Изучение активных компонентов и механизмов действия бусинок Naked Purple на основе UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS, сетевой фармакологии и экспериментальной валидации для борьбы с H1N1
Традиционное китайское лекарство Callicarpa nudiflora Hook.&Arn. представляет собой высушенные листья растения Callicarpa nudiflora Hook.&Arn. из семейства Verbenaceae. Голый пурпурный бисер в основном распространен на Хайнане, в Гуанси, Гуандуне и других регионах, а подлинным районом производства является район Вужишань в провинции Хайнань. Голый цветок пурпурной жемчужины - единственный новый препарат традиционной китайской медицины, включенный в Фармакопею Китайской Народной Республики издания 2020 года. Его односторонние препараты, таблетки Naked Flower Purple Pearl Tablets и капсулы Naked Flower Purple Pearl Capsules, широко используются для лечения кровотечений в дыхательных и пищеварительных путях и бактериальных инфекционных воспалений, вызванных избыточным жаром и токсичностью крови. Фитохимики идентифицировали более 300 соединений из голого пурпурного жемчуга, включая фенилпропаноиды, флавоноиды, тритерпеноиды, дитерпены, иридоиды, летучие масла и многое другое. Современные фармакологические исследования подтвердили, что голый цветок пурпурной жемчужины обладает противовоспалительной, антитромботической, противоопухолевой, антибактериальной и гепатопротекторной активностью. В процессе скрининга традиционной китайской медицины с противовирусной активностью было обнаружено, что экстракт голого цветка пурпурной жемчужины обладает хорошей противовирусной активностью (например, в отношении вируса гриппа H1N1, энтеровируса 71 и т.д.). Инфекция вируса гриппа А является распространенной причиной смертности от пневмонии. Тяжелая инфекция вирусом гриппа А может вызвать двустороннюю инфильтрацию легких и гипоксемию, известную как острый респираторный дистресс-синдром, который является одной из основных причин смерти, вызванной вирусом гриппа А. Этот эксперимент посвящен изучению анти-H1N1 активности пурпурного бисера из голых цветов. Химический состав эффективных частей пурпурной бусины был определен с помощью сверхвысокоэффективной жидкостной хроматографии, квадрупольной электростатической полевой орбитальной МС, а механизм анти H1N1 действия пурпурной бусины был предсказан и экспериментально проверен с помощью сетевой фармакологии. Предварительно был изучен механизм действия пурпурной бусины из голых цветов против H1N1.

калликарпа нудифлора
Вирус гриппа А выработал различную степень устойчивости к широко используемым ингибиторам М2-каналов и ингибиторам NA. Поэтому поиск новых препаратов или методов лечения против гриппа А стал актуальной проблемой, требующей решения. Традиционная китайская медицина сыграла важную роль в клиническом лечении вируса гриппа А. Холистическая концепция в теории традиционной китайской медицины систематически регулирует пациентов как органическое целое, а сетевая фармакология изучает взаимодействие между биологическими функциями каждого узла в сети и заболеваниями путем построения сети целевых путей лекарственного компонента заболевания, что соответствует холистической концепции в традиционной китайской медицине. В этом эксперименте сначала был проведен скрининг основных активных сайтов против H1N1 традиционной китайской медицины Naked Flower Purple Pearl и анализ сайтов для выявления 34 химических компонентов. На основе литературных данных и баз данных было выявлено 67 пересекающихся мишеней лекарств и заболеваний. Проведя анализ обогащения перекрестных мишеней, мы предположили, что важным биологическим процессом EACN против H1N1 может быть положительная регуляция фосфорилирования белков и ответ на окислительный стресс. Результаты анализа обогащения KEGG показали, что 19 соединений в составе EACN действуют на пути вируса гриппа А через 11 мишеней. Препарат влияет на канал M2 вируса H1N1, воздействуя на PLG и PRSS1, а также может влиять на процесс высвобождения вируса, воздействуя на путь нейраминидазы (NA) через PLG. PLG и PRSS1 могут быть ключевыми мишенями для EACN, чтобы напрямую воздействовать на H1N1. EACN может подавлять размножение H1N1, влияя на процессы его линьки и высвобождения. В сети болезней целевых путей лекарственных ингредиентов RELA и NF - κ B1 являются двумя мишенями с наибольшими значениями степени. Сигнальный путь NF - κ B, в котором они находятся, может способствовать экспрессии таких факторов, как IL1 β, TNF - α, IL-6, и стимулировать воспалительную реакцию, что позволяет предположить, что EACN может действовать на ключевые мишени, такие как RELA и NF - κ B1, чтобы регулировать сигнальный путь NF - κ B и уменьшить ущерб от воспаления в организме. Согласно результатам, предсказанным сетевой фармакологией, EACN может регулировать сигнальные пути Т-клеток, влиять на дифференцировку Th1 и Th2 и оказывать иммунорегулирующее действие. Поэтому в данном исследовании были проведены эксперименты на животных для проверки ингибирующего, противовоспалительного и иммунорегулирующего действия EACN на распространение вируса H1N1. Результаты эксперимента показали, что EACN может улучшить потерю веса и увеличение индекса легких, вызванное инфекцией H1N1, уменьшить вирусную нагрузку в легочной ткани мышей, облегчить патологическое повреждение легочной ткани мышей, снизить уровни TNF - α, IFN - γ, IL-1 β в сыворотке периферической крови и увеличить уровень сывороточных антител IgG. В этом исследовании сначала использовались эксперименты in vitro для скрининга активных мест экстракции Naked Purple Pearl против H1N1, а также прогнозировались активные ингредиенты EACN против H1N1 с помощью UPLC-Q-Hexactive-Orbitrap-MS и сетевой фармакологии. Прогнозируемые результаты были подтверждены экспериментами на животных, и был проведен скрининг потенциальных активных ингредиентов EACN против H1N1, включая кверцетин, мирицетин, лютеолин, каэмпферол, кверцетин, апигенин и акацетин. Предварительно было показано, что Naked Purple Pearl может оказывать противовирусное действие против H1N1 через несколько путей, таких как прямое ингибирование вируса, противовоспалительный эффект и иммунная регуляция. В последующих экспериментах необходимо провести опыты in vitro и in vivo для проверки выбранных мономерных соединений и дальнейшего изучения механизма анти-H1N1 эффекта EACN на уровне мРНК и белка.