Evaluación de la calidad de las hojas de granada de diferentes regiones basada en espectros de huellas dactilares y estequiometría química
Las hojas de granada son las hojas secas de la planta Psidium guajava Linn. de la familia de las rosáceas, distribuidas principalmente en Guangdong, Guangxi, Sichuan, Yunnan, Fujian y Taiwán. Tienen los efectos de secar la humedad y fortalecer el bazo, eliminar el calor y desintoxicar, astringir los intestinos y detener la diarrea, y efectos antiinflamatorios y hemostáticos. La investigación moderna ha demostrado que los principales principios activos de las hojas de granada son los flavonoides (guaiacol, isoquercitrina, hiperósido, naringina, naringina, quercetina) y los triterpenoides, que tienen efectos hipoglucemiantes, antioxidantes y antibacterianos.
En la actualidad, las hojas de granada no se han incluido en la edición de 2020 de la Farmacopea China, pero sí en las Normas de Medicina Herbal China de Guangxi (edición de 1990), las Normas de Medicina Herbal China de la Provincia de Guangdong Volumen 1 (edición de 2004), las Normas de Medicina Herbal China de la Provincia de Hunan (edición de 2009), Normas de procesamiento de hierbas medicinales chinas de la provincia de Hunan (edición de 2010), Normas de calidad de la medicina zhuang de Guangxi (volumen 2, edición de 2011), Normas de procesamiento de hierbas medicinales chinas de la provincia de Fujian (edición de 2012) y Normas de procesamiento de hierbas medicinales chinas de la provincia de Sichuan (edición de 2015), y son materiales medicinales estándar locales. Las normas anteriores solo identificaron cualitativamente la quercetina en las hojas de granada mediante cromatografía en capa fina. Los métodos de investigación y análisis sobre la calidad de los materiales medicinales de las hojas de granada se centran principalmente en el contenido de los componentes principales y en la cuantificación multicomponente, lo cual es difícil de reflejar de forma exhaustiva la calidad de los materiales medicinales. Mientras tanto, como importante árbol frutal económico, la guayaba es abundante en recursos, pero su origen varía, lo que dificulta el control de la calidad de las hojas de guayaba. En general, las normas de calidad y la investigación de evaluación de las hojas de granada aún no son perfectas y es urgente abordarlas.
La huella dactilar de la medicina china es un método de identificación completo y cuantificable para evaluar la autenticidad, calidad y estabilidad de los materiales medicinales chinos y los preparados semiacabados de medicina china. En la actualidad se utiliza ampliamente para evaluar la calidad de los materiales medicinales chinos. El grupo de investigación estableció un método de evaluación múltiple para los componentes flavonoides de las hojas de granada en la fase inicial, proporcionando una base segura para el control de calidad de las hojas de granada. Este estudio toma las hojas de granada como objeto de investigación y recoge 31 lotes de muestras de hojas de granada de diferentes orígenes para el análisis de huellas dactilares. La evaluación de la similitud, el análisis de conglomerados, el análisis de componentes principales y el análisis discriminante de mínimos cuadrados parciales ortogonales se utilizan para estudiar la correlación entre la calidad de la hoja de granada y el origen, proporcionando una referencia para la evaluación de la calidad y la investigación de normas de calidad de las hojas de granada.

En referencia a la investigación previa del grupo de investigación, se determinó que el método de extracción era 60% etanol extracción ultrasónica durante 30 minutos, con un sistema de flujo de acetonitrilo-0,2% ácido fosfórico agua, una columna Zorbax SE-C18 (250mm x 4,6mm, 5um), una temperatura Du de 35 ℃, y un volumen de inyección de 10uL. Al mismo tiempo, se investigaron los efectos de las longitudes de onda (230, 254, 360 nm) y diferentes relaciones de elución gradiente en el sistema de flujo sobre la huella dactilar HPLC de las hojas de granada. Como resultado, bajo las condiciones cromatográficas determinadas en este experimento, la solución de muestra de hojas de granada tenía el mayor número de picos, y la línea de base HPC tenía una forma de pico estable y una buena separación.

En este experimento se recogieron materiales medicinales de hoja de guayaba con representantes regionales, incluidos Guangdong, Guangxi, Fujian, Hainan y Sichuan, lo que garantiza la universalidad de los espectros de huellas dactilares de hoja de guayaba. Utilizando la evaluación de la similitud para analizar los espectros de huellas dactilares de HPLC de hojas de granada, se encontró que había ciertas diferencias en la similitud de los espectros de huellas dactilares de HPC de 31 lotes de hojas de granada, y la calidad de las hojas de granada de diferentes regiones se vio afectada por factores geográficos.

Los resultados del análisis de conglomerados y del análisis de componentes principales fueron coherentes, y se constató que los 31 lotes de muestras de hojas de granada se dividían principalmente en dos categorías, con Guangxi, Guangdong, Fujian y Hainan agrupadas en una categoría, y Sichuan y Yunnan agrupadas en una categoría. Según el mapa de distribución geográfica y las divisiones administrativas de China, Sichuan y Yunnan están situadas en el segundo nivel (con una elevación media de 1000-2000 m) del límite entre la cordillera del Gran Khingan, los montes Taihang, los montes Wushan y los montes Xuefeng, pertenecientes a la región suroccidental; Guangxi, Guangdong, Fujian y Hainan se sitúan en el tercer nivel (con una altitud media inferior a 500 m) delimitado por la cordillera Greater Khingan, los montes Taihang, Wushan y los montes Xuefeng, y pertenecen a zonas costeras. Mediante un análisis discriminante ortogonal de mínimos cuadrados parciales, se identificaron siete componentes principales causantes de diferencias en las hojas de granada entre estos dos tipos de zonas de producción, y se identificaron cinco componentes: ácido tánico, hiperósido, isoquercitrina, naringina y glucósido de guayaba. Mediante el análisis cuantitativo del ácido tánico, el hiperósido, la isoquercitrina, la naringina y el glucósido de guayaba en muestras de hojas de guayaba, se descubrió que el contenido de los cinco componentes en las zonas costeras (Guangdong Guangxi, Fujian Hainan) era inferior al de las zonas suroccidentales (Sichuan, Yunnan), y que existía una diferencia significativa (véase la figura 7). En resumen, existen diferencias regionales significativas en los metabolitos secundarios de las hojas de granada, lo que indica que la calidad de las hojas de granada está estrechamente relacionada con su entorno de crecimiento y puede verse afectada por las condiciones climáticas y los factores medioambientales locales. Es necesario seguir investigando para determinar los factores específicos que influyen.

Este estudio se centra en las hojas de granada y utiliza la cromatografía líquida de alto rendimiento para establecer una huella química de los materiales medicinales de hoja de granada. Se determinó el contenido de ácido floral, corteza de melocotón dorado y quinolonas en los materiales medicinales de hoja de granada, y se analizaron 31 lotes de materiales medicinales de hoja de granada de diferentes regiones utilizando un método de cálculo químico. Se descubrió que la calidad de los materiales medicinales de hoja de granada se ve afectada por factores regionales. El método establecido es sencillo y preciso, y proporciona un método y datos de referencia para el control de calidad y el establecimiento de normas de calidad de los materiales medicinales de hoja de granada.