Udforskning af de aktive anti-H1N1-komponenter og -mekanismer i nøgne lilla perler baseret på UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS, netværksfarmakologi og eksperimentel validering
Den traditionelle kinesiske medicin, Callicarpa nudiflora Hook.&Arn., er et tørret blad af planten Callicarpa nudiflora Hook.&Arn. i familien Verbenaceae. Naked Purple Beads distribueres hovedsageligt i Hainan, Guangxi, Guangdong og andre regioner, og det autentiske produktionsområde er Wuzhishan-distriktet i Hainan-provinsen. Naked Flower Purple Pearl er den eneste nyligt tilføjede traditionelle kinesiske medicin i 2020-udgaven af Pharmacopoeia of the People's Republic of China. Dens ensidige præparater, Naked Flower Purple Pearl Tablets og Naked Flower Purple Pearl Capsules, bruges i vid udstrækning til at behandle blødninger i luftvejene og fordøjelsessystemet og bakteriel infektiøs inflammation forårsaget af overdreven blodvarme og toksicitet. Fytokemikere har identificeret over 300 forbindelser fra nøgne lilla perler, herunder phenylpropanoider, flavonoider, triterpenoider, diterpener, iridoider, flygtige olier og meget mere. Moderne farmakologisk forskning har bekræftet, at den nøgne blomsterlilla perle har antiinflammatoriske, antitrombotiske, antitumorale, antibakterielle og hepatobeskyttende aktiviteter. I processen med at screene traditionel kinesisk medicin med antiviral aktivitet blev det konstateret, at ekstraktet af nøgen blomst lilla perle har god antiviral aktivitet (såsom H1N1 influenzavirus, enterovirus 71 osv.). Influenza A-virusinfektion er en almindelig årsag til lungebetændelsesrelaterede dødsfald. Alvorlig infektion med influenza A-virus kan forårsage bilateral lungeinfiltration og hypoxæmi, kendt som akut respiratorisk distress syndrom, som er en af de vigtigste dødsårsager forårsaget af influenza A-virus. Dette eksperiment fokuserer på anti-H1N1-aktiviteten af den nøgne blomsterlilla perle. Den kemiske sammensætning af de effektive dele af den nøgne blomsterlilla perle blev identificeret ved hjælp af ultrahøjtydende væskekromatografi quadrupol elektrostatisk felt orbitrap MS, og anti H1N1-mekanismen for den nøgne blomsterlilla perle blev forudsagt og eksperimentelt verificeret ved hjælp af netværksfarmakologi. Virkningsmekanismen for den nøgne blomsterperle mod H1N1 blev foreløbigt udforsket.

callicarpa nudiflora
Influenza A-virus har udviklet varierende grader af resistens over for almindeligt anvendte M2-kanalhæmmere og NA-hæmmere. Derfor er det blevet et presserende problem at finde nye lægemidler eller behandlingsmetoder mod influenza A. Traditionel kinesisk medicin har spillet en vigtig rolle i den kliniske behandling af influenza A-virus. Det holistiske koncept i traditionel kinesisk medicinteori regulerer systematisk patienter som en organisk helhed, mens netværksfarmakologi udforsker samspillet mellem de biologiske funktioner i hver node i netværket og sygdomme ved at konstruere et lægemiddelkomponentmålvejssygdomsnetværk, hvilket er i overensstemmelse med det holistiske koncept i traditionel kinesisk medicin. Dette eksperiment screenede først de vigtigste anti-H1N1-aktive steder i den traditionelle kinesiske medicin Naked Flower Purple Pearl og analyserede stederne for at identificere 34 kemiske komponenter. Ved at kombinere litteratur og databaser blev der identificeret 67 overlappende mål for lægemidler og sygdomme. Gennem berigelsesanalyse af krydsende mål spekulerer vi i, at den vigtige biologiske proces med EACN mod H1N1 kan være den positive regulering af proteinfosforylering og respons på oxidativ stress. Resultaterne af KEGG-berigelsesanalysen viste, at 19 forbindelser i EACN virker på influenza A-virusvejen gennem 11 mål. Lægemidlet påvirker M2-kanalen i H1N1-virus ved at virke på PLG og PRSS1 og kan også påvirke virusfrigivelsesprocessen ved at virke på neuraminidase (NA)-vejen gennem PLG. PLG og PRSS1 kan være vigtige mål for EACN, så de kan virke direkte på H1N1. EACN kan hæmme spredningen af H1N1 ved at påvirke dens udskillelses- og frigørelsesprocesser. I sygdomsnetværket for lægemiddelingredienser er RELA og NF - κ B1 de to mål med de højeste gradværdier. NF-κ B-signalvejen, hvor de er placeret, kan fremme udtrykket af faktorer som IL1 β, TNF - α, IL-6 og fremme inflammatorisk respons, hvilket tyder på, at EACN kan virke på vigtige mål som RELA og NF-κ B1 for at regulere NF-κ B-signalvejen og reducere betændelsesskader i kroppen. I henhold til de resultater, der forudsiges af netværksfarmakologi, kan EACN regulere T-cellesignalveje, påvirke Th1- og Th2-differentiering og udøve immunregulerende virkninger. Derfor udførte denne undersøgelse dyreforsøg for at verificere den hæmmende effekt, den antiinflammatoriske effekt og den immunregulerende effekt af EACN på H1N1-spredning. Forsøgsresultaterne viste, at EACN kan forbedre vægttabet og stigningen i lungeindekset forårsaget af H1N1-infektion, reducere den virale belastning i musens lungevæv, lindre patologiske skader i musens lungevæv, sænke niveauerne af TNF - α, IFN - γ, IL-1 β i perifert blodserum og øge niveauet af serumantistof IgG. Denne undersøgelse brugte først in vitro-eksperimenter til at screene de aktive ekstraktionssteder i Naked Purple Pearl mod H1N1 og forudsagde de aktive ingredienser i EACN mod H1N1 ved hjælp af UPLC-Q-Hexactive-Orbitrap-MS og netværksfarmakologi. De forudsagte resultater blev verificeret ved dyreforsøg, og potentielle aktive ingredienser i EACN mod H1N1 blev screenet, herunder quercetin, myricetin, luteolin, kaempferol, quercetin, apigenin og acacetin. Det blev foreløbigt påvist, at Naked Purple Pearl kan udøve anti-H1N1-effekter gennem flere veje, såsom direkte virusinhibering, antiinflammatoriske effekter og immunregulering. I efterfølgende eksperimenter er det nødvendigt at udføre in vitro- og in vivo-eksperimenter for at validere de udvalgte monomere forbindelser og yderligere undersøge mekanismen for EACN's anti-H1N1-effekt på mRNA- og proteinniveau.