghua, Dilong, Gualou, Xiebai, Banxia, Codonopsis pilosula, Ophiopogon japonicus, Schisandra chinensis ve diğer ilaçlardan oluşmaktadır. Huangqi, qi'yi beslemek için Codonopsis pilosula, Ophiopogon japonicus ve Schisandra chinensis ile birlikte kralın ilacıdır. Qi güçlü olduğunda kan dolaşımını teşvik etmek, kan dolaşımı güçlü olduğunda kan stazını gidermek ve kan stazı giderildiğinde kan dolaşımını teşvik etmek için tasarlanmıştır; Danggui, qi ve kanı besleyen şifalı bir bitkidir. Kan dolaşımını teşvik etmek ve kollaterallerin engelini kaldırmak için solucanlar, kırmızı şakayık, şeftali çekirdekleri, kırmızı çiçekler ve Chuanxiong eşlik eder; Gualou, Xiebai ve Banxia göğsü genişletmek, nodülleri dağıtmak ve balgamı temizlemek ve kollaterallerin engelini kaldırmak için kullanılır. Çeşitli ilaçların birlikte kullanımı qi'yi besleyici, kalbi besleyici ve bulanıklığı giderici ve kollaterallerin tıkanıklığını açıcı etkilere sahiptir. Modern araştırmalar Buyang Huanwu Tang'ın antioksidan stres, anti-enflamatuar, anti endotelyal hücre hasarı, apoptoz ve diğer yönlerden anti AS etkileri gösterebileceğini göstermiştir. Gualou, Xiebai ve Banxia, Gualou Xiebai Banxia Tang'dan türetilmiştir. Modern araştırmalar, Gualou Xiebai Banxia Tang'ın oksidatif stresi inhibe ederek, lipid metabolizmasını düzenleyerek ve enflamatuar reaksiyonları azaltarak AS'yi önleyebildiğini ve tedavi edebildiğini göstermiştir.
ApoE geni nakavt edilmiş (ApoE -/-) fareler 1992 yılında Kuzey Carolina Üniversitesi Patoloji Genetiği Laboratuvarı ve Amerika Birleşik Devletleri'ndeki Rockefeller Üniversitesi Biyokimya Genetiği ve Metabolizma Laboratuvarı tarafından başarıyla üretilmiştir. ApoE şilomikronların, aşırı düşük yoğunluklu lipoproteinin ve yüksek yoğunluklu lipoproteinin önemli bir bileşenidir ve oksidatif stres, lipid metabolizması, sinyal iletimi ve diğer hususların düzenlenmesinde çok önemli bir rol oynar. ApoE -/- farelerdeki patolojik değişiklikler insanlardakilere çok benzemektedir. Doğal diyet altında kendiliğinden fibröz plaklar ve kompozit plaklar oluşturabilir ve ciddi hiperlipidemi geliştirebilirler. Erkeklerin AS lezyonları geliştirme olasılığı daha yüksektir ve SD sıçanlarla karşılaştırıldığında ApoE -/- fareler daha hızlı model oluşturur. Yüksek yağlı diyetle (0,15% kolesterol, 18% hidrojene kakao yağı) 8 hafta boyunca beslendiğinde, rastgele diseke edilen farelerin aortunda lipid plaklar ve inflamatuar infiltrasyon bulunarak başarılı modelleme doğrulanmıştır. Bu nedenle, erkek ApoE -/- fareler genellikle deney için araştırma denekleri olarak seçilmektedir. Kan lipid seviyesi AS oluşumu ile pozitif korelasyon göstermektedir. Patolojik koşullar altında, arter duvarında lipit birikir, monosit makrofajlar oksitlenir ve köpük hücrelerine fagosite edilir, böylece fibröz plağın stabilitesini azaltır ve AS sürecini hızlandırır. Bu çalışmanın sonuçları, Buyang Huanwu Tang grubundaki AS plaklarındaki TC, TG ve LDL-C seviyelerinin model grubundakilerden daha düşük olduğunu ve aort kökünde önemli bir lipit birikimi veya plak oluşumu gözlenmediğini göstererek Buyang Huanwu Tang'ın anti AS ve plak stabilize edici etkilerini daha da doğrulamıştır.
Oksidatif stres hasarı, vücutta ROS üretimi ile antioksidan enzim sistemi tarafından ROS'un temizlenmesi arasındaki dengesizliği ifade eder, ROS birikiminde artışa yol açar ve vücutta oksidatif hasara neden olur. Arterde çok fazla ROS biriktiğinde, vasküler duvarda oksidatif hasara neden olacak, köpük hücrelerinin üretimini teşvik edecek, sonunda AS'yi indükleyecek veya şiddetlendirecek ve hatta insanların yaşam kalitesini ciddi şekilde etkileyecek olan AS plağının yırtılmasını teşvik edecektir. AOPP, çeşitli mekanizmalar yoluyla AS oluşumuna ve gelişimine katılabilir. Bir yandan oksidatif metabolizması süperoksit (H2O2, O-2, OH -) üretimine neden olarak endotel disfonksiyonuna yol açabilir; diğer yandan AOPP, enflamatuar faktörlerin sentezini ve salınımını teşvik edebilir, AS'nin ilerlemesini indükleyebilir ve şiddetlendirebilir. Bu nedenle, antioksidan reaksiyonlar AS'nin önlenmesi ve tedavisinde özellikle önemlidir. Nrf2 sinyal yolu antioksidan stres ile yakından ilişkilidir. Vücuttaki aşırı ROS yükü Nrf2/HO sinyal yolunu aktive ederek Nrf2'nin Keap1 ile oluşturduğu kompleksten ayrılmasına ve sitoplazmada serbest halde birikmesine neden olabilir. Aynı zamanda fosforile edilerek çekirdeğe aktarılır, HO-1 gen ekspresyonunu teşvik eder ve hücresel antioksidan stres direncini artırır, böylece hücreler üzerinde koruyucu bir etki gösterir. Nrf2 geni, oksijen tüketen organlarda yaygın olarak bulunan bir alkalin lösin fermuar transkripsiyon faktörüdür. Antioksidan yanıt yollarına aracılık edebilir, hücresel redoks homeostazını koruyabilir, çeşitli antioksidan protein genlerini düzenleyebilir ve hücresel oksidatif streste önemli bir rol oynayabilir. Nrf2/ARE sinyal yolunun şu anda hücresel homeostaz, lipid oluşumu ve inflamatuar sitokin salınımının düzenlenmesinde rol oynayan en önemli endojen antioksidan yol olduğu bilinmektedir. Araştırmalar, Nrf2'nin oksidatif stres hasarını azaltabildiğini, enflamatuar reaksiyonları hafifletebildiğini, hücreleri koruyabildiğini ve aracılı antioksidan yolu aracılığıyla çeşitli antioksidan enzim aktivitelerini düzenleyebildiğini göstermiştir. NQO-1, NADPH oksidazı azaltabilir, ROS seviyelerini düşürebilir ve oksidatif stres hasarının oluşumunu azaltabilir. HO-1, hemoglobinin CO, bilirubin ve biliverdin gibi maddelere parçalanmasını teşvik ettiği ve ateroskleroz oluşumu üzerinde iyi bir önleyici etkiye sahip olduğu keşfedilen oldukça önemli bir antioksidan enzimdir. Bu çalışmada Buyang Huanwu Tang'ın AS modeli farelerin aortunda Nrf2, ARE, NQO-1 ve HO-1 ekspresyonunu artırabildiği bulunmuştur. Buyang Huanwu Tang'ın AS modeli farelerin aortunu oksidatif stres hasarından korumak için Nrf2/ARE sinyal yolunu aktive edebileceği tahmin edilmektedir. Araştırma grubumuz daha ileri çalışmalar yürütmüş ve Buyang Huanwu Tang'ın farelerin aortunda Nrf2 ve ARE proteinlerinin yanı sıra NQO-1, HO-1 proteinlerinin ve mRNA'larının ekspresyonunu artırabildiğini bulmuştur. Bu da Buyang Huanwu Tang'ın Nrf2/ARE sinyal yolunu aktive edebileceğini ve anti AS etkiler gösterebileceğini göstermektedir. SOD, serbest oksijen radikallerini temizleyerek antioksidan etki gösterebilen ve oksidatif stres seviyeleri üzerinde doğrudan etkisi olan bir antioksidan enzimdir. MDA, oksidatif stres seviyeleri ile pozitif korelasyon gösteren ve vücudun oksidatif stres durumunu yansıtabilen membran lipid peroksidasyonu sürecindeki en önemli ürünlerden biridir. GSH Px vücutta önemli bir antioksidandır, oksidatif stres derecesi ile negatif korelasyon gösterir ve antioksidan etkiler göstermek için ROS'u temizleyebilir. Bu çalışmanın sonuçları, Buyang Huanwu Tang grubunun fare plazmasındaki GSH Px ve SOD ekspresyon seviyelerini artırabildiğini ve MDA ekspresyon seviyesini azaltabildiğini göstermiştir; AOPP ve ROS ekspresyon seviyelerini azaltın. Yukarıdakiler ayrıca Buyang Huanwu Tang'ın antioksidan ve stres giderici etkilere sahip olduğunu doğrulamaktadır.

Özetle, "Kalbe Fayda Sağlama, Kan Stazını Giderme ve Balgam Çözme Yöntemine" dayanan Buyang Huanwu Kaynatma, anti oksidatif stres etkisine sahiptir, aortun patomorfolojik değişikliklerini önemli ölçüde iyileştirebilir, aorttaki lipit birikimini azaltabilir ve anti ateroskleroz mekanizması Nrf2/ARE sinyal yolunun aktivasyonu ile ilgili olabilir.