A különböző régiókból származó gránátalma levelek minőségének értékelése ujjlenyomat-spektrumok és kémiai sztöchiometria alapján
A gránátalma levelei a rózsafélék családjába tartozó Psidium guajava Linn. növény szárított levelei, amelyek főként Guangdong, Guangxi, Sichuan, Yunnan, Fujian és Tajvan területén terjednek el. Nedvességet szárító és a lépet erősítő, hőtisztító és méregtelenítő, a beleket összehúzó és a hasmenést megállító, valamint gyulladáscsökkentő és vérzéscsillapító hatású. A modern kutatások kimutatták, hogy a gránátalmalevelek fő hatóanyagai közé tartoznak a flavonoidok (guaiacol, izoquercitrin, hiperozid, naringin, naringin, naringenin, kvercetin) és triterpenoidok, amelyek hipoglikémiás, antioxidáns és antibakteriális hatással rendelkeznek.
Jelenleg a gránátalma levelei nem szerepelnek a Kínai Gyógyszerkönyv 2020-as kiadásában, de szerepelnek a Guangxi kínai gyógynövény standardokban (1990-es kiadás), Guangdong tartomány kínai gyógynövény standardok 1. kötetében (2004-es kiadás), Hunan tartomány kínai gyógynövény standardokban (2009-es kiadás), Hunan tartomány kínai gyógynövénygyógyászati feldolgozási szabványok (2010. évi kiadás), Guangxi Zhuang gyógyszerkészítmények minőségi szabványai (2. kötet, 2011. évi kiadás), Fujian tartomány kínai gyógynövénygyógyászati feldolgozási szabványok (2012. évi kiadás) és Sichuan tartomány kínai gyógynövénygyógyászati feldolgozási szabványok (2015. évi kiadás), és helyi szabványos gyógyászati anyagok. A fenti szabványok csak minőségileg azonosították a gránátalma levelekben lévő kvercetint vékonyréteg-kromatográfiával. A gránátalma levél gyógyászati anyagok minőségére vonatkozó kutatási és elemzési módszerek elsősorban a fő összetevők tartalmára és a többkomponensű mennyiségi meghatározásra összpontosítanak, ami nehezen tükrözi átfogóan a gyógyászati anyagok minőségét. Eközben a guajava, mint fontos gazdasági gyümölcsfa, bőséges erőforrásokban bővelkedik, de eredete változó, ami megnehezíti a guajavalevelek minőségének ellenőrzését. Összességében a gránátalma levelek minőségi szabványai és értékelési kutatásai még nem tökéletesek, és sürgősen foglalkozni kell velük.
A kínai gyógyszer-ujjlenyomat egy átfogó és számszerűsíthető azonosítási módszer a kínai gyógyászati anyagok és félkész kínai gyógyszerkészítmények eredetiségének, minőségének és stabilitásának értékelésére. Ma már széles körben használják a kínai gyógyászati anyagok minőségének értékelésére. A kutatócsoport a gránátalma levelek flavonoid komponenseinek többszörös értékelési módszerét hozta létre a korai szakaszban, ami biztos alapot biztosít a gránátalma levelek minőségellenőrzéséhez. Ez a tanulmány a gránátalmalevelet tekinti kutatási tárgynak, és 31 tételnyi, különböző eredetű gránátalmalevél-mintát gyűjt ujjlenyomat-elemzésre. A gránátalmalevél minősége és a származás közötti összefüggés vizsgálatára hasonlósági értékelést, klaszterelemzést, főkomponens-elemzést és ortogonális részleges legkisebb négyzetek diszkriminancia-elemzést alkalmazunk, ami hivatkozási alapot nyújt a gránátalmalevelek minőségértékeléséhez és a minőségi szabványok kutatásához.
A kutatócsoport korábbi kutatásaira hivatkozva az extrakciós módszert 60% etanolos ultrahangos extrakciónak határoztuk meg 30 percig, acetonitril-0,2% foszforsav-víz áramlási rendszerrel, Zorbax SE-C18 oszlopon (250 mm x 4,6 mm, 5um), 35 ℃ Du hőmérsékleten és 10uL injekciós térfogattal. Ugyanakkor megvizsgáltuk a hullámhosszok (230, 254, 360 nm) és az áramlási rendszerben a gradiens elúció különböző arányainak hatását a gránátalma levelek HPLC-ujjlenyomatára. Ennek eredményeként a kísérletben meghatározott kromatográfiás körülmények között a gránátalma levél mintaoldata mutatta a legtöbb csúcsot, a HPC alapvonal pedig stabil csúcsformát és jó elválasztást mutatott.
Ez a kísérlet a guava levél gyógyászati anyagokat gyűjtött regionális képviselőkkel, beleértve Guangdong, Guangxi, Fujian, Hainan és Sichuan, biztosítva a guava levél ujjlenyomat spektrumának egyetemességét. A gránátalma levelek HPLC-ujjlenyomat-spektrumának elemzéséhez használt hasonlósági értékeléssel megállapították, hogy 31 tétel gránátalma levél HPC-ujjlenyomat-spektrumának hasonlóságában bizonyos különbségek voltak, és a különböző régiókból származó gránátalma levelek minőségét földrajzi tényezők befolyásolták.
A klaszterelemzés és a főkomponens-elemzés eredményei összhangban voltak, és megállapították, hogy a gránátalma levélminták 31 tétele főként két kategóriába oszlott, Guangxi, Guangdong, Fujian és Hainan egy kategóriába, Sichuan és Yunnan pedig egy kategóriába. Kína földrajzi elterjedési térképe és közigazgatási beosztása szerint Szecsuán és Jünnan a Nagy-Khingan-hegység, a Taihang-hegység, a Wushan-hegység és a Xuefeng-hegység határának második szintjén (1000-2000 m átlagos magassággal) helyezkedik el, a délnyugati régióhoz tartozva; Guangxi, Guangdong, Fujian és Hainan a Nagy-Khingan-hegység, a Taihang-hegység, a Wushan-hegység és a Xuefeng-hegység által határolt harmadik szinten (500 m-nél kisebb átlagos tengerszint feletti magassággal) helyezkedik el, és a tengerparti területekhez tartozik. Az ortogonális részleges legkisebb négyzetek diszkriminancia-analízisének segítségével hét fő komponenst azonosítottak, amelyek a gránátalma leveleiben e kétféle termőterület között különbséget okoznak, és öt komponenst azonosítottak: csersav, hiperozid, izokeritrin, naringin és guavaglikozid. A csersav, a hiperozid, az izoquercetin-renozid és a guavaglikozid mennyiségi elemzése révén a guava levélmintákban azt találtuk, hogy a tengerparti területeken (Guangdong Guangxi, Fujian Hainan) az öt komponens tartalma alacsonyabb volt, mint a délnyugati területeken (Sichuan, Yunnan), és jelentős különbség mutatkozott (lásd a 7. ábrát). Összefoglalva, a gránátalma levelek másodlagos anyagcseretermékeiben jelentős regionális különbségek vannak, ami azt jelzi, hogy a gránátalma levelek minősége szorosan összefügg a növekedési környezetükkel, és a helyi éghajlati viszonyok és környezeti tényezők befolyásolhatják. További vizsgálatokra és kutatásokra van szükség a konkrét befolyásoló tényezők meghatározásához.
Ez a tanulmány a gránátalma leveleire összpontosít, és nagy teljesítményű folyadékkromatográfiát használ a gránátalma levél gyógyászati anyagainak kémiai ujjlenyomatának megállapítására. Meghatároztuk a gránátalma levél gyógyászati anyagokban a virágsav, az aranybarack kéreg és a kinolonok tartalmát, és 31 tétel különböző régiókból származó gránátalma levél gyógyászati anyagot elemeztünk kémiai számítási módszerrel. Megállapították, hogy a gránátalma levél gyógyászati anyagok minőségét regionális tényezők befolyásolják. A kidolgozott módszer egyszerű és pontos, és módszert és adathivatkozást biztosít a gránátalma leveles gyógyászati anyagok minőségellenőrzéséhez és minőségi szabványok megállapításához.