Изучение механизма действия Curcuma zedoaria и Biejia medicine в борьбе с фиброзом печени на основе сетевой фармакологии, молекулярного докинга и экспериментальной проверки
Фиброз печени - это хроническое воспаление и некроз клеток печени, вызванные непрерывным действием различных патогенных факторов. Некоторые непаренхимальные клетки печени активируются, что приводит к диффузной пролиферации внеклеточного матрикса, разрастанию фиброзной ткани и несбалансированному распаду волокон в печени, что приводит к разрастанию волокнистой соединительной ткани в печени и инициирует процесс фиброза печени. На поздней стадии происходит ремоделирование печеночных долек и формирование псевдодолек, текстура печени становится твердой, что приводит к дисфункции печени, называемой циррозом; фиброз печени - это не самостоятельное заболевание, а общий патологический процесс при многих хронических заболеваниях печени. По данным исследования, более 50 миллионов взрослых людей во всем мире страдают от хронических заболеваний печени; в Китае около 300 миллионов человек страдают от заболеваний печени, что составляет 11% от общего числа смертей от цирроза. Поэтому поиск препаратов для профилактики и лечения фиброза печени имеет огромное значение для пациентов с такими заболеваниями печени, как фиброз печени. Согласно исследованиям, традиционная китайская медицина и комбинированные препараты (например, комбинированные таблетки/капсулы Biejia Ruangan, таблетки/капсулы Fuzheng Huayu, таблетки Dahuang Zhechong и т.д.) обладают хорошим терапевтическим эффектом в профилактике и лечении фиброза печени, а их преимущества заключаются в наличии множества компонентов и целей.
Фиброз печени относится к категориям "обезболивание", "обструкция печени", "накопление печени" и "накопление" в традиционной китайской медицине. Curcumae Rhizoma (CR) и Trionycis Carapax (TC) являются широко используемыми препаратами в клиническом лечении фиброза печени в традиционной китайской медицине. TC проникает в печень, размягчает твердые и рассеивает узелки, устраняет застой крови и устраняет симптомы. CR способствует циркуляции крови и устраняет застой крови, размягчает твердую ткань и способствует застою, устраняет симптомы и узлы. Оба препарата используются в комбинации, чтобы усилить эффект, способствующий циркуляции крови, устраняющий застой крови, размягчающий твердую ткань и рассеивающий узелки. Современные фармакологические исследования показали, что CR может оказывать противофиброзный эффект на печень через несколько механизмов действия. Кроме того, различные комбинированные препараты традиционной китайской медицины, в состав которых входит ТС, могут улучшать функцию печени пациентов и облегчать процесс фиброза. Клинические и экспериментальные исследования показывают, что и CR, и TC обладают явным противофиброзным действием, но конкретный механизм их синергетического противофиброзного действия при совместном применении в качестве лекарственного средства до сих пор не выяснен. В данном исследовании используются различные методы исследования, такие как сетевая фармакология, технология молекулярного докинга и экспериментальная проверка, чтобы изучить роль и возможные механизмы традиционных препаратов в борьбе с фиброзом печени CRTC с точки зрения компонентов, мишеней, биологических функций, сигнальных путей и т.д., надеясь обеспечить определенную основу и ссылку для современных исследований по борьбе с фиброзом печени CRTC.

Изучение современных характеристик и механизмов действия традиционной китайской медицины всегда было ключевым направлением современных исследований в области традиционной китайской медицины. Биеджия и куркума цедоария - широко используемые препараты для клинического лечения фиброза печени в традиционной китайской медицине. В клинической практике эти два препарата часто используются как взаимозаменяемые, оказывая эффекты стимулирования кровообращения, устранения застоя крови, размягчения и рассеивания узлов, а также оказывая явное противофиброзное действие на печень. Однако конкретный механизм синергетического противофиброзного действия этих двух препаратов долгое время оставался неясным.
В данной статье с помощью современной сетевой фармакологии сначала были определены цели пересечения CRTC и фиброза печени, а затем создана сеть PPI для проверки основных целей, таких как IL-6, AKT1, STAT3, PPARG и др. Среди них IL-6 является ключевой мишенью с самым высоким рейтингом. IL-6 является членом семейства провоспалительных цитокинов и может влиять на различные иммунные и физиологические процессы, такие как производство белков острой фазы (таких как С-реактивный белок, ферритин и т.д.), воспаление, антиген-специфический иммунный ответ, кроветворение, клеточный апоптоз, дифференцировку и клеточный метаболизм. Кроме того, исследования показали, что активация сигнала STAT3 в клетках печени обычно улучшает воспаление печени и регулирует процесс фиброза печени, предотвращая повреждение клеток печени и ингибируя сигнал STAT1; STAT3 также может регулировать переход от фибробластов к миофибробластам и транскрипцию матричных металлопротеиназ и их гомологичных ингибиторных белков, тем самым улучшая фиброз печени на уровне деградации внеклеточного матрикса. Анализ показывает, что IL-6 и STAT3 имеют большое значение для CRTC в борьбе с фиброзом печени. ‍
Дальнейший анализ сетевой модели с помощью топологического анализа показал, что фармакологические эффекты многокомпонентного мультитаргета CRTC образуют сложную сеть. Было выявлено пять ключевых функциональных компонентов: 9,12-октадекадиеновая кислота, герагенин, 8-октадекадиеновая кислота, 9-октадекадиеновая кислота и 11-октадекадиеновая кислота. Основные биологические процессы, участвующие в его противофиброзном действии, включают гормональный ответ, положительную регуляцию фосфатного обмена и положительную регуляцию фосфатного обмена. Клеточные компоненты включают рецепторные комплексы, мембранные рафты, мембранные микрорегионы и т.д. Молекулярные функции в основном включают связывание транскрипционных факторов, связывание киназ, киназную активность и т.д.; основные сигнальные пути включают ингибиторную устойчивость тирозинкиназы EGFR, сигнальный путь PI3K Akt и т.д. Мы обнаружили, что в анализе обогащения путей KEGG, P-значение устойчивости к ингибиторам тирозинкиназы EGFR было относительно небольшим, и было больше генов, обогащенных в этом пути. Основные мишени IL-6, AKT1, STAT3 и т.д. были включены в путь устойчивости к ингибиторам тирозинкиназы EGFR. Путь резистентности ингибитора тирозинкиназы EGFR имеет большое значение для противофиброзного эффекта CRTC, и в механизме его действия нельзя игнорировать сигнальную сеть, образованную его взаимодействием с JAK-STAT, PI3K Akt и другими путями. Многочисленные исследования показали, что сигнальная ось IL-6/EGFR/STAT вовлечена в различные важные биологические процессы, такие как рост, пролиферация, дифференцировка, апоптоз и иммунная регуляция клеток. IL-6, являясь важным медиатором воспаления в иммунном ответе организма, может способствовать активации JAK/STAT-сигнализации. Связываясь с рецепторами, он может способствовать активации JAK1, фосфорилированию и транскрипции STAT3. Большинство исследований показали, что STAT3 часто активируется почти во всех фиброзных системах; в печени сигнализация STAT3 является ключевым противовоспалительным сигналом, контролирующим воспаление печени, и ее активация может играть противовоспалительную и иммунорегулирующую роль в процессе фиброза печени. Кроме того, использование ингибиторов STAT3 в доклинических животных моделях показало хорошую антифибротическую активность, что указывает на то, что STAT3 является истинной мишенью для лечения фибротических заболеваний у пациентов. Известно, что EGFR является ключевым регуляторным фактором пролиферации клеток печени на начальном этапе ее регенерации; среди всех тканей EGFR экспрессируется больше всего в клетках печени взрослого человека, что указывает на его важную роль в поддержании функции печени. Во-первых, EGF - это известный растворимый медиатор, участвующий в активации ГСК, а EGFR может опосредовать активацию ГСК и способствовать развитию профибротического фенотипа. Его точный механизм может быть связан с производством реактивных видов кислорода в ткани печени. Во-вторых, в своем исследовании Фукс и др. обнаружили, что ингибиторы EGFR могут подавлять экспрессию нескольких известных профибротических генов в нескольких моделях фиброза печени, что является первым доказательством того, что ингибирование EGFR может обратить фиброз печени. Наконец, EGFR может связываться со своими специфическими лигандами, образуя димеры, вызывая фосфорилирование различных эффекторных белков и активируя многочисленные классические сигнальные пути, такие как пути трансдуктора сигнала и активатора транскрипции (STAT); EGFR, как ключевой участник всех стадий ответа печени на повреждение, может вызывать классическое фосфорилирование STAT3 Tyr705, тем самым контролируя пролиферацию и дифференцировку цитокинов и препятствуя образованию фиброза. Таким образом, предсказание основных мишеней и путей с помощью сетевой фармакологии, а также дальнейшая проверка регуляторного влияния предсказанной сигнальной оси IL-6/EGFR/STAT3 на фиброз печени с помощью экспериментов помогут нам понять механизм противофиброзного действия CRTC.
В экспериментах на животных результаты окрашивания HE показали улучшение патологической морфологии, такой как воспаление и инфильтрация, после введения препарата, что указывает на то, что CRTC может облегчить фиброз печени, вызванный сывороткой свиней. Результаты ИФА показали, что уровни IL-6, EGFR и STAT3 в сыворотке крови крыс модельной группы были значительно повышены, и все они были значительно снижены после введения препарата, демонстрируя дозозависимую зависимость. Данное исследование позволяет предположить, что механизм действия CRTC при лечении фиброза печени может быть связан с сигнальной осью IL-6/EGFR/STAT3, что создает определенную основу для раскрытия современного механизма лечения фиброза печени традиционным CRTC, а также дает полезные рекомендации для исследования молекулярного механизма сетевой фармакологии и технологии молекулярного докинга для традиционных препаратов.