Количественный анализ с помощью ВЭЖХ нескольких компонентов в отваре розы стандартной
Цветы розы, также известные как роза красная, чанчуньская красная и т.д., - это высушенные цветы Rosa chinensis Jacq. из семейства Rosaceae. Они растут в различных регионах Китая и могут быть собраны в течение всего года. Их собирают, когда цветки слегка раскрыты, и сушат в тени или при низкой температуре. Лекарственная ценность цветков розы впервые была описана в "Сборнике лекарственных средств" Ли Шичжэня. Вкус сладкий, природа теплая, принадлежат к меридиану печени, способствуют циркуляции крови, регулируют менструацию, успокаивают печень и снимают депрессию. В основном используется для лечения различных заболеваний, таких как застой ци и крови, нарушения менструального цикла, боли в груди и ребрах. Цветы розы содержат различные химические компоненты, включая флавоноиды, фенольные кислоты, ароматические масла, дубильные вещества и пигменты, среди которых флавоноиды и фенольные кислоты считаются основными лекарственными компонентами цветов розы. Флавоноиды являются основными компонентами, включая кверцетин, кверцетин, каэмпферол-3-О-рамнозид, каэмпферол, янтарную кислоту, галловую кислоту, этил галлат, гиперозид, гесперидин, изокверцитрин и др. Они обладают такими биологическими свойствами, как противовирусное, антиоксидантное, иммуноукрепляющее и противораковое действие.
Состав традиционной китайской медицины сложен, а ее фармакологические эффекты основаны на синергетическом воздействии множества активных ингредиентов на многочисленные мишени, пути и общие системы, оказывающие регулирующее воздействие на организм. Отпечаток пальца традиционной китайской медицины основан на систематическом изучении химических компонентов традиционной китайской медицины. Он всесторонне отображает информацию о компонентах традиционной китайской медицины с точки зрения групп веществ, отражая общую ситуацию с химическими компонентами традиционной китайской медицины. Это комплексное, количественно измеримое и эффективное техническое средство. В данном исследовании были получены спектры отпечатков пальцев 20 партий стандартного отвара цветков розы методом UPLC в сочетании с технологией распознавания химических образов, проанализированы и исследованы основные характерные компоненты, влияющие на стандартный отвар цветков розы, а также проведен количественный анализ множества индикаторных компонентов, с целью обеспечения справочной информации для разработки соответствующих препаратов стандартного отвара цветков розы и исследования стандартов качества.

 

Для обеспечения репрезентативности стандартного отвара в данном исследовании было проведено исследование информации об основных районах производства сырья цветков розы. В общей сложности было собрано 20 партий образцов, включая образцы на месте из основных и подлинных районов производства, таких как город Баодин в провинции Хэбэй, город Чжоукоу в провинции Хэнань, город Хэцзе в провинции Шаньдун, город Линьи в провинции Шаньдун и префектура Дали в провинции Юньнань. В соответствии с руководящими принципами "Технических требований к контролю качества и разработке стандартов гранул формулы традиционной китайской медицины" и со ссылкой на "Спецификацию управления кабинетом отвара традиционной китайской медицины в медицинских учреждениях", методы предварительной обработки стандартного отвара (время отвара, добавление воды, время отвара и другие показатели и параметры) исследуются для определения оптимального процесса приготовления; с помощью низкотемпературной концентрации и сублимационной сушки изготавливается стандартный сублимированный порошок отвара розы.
В процессе создания метода дактилоскопии было исследовано влияние растворителей для экстракции (метанол, 70% метанол, 50% метанол, этанол, 70% этанол, разбавленный этанол), методов экстракции (ультразвук, рефлюкс) и времени экстракции (10, 30, 45, 60 минут) на дактилоскопию. Учитывая достаточность экстракции, стабильность и простоту работы, в итоге была выбрана ультразвуковая обработка метанолом 50% в течение 30 минут. С помощью детектора на диодной матрице проводилось сканирование по всей длине волны (200-400 нм) стандартных образцов розового супа, сравнивались количество пиков, величина отклика и разрешение хроматограмм при разных длинах волн. Результаты показали, что использование 254 нм в качестве длины волны обнаружения привело к большему количеству хроматографических пиков и большим значениям отклика, стабильной базовой линии и меньшим помехам. В то же время были исследованы хроматографические условия водной подвижной фазы, температуры колонки и скорости потока, и в итоге было решено использовать 0,2% раствор фосфорной кислоты в качестве водной подвижной фазы, со скоростью потока 0,4 мл/мин и температурой колонки 35 ℃.
Спектр отпечатков пальцев в сочетании с технологией распознавания химических образов был использован для анализа и сравнения стандартного отвара цветков розы различного происхождения. Результаты показали, что в результате неконтролируемого анализа HCA и PCA образцы разного происхождения можно разделить на четыре категории. Анализ OPLS-DA выявил в общей сложности 11 дифференциальных биомаркеров, в основном флавоноиды и компоненты фенольных кислот, которые сыграли важную роль в отличии стандартных отваров из роз разного происхождения. Они могут служить индикаторами контроля качества стандартного отвара розы и предоставлять более полную информацию об источниках сырья для гранул розовой формулы.
В данном исследовании для предварительного изучения качества 20 партий отвара розы стандартной использовались спектры отпечатков пальцев в сочетании с кластеризацией, анализом главных компонент, ортогональным частичным дискриминантным анализом по методу наименьших квадратов и многоиндексным определением содержания компонентов. Данный метод позволяет быстро отсеять ключевые хроматографические пики, влияющие на качество различных партий лекарственного сырья. Среди них галловая кислота, дубильная кислота, гиперозид, изокверцитрин, астрагалозид, кверцитрин и кверцетин были идентифицированы путем спектрального сравнения с высоким разрешением и эталонным веществом. Результаты показали, что образцы с высоким содержанием фенольных кислот и флавоноидов были собраны в провинции Хэнань и относились к категориям S11-S13 по результатам анализа HCA и PCA. Образцы с наименьшим содержанием были собраны в провинции Юньнань и относились к первой категории S1-S6. Это может послужить основой для выбора происхождения сырья для последующего приготовления стандартного отвара розы. В настоящее время исследования показывают, что цветы розы в основном содержат флавоноиды, флавоноидные гликозиды и соединения фенольных кислот, которые обладают биологической активностью, такой как антиоксидантная, противовирусная, противогрибковая, противораковая, противоопухолевая и антивозрастная. На более позднем этапе будут проведены углубленные исследования, основанные на эффективности лекарственных средств, которые послужат основой для контроля качества стандартных отваров цветков розы и соответствующих препаратов.