Evaluering af kvaliteten af granatæbleblade fra forskellige regioner baseret på fingeraftryksspektre og kemisk støkiometri
Granatæbleblade er de tørrede blade af planten Psidium guajava Linn. i familien Rosaceae, der hovedsageligt er udbredt i Guangdong, Guangxi, Sichuan, Yunnan, Fujian og Taiwan. De virker udtørrende på fugt og styrker milten, fjerner varme og afgifter, virker sammentrækkende på tarmene og stopper diarré samt har antiinflammatoriske og hæmostatiske virkninger. Moderne forskning har vist, at de vigtigste aktive ingredienser i granatæbleblade omfatter flavonoider (guaiacol, isoquercitrin, hyperosid, naringin, naringin, naringenin, quercetin) og triterpenoider, som har hypoglykæmiske, antioxiderende og antibakterielle virkninger.
På nuværende tidspunkt er granatæbleblade ikke medtaget i 2020-udgaven af den kinesiske farmakopé, men de er medtaget i Guangxi Chinese Herbal Medicine Standards (1990-udgaven), Guangdong Province Chinese Herbal Medicine Standards Volume 1 (2004-udgaven), Hunan Province Chinese Herbal Medicine Standards (2009-udgaven), Hunan Province Chinese Herbal Medicine Processing Standards (2010 edition), Guangxi Zhuang Medicine Quality Standards (Volume 2, 2011 edition), Fujian Province Chinese Herbal Medicine Processing Standards (2012 edition) og Sichuan Province Chinese Herbal Medicine Processing Standards (2015 edition), og er lokale standardmedicinske materialer. Ovenstående standarder identificerede kun kvalitativt quercetin i granatæbleblade ved hjælp af tyndlagskromatografi. Forsknings- og analysemetoderne for kvaliteten af medicinske materialer fra granatæbleblade fokuserer hovedsageligt på indholdet af hovedkomponenter og kvantificering af flere komponenter, hvilket er vanskeligt at afspejle kvaliteten af medicinske materialer på en fyldestgørende måde. I mellemtiden er guava som et vigtigt økonomisk frugttræ rigeligt med ressourcer, men dets oprindelse varierer, hvilket gør det vanskeligt at kontrollere kvaliteten af guavablade. Alt i alt er kvalitetsstandarderne og evalueringsforskningen af granatæbleblade endnu ikke perfekt, og der er et presserende behov for at gøre noget ved det.
Fingeraftryk af kinesisk medicin er en omfattende og kvantificerbar identifikationsmetode til evaluering af ægthed, kvalitet og stabilitet af kinesiske medicinske materialer og halvfærdige kinesiske medicinske præparater. Det bruges nu i vid udstrækning til at evaluere kvaliteten af kinesiske medicinske materialer. Forskningsgruppen etablerede tidligt en multievalueringsmetode for flavonoidkomponenterne i granatæbleblade, hvilket gav et sikkert grundlag for kvalitetskontrollen af granatæbleblade. Denne undersøgelse tager granatæbleblade som forskningsobjekt og indsamler 31 partier af granatæblebladprøver fra forskellige oprindelser til fingeraftryksanalyse. Lighedsevaluering, klyngeanalyse, hovedkomponentanalyse og ortogonal partiel mindste kvadraters diskriminantanalyse bruges til at undersøge sammenhængen mellem granatæbleblades kvalitet og oprindelse, hvilket giver en reference til kvalitetsevaluering og forskning i kvalitetsstandarder for granatæbleblade.

Med henvisning til den tidligere forskning i forskningsgruppen blev ekstraktionsmetoden bestemt til at være 60% ethanol ultralydsekstraktion i 30 minutter, med et flow system af acetonitril-0,2% fosforsyre vand, en Zorbax SE-C18 kolonne (250mm x 4,6mm, 5um), en Du temperatur på 35 ℃, og en injektion volumen på 10uL. Samtidig blev virkningerne af bølgelængder (230, 254, 360 nm) og forskellige forhold mellem gradienteluering i flowsystemet på HPLC-fingeraftrykket af granatæbleblade undersøgt. Resultatet var, at under de kromatografiske forhold, der blev fastlagt i dette eksperiment, havde prøveopløsningen af granatæbleblade det højeste antal toppe, og HPC-baseline havde en stabil topform og god adskillelse.

Dette eksperiment indsamlede medicinske materialer fra guavablade med regionale repræsentanter, herunder Guangdong, Guangxi, Fujian, Hainan og Sichuan, hvilket sikrede universaliteten af fingeraftryksspektre fra guavablade. Ved at bruge lighedsevaluering til at analysere HPLC-fingeraftryksspektrene af granatæbleblade blev det konstateret, at der var visse forskelle i ligheden af HPC-fingeraftryksspektrene af 31 partier granatæbleblade, og kvaliteten af granatæbleblade fra forskellige regioner blev påvirket af geografiske faktorer.

Resultaterne af klyngeanalyse og hovedkomponentanalyse var konsistente, og det blev konstateret, at de 31 partier af granatæblebladprøver hovedsageligt var opdelt i to kategorier, hvor Guangxi, Guangdong, Fujian og Hainan var samlet i én kategori, og Sichuan og Yunnan var samlet i én kategori. Ifølge det geografiske fordelingskort og de administrative inddelinger af Kina ligger Sichuan og Yunnan på det andet niveau (med en gennemsnitlig højde på 1000-2000 m) af grænsen mellem Greater Khingan Range, Taihang Mountains, Wushan Mountains og Xuefeng Mountains, der hører til den sydvestlige region; Guangxi, Guangdong, Fujian og Hainan ligger på det tredje niveau (med en gennemsnitlig højde på mindre end 500 m) afgrænset af Greater Khingan Range, Taihang Mountains, Wushan og Xuefeng Mountains og hører til kystområderne. Ved hjælp af ortogonal partiel mindste kvadraters diskriminantanalyse blev der identificeret syv hovedkomponenter, der forårsager forskelle i granatæbleblade mellem disse to typer produktionsområder, og fem komponenter blev identificeret: garvesyre, hyperosid, isoquercitrin, naringin og guavaglykosid. Gennem kvantitativ analyse af garvesyre, hyperosid, isoquercetin renosid og guavaglykosid i prøver af guavablade blev det konstateret, at indholdet af de fem komponenter i kystområderne (Guangdong Guangxi, Fujian Hainan) var lavere end i de sydvestlige områder (Sichuan, Yunnan), og der var en betydelig forskel (se figur 7). Sammenfattende er der betydelige regionale forskelle i de sekundære metabolitter i granatæbleblade, hvilket indikerer, at kvaliteten af granatæbleblade er tæt forbundet med deres vækstmiljø og kan påvirkes af lokale klimaforhold og miljøfaktorer. Der er behov for yderligere undersøgelser og forskning for at bestemme de specifikke påvirkningsfaktorer.

Denne undersøgelse fokuserer på granatæbleblade og bruger højtydende væskekromatografi til at etablere et kemisk fingeraftryk af medicinske materialer fra granatæbleblade. Indholdet af blomstersyre, gylden ferskenbark og quinoloner i medicinske materialer af granatæbleblade blev bestemt, og 31 partier af medicinske materialer af granatæbleblade fra forskellige regioner blev analyseret ved hjælp af en kemisk beregningsmetode. Det viste sig, at kvaliteten af medicinske materialer af granatæbleblade påvirkes af regionale faktorer. Den etablerede metode er enkel og præcis og giver en metode og datareference til kvalitetskontrol og etablering af kvalitetsstandarder for medicinske materialer af granatæbleblade.