A célpont felismerése és a saikosaponin A antidepresszáns hatásának vizsgálata
A depresszió a mentális rendszer gyakori betegsége, és előfordulási aránya évről évre nő. Az előrejelzések szerint 2030-ra a depresszió lesz a világon a kóros halálozás és rokkantság elsődleges oka.
A Chaihu hagyományos kínai gyógyászatban a májat nyugtató, depressziót enyhítő, hőtisztító és külső hőt enyhítő hatású. Gyakran használják a depresszió kezelésére szolgáló hagyományos kínai gyógyászati formulák fő összetevőjeként, mint például a Xiaochaihu Tang, a Chaihu Shugan San és a Chaihu Guizhi Tang. A Chaihu fő hatóanyaga a saikosaponin nevű triterpenoid szaponin vegyület, amelyek közül a saikosaponin A (SSA), az az saikosaponin B2 (SSB2) és a saikosaponin D (SSD) a saikosaponin fő hatóanyagai. Kutatások kimutatták, hogy az SSA antidepresszáns hatást fejt ki azáltal, hogy növeli a monoamin neurotranszmitterek szintjét a depressziós modellpatkányok agyában, aktiválja a p-CREB/BDNF útvonalat és gátolja a hippokampusz neuronális apoptózist. Ezenkívül az SSA antidepresszáns hatást fejt ki a BDNF TrKB jelátviteli útvonal fokozásával patkányok hippokampuszszövetében. Az SSA antidepresszáns hatást fejthet ki a prolinban gazdag transzmembránfehérjék (PRRT2) expressziójának növelésével és a dopaminreceptor (DA) szintjének emelésével is a hippokampuszszövetben. Bár az SSA antidepresszáns hatását egyértelműen meghatározták, a korábbi tanulmányok csak a neurotranszmitter szintek változásait használták az SSA antidepresszáns hatásának jellemzésére, egyetlen kimutatási indexszel és korlátozott mechanizmus-kutatással, ami nem tudja teljes mértékben megmagyarázni az antidepresszáns gyógyszerek célpontját. Az SSA antidepresszáns hatásának és célpontjának tisztázása érdekében ez a tanulmány egy krónikus, előre nem látható enyhe stressz (CUMS) modellegér létrehozását tervezi, és farok felfüggesztési tesztet (TST) és kényszerített úszás tesztet (FST) használ az SSA antidepresszáns hatásának meghatározására; Továbbá számítógépes molekuláris dokkolási technológiát alkalmaz az SSA célpontjainak elemzésére, és az SSA célpontjainak validálására a celluláris termikus eltolódás vizsgálat (CET-SA) és a gyógyszer-affinitásra reagáló célpont-stabilitási vizsgálat (DARTS) segítségével; és Western blottingot és más technikákat használtak az SSA antidepresszáns mechanizmusának tanulmányozására. Ez a tanulmány új módszereket és stratégiákat biztosít a kis molekulájú gyógyszercélpontok felfedezéséhez.
A depresszió patogenezise jelenleg nem tisztázott, és több hipotézis is létezik, amelyek közül a monoamin neurotranszmitter-zavar hipotézis fontos szerepet játszik a depresszió kialakulásában. A neurotranszmitter-rendellenességekkel kapcsolatos receptorok, mint az 5-hidroxi-triptamin receptor (5-HT), dopamin receptor (DAR), melatonin receptor (MT), oxitocin receptor (OXTR) stb. G fehérjéhez kapcsolt receptorok; depressziós betegeken végzett kutatások összefüggést mutattak ki az oxitocin és receptorgénjei és a depresszió között. Az oxitocin (OT) egy 9 aminosavból álló hipofízis neuropeptid, amely képes csökkenteni a szorongás szintjét, fokozza a nyugtatást és jelentős antidepresszáns hatással rendelkezik; Az OXTR expressziójának és aktiválásának specifikus célzott befolyásolása összefüggésbe hozható a depresszió, szorongás és stressz okozta egyes betegségekkel. Ezért az OXTR az SSA antidepresszáns hatásának egyik fő célpontja. E tanulmány célja a depresszióval kapcsolatos G fehérjéhez kapcsolt receptorok átfogó elemzése és az SSA antidepresszáns hatásainak célpontjainak tisztázása. E cikk célja az SSA antidepresszáns hatásainak célpontjainak és mechanizmusainak vizsgálata, amely szükséges elméleti és referenciaalapot biztosít a klinikai kutatáshoz és a mentális rendellenességek, például a depresszió új gyógyszerfejlesztéséhez.

 

A depresszió jelentős hatással van a betegek életére és munkájára, és hatalmas terhet ró a családjukra és a társadalomra. A depresszió patológiai mechanizmusa összetett, és a jelenleg a piacon kapható különböző antidepresszáns gyógyszerek többsége lassan hat, rossz a gyógyulási arányuk, és alapvetően nem gyógyítható, a mellékhatások nagy gyakorisága mellett. Ezért egy új antidepresszáns gyógyszer kifejlesztése fontos klinikai értékkel bír a depresszió kezelésében, és reményt és jó híreket hoz a depresszióban szenvedő betegek számára.
A chaihu különböző farmakológiai hatásokkal rendelkezik, beleértve a gyulladáscsökkentő, rákellenes, vírusellenes, antibakteriális, hepatoprotektív és immunmoduláló hatásokat. Az elmúlt években a hagyományos kínai orvoslás jelentős terápiás hatást ért el a depresszió kezelésében. A meglévő adatok azt mutatják, hogy az antidepresszáns gyógyszerek egyharmada a hagyományos kínai orvoslás olyan formuláin alapul, mint a Chaihu, ami kiemeli a Chaihu jelentőségét a depresszió kezelésében. A Bupleurum chinense antidepresszáns hatású hatóanyagai közé elsősorban az SSA, SSB2 és SSD tartozik, amelyek közül az SSA és az SSD azonos molekuláris képlettel rendelkezik, és csak térszerkezetben különbözik. Ezért az SSA antidepresszáns mechanizmusának tanulmányozása nagy jelentőséggel bír a Bupleurum chinense hagyományos kínai gyógyszer fejlesztése és felhasználása szempontjából. Bár a saikosaponin depresszióra gyakorolt jótékony hatásait megállapították, a hatásmechanizmusa még mindig tisztázatlan.
Az oxitocin vélhetően szerepet játszik az intimitásban, a társadalmi elismerésben, a partnerek közötti kötődésben és a szorongásban. Az OXTR a depresszió, a szorongás és a stressz által okozott egyes tünetekkel is összefüggésbe hozható. A hipotalamusz-hipofízis-mellékvese tengely (HPA-tengely) és a hippokampusz neuronális célpontjainak szabályozásával javíthatja a betegek depressziós tüneteit. Ezért az OXTR valószínűleg a depresszió kezelésének új célpontja lesz.
Ez a vizsgálat a korábbi sejtszűrés eredményein alapul, CUMS modell egereket használva hordozóként, valamint TST és FST segítségével az SSA antidepresszáns hatásának kimutatására. A kísérleti eredmények azt mutatják, hogy az SSA jelentős antidepresszáns hatással rendelkezik, és antidepresszáns hatása összehasonlítható a pozitív kontroll Fluoxetinével. Továbbá az SSA célpontját számítógépes molekuláris dokkolási technológia, a CETSA és a DARTS segítségével azonosították.
A MAPK-útvonal aktiválása, különösen a MEK1/2 foszforiláció aktiválása fontos útvonal az oxitocin szorongásellenes hatásainak kifejtéséhez, és az ERK1/2 a MAPK-útvonal egyik fő kináza. Ezért ebben a vizsgálatban előzetesen értékeltük a kis molekulájú vegyületek antidepresszáns hatékonyságát az ERK1/2 foszforilációs szintjének változásának kimutatásával. Bár a molekuláris dokkolási kísérletek, a sejthőátviteli próbák és a gyógyszeraffinitási reakció célpontstabilitási kísérletek mind azt mutatták, hogy az SSA kötődik az OXTR-hez, és az SSA erősebb kötődési képességgel rendelkezik az OXTR-hez, mint az SSB2. Az ERK1/2 foszforilációs szintjének kimutatási kísérletében azonban az SSA nem aktiválta az ERK1/2 útvonalat az OXTR után. Ennek lehetséges oka, hogy bár az SSA képes kötődni az OXTR-hez, az OXTR-hez való kötődés után antidepresszáns hatása nem a MAPK-útvonalon keresztül jelentkezik. Az OXTR különböző G-fehérjékhez (beleértve a Gq-t és a Gi-t) kapcsolódhat, amelyek az OXTR jeleit különböző intracelluláris útvonalakra továbbíthatják, ami különböző sejtfunkciókhoz vezet. Ez az eredmény összhangban van a korábbi jelentésekkel, például prosztatarákos sejtekben az aktivált OXTR elsősorban a Gi útvonalra támaszkodik a prosztatarákos sejtek migrációjának közvetítésében, és az ERK1/2 útvonal nem aktiválódik e folyamat során. Ezenkívül az SSA védőhatást fejt ki az LPS által kiváltott endometritisz ellen azáltal, hogy gátolja a nukleáris transzkripciós faktor kappa B (NF - κ B) és a kappa B inhibitor (I κ B α) foszforilációs szintjét, amelyet a lipopoliszacharid (LPS) indukál. A jövőben az SSA-val stabilan expresszáló OXTR sejteket stimulálhatunk, és a downstream jelátviteli útvonalak foszforilációs szintjeinek kimutatásával tovább határozhatjuk azt a specifikus mechanizmust, amellyel az SSA aktiválja az OXTR-t és antidepresszáns hatást fejt ki.
Tekintettel a hagyományos kínai gyógyászatban, a Chaihu-ban rejlő hatalmas potenciálra a depresszió kezelésében, valamint a nyugati orvosláshoz képest kevesebb mellékhatással járó előnyére, az SSA antidepresszáns mechanizmusának feltárása rendkívül fontos szerepet játszik a depresszió megelőzésében és kezelésében. A G-proteinhez kapcsolt receptorcsaládnak több mint 800 tagja van, és részt vesz az emberi szervezet szinte valamennyi patológiai és fiziológiai folyamatának szabályozásában. Annak kutatása, hogy az SSA az OXTR-t és a kapcsolódó sejtes jelátviteli útvonalakat célozza-e, szükséges elméleti és referenciaalapot biztosít a mentális rendellenességek, például a depresszió klinikai kutatásához, kezeléséhez és új gyógyszerek fejlesztéséhez.