Az édesköménygyökér kéreg hatékony összetevőinek szűrése a májfibrózis ellen a spektrális hatás összefüggés alapján és a mechanizmus feltárása
A májfibrózis a májzsugorodás, sőt a májrák fő oka, és a májrák mintegy 90%-je májfibrózis vagy májzsugorodás alapján alakul ki. Ezért a májfibrózis kezelése különösen fontos. A májfibrózis klinikai előfordulása évről évre nő, ami súlyosan veszélyezteti az emberek életbiztonságát. A májfibrózis fő okai közé tartozik a krónikus hepatitisvírus-fertőzés, az alkoholfogyasztás és a nem alkoholos zsírmájbetegség. A májfibrózis jellemzője az extracelluláris mátrix túlzott felhalmozódása, amelyet az extracelluláris mátrix fokozott szintézise és lerakódása, valamint az extracelluláris mátrix csökkent vagy egyáltalán nem történő lebomlása okoz. A májfibrózisban kulcsfontosságú láncszemnek tekintik a máj csillagsejtek aktiválódását, és ez a fő oka az extracelluláris mátrix fehérjék túlzott felhalmozódásának a májban.
Az édeskömény gyökérkéreg a Foeniculum vulgare Mill. Benne van a standard ujgur gyógyszerkönyvben, és nedves hideg vagy nyálkás betegségek, például nedves hideg okozta különböző gyulladások és duzzanatok, kétoldali hidegfájdalom, derékfájás, hátfájás, amenorrhoea, vizeletelzáródás és régi bélelzáródás kezelésére használják. A Hugan Buzu Re Granules a hagyományos kínai orvoslásban a máj védelmére szolgáló klasszikus formula. Zellermagból, zellergyökérből, krizantémmagból, cickafarkmagból, cikóriagyökérből, édesköménygyökér kérgéből és édesköményből áll, és a májat tápláló és az epeáramlást elősegítő hatású. A kutatócsoport előzetes kutatásai szerint a Hugan BuZuRe granulátum patkányokban védelmet nyújt a CCI4 által kiváltott májfibrózissal szemben. Medina Saifudin és munkatársai megállapították, hogy a hagyományos kínai gyógyászatban használt édesköménygyökér kéreg bizonyos mértékben elősegíti a májszövetek helyreállítását és védi a májsejtmembránokat. Ezért az édeskömény gyökérkéregnek májfibrózis elleni hatása lehet.
A gyógyszer-spektrum-hatás összefüggés vizsgálata olyan módszer, amely a kémiai összetételt és a farmakológiai kutatást egyesíti a hatékony kémiai összetevők elemzésére. A spektrumok tanulmányozása alapján maximalizálja a hasznos kémiai információk megszerzését, összekapcsolja a spektrumokat a farmakológiai eredményekkel, lineáris vagy nemlineáris matematikai feldolgozással létrehoz egy "spektrumhatás" matematikai modellt, és meghatározza a farmakológiai hatásokkal kapcsolatos vegyületcsoportokat. Az ismert és ismeretlen komponensek elemzésével a hagyományos kínai gyógyászat összetett vegyes rendszereiben található kémiai komponensek típusai és tartalma maximálisan tükröződhetnek, ezáltal átfogó leírást és értékelést adva a hagyományos kínai gyógyászat minőségéről. Ezért ebben a tanulmányban ultranagy teljesítményű folyadékkromatográfia-tömegspektrometriát alkalmaztunk a kínai gyógynövény édeskömény gyökérkéreg kémiai összetevőinek vizsgálatára. Az etanolos extrakció, a petróleuméteres extrakció, az etil-acetátos extrakció, az n-butanolos extrakció és a vizes extrakció HSC-T6 sejtproliferációra gyakorolt hatását UPLC-Orbitrap-MS/MS-sel kombináltuk az édeskömény gyökérkéreg kémiai összetevőinek szűrésére, részleges legkisebb négyzetek és szürke relációs elemzés segítségével. Az in vitro kísérleteket az édesköménygyökér kéreg hatékony összetevőinek májfibrózis elleni hatásának és mechanizmusának ellenőrzésére végeztük, tudományos alapot nyújtva a népi gyógyászat kutatásához és fejlesztéséhez.

A hagyományos kínai orvoslásban a több célpont és összetevő szinergikus hatása a kutatás egyik legforróbb témájává vált. A hatóanyagok vizsgálata a gyógyszerkutatás alapja, és a hatóanyagokat és hatásmódokat összetettség jellemzi. Li Rong 2002-ben javasolta a spektrális hatáskapcsolat elméletét, amely új kutatási irányt mutatott a hagyományos kínai gyógyászat hatékonyságának vizsgálatára. Az édesköménygyökér kéreg alkoholos kivonatának és különböző kivonatainak UPLC-Orbitrap-MS/MS spektrumában lévő közös csúcsok és a májfibrózis elleni hatásuk számszerűsítése alapján ez a tanulmány részleges legkisebb négyzetek és szürke korrelációs analízis segítségével vizsgálta az édesköménygyökér kéreg teljes ionáramlási spektrumában lévő közös csúcsok és a májfibrózis elleni hatásuk közötti összefüggést. Ez nagymértékben tükrözheti az összetevők hozzájárulását a farmakológiai hatáshoz.
Ez a tanulmány az édesköménygyökér kéreg alkoholos, petróleuméteres, etil-acetátos, n-butanolos és vizes részével foglalkozik. Nagy teljesítményű folyadékkromatográfia-tömegspektrometriás elemzést végeztünk az édesköménygyökér kéreg folyadékkromatográfia-tömegspektrometriás (LC-MS) spektrumának összeállításához. Összesen 58 közös csúcsot kalibráltunk pozitív és negatív ionmódban, és elemeztük a spektrumokat. Látható, hogy az egyes minták közös csúcsterületei eltérőek, ami felhasználható a spektrális hatékonysági kapcsolat kutatásához. A spektrális hatáskapcsolati elemzés azt mutatta, hogy 11 komponens jelentősen hozzájárult a májfibrózis elleni hatáshoz (VIP>1 és regressziós együttható>0). Közülük a szakirodalomban májfibrózis-ellenes hatású vegyületek közé tartozik a galluszsav, az apigenin, a kaempferol, a kvercetin, a szkopoletint és a rein, ami tükrözi az édesköménygyökér kéreg többkomponensű és többcélú májfibrózis-ellenes hatásának jellemzőit. A dihidro-kamptotecin, a dihidro-kapszaicin és a szkopolamin olyan vegyületek, amelyek viszonylag magas tartalommal és jó májfibrózis-ellenes hatással rendelkeznek, és amelyeket először találtak az édeskömény gyökérkéregben, és amelyek potenciális minőségi markerek lehetnek. Közülük a dehidrokamelbin javíthatja az Echinococcus granulosus másodlagos fertőzése által okozott egér tüdőszöveti fibrózist azáltal, hogy csökkenti a TGF - β 1, Smad3 és NF kB p65 expresszióját a tüdőszövetben. A dihidrokapszaicin és a szkopolamin májfibrózis elleni hatásáról nem érkezett jelentés.
A Bcl-2 az antiapoptotikus génhez tartozik, és kulcsfontosságú tényező a sejtek életének és halálának koordinálásában, míg a Bax a proapoptotikus génhez tartozik, és a Bcl-2 család proapoptotikus fehérjéje. A kaszpáz3 a sejt apoptózis fontos effektor faktoraként az apoptotikus proteázok kaszkádreakciójának szükséges útvonala. Aktiválódása azt jelzi, hogy az apoptózis irreverzibilis szakaszba lépett. Az apoptózisban a Bax/Bcl-2 arány fontos indikátor a mitokondriális útvonalon keresztül történő sejt apoptózis mérésére. Ha a Bax/Bcl-2 arány nő, az apoptózis növekszik; ellenkezőleg, az apoptózis csökken. Amikor a sejtek apoptotikus jeleket érzékelnek, az apoptotikus faktorok, például a Bcl-2 és a Bax expressziójának szabályozásával aktiválhatják a kaszpáz-9-et (Caspase9), ezáltal aktiválják a Caspase3-at és elindítják a kaszpáz család kaszkádreakcióját, ezáltal kiváltva a sejt apoptózisát. Ez a tanulmány kísérletekkel igazolta, hogy a dehidrokamptotetocin és a dihidrokapszaicin csökkentheti a mitokondriumok működését és megzavarhatja a mitokondriális membránpotenciál egyensúlyát aktivált máj-sztengelysejtekben, ami a proapoptotikus faktor (Bax) nagymértékű felszabadulásához vezet, és végül sejtapoptózist okoz, csökkenti a máj-sztengelysejtek proliferációját, gátolja az extracelluláris mátrix és az α - simaizom aktivátor fehérje expresszióját, és ezáltal enyhíti a májfibrózist. A későbbi kísérletek során in vivo kísérleteket kell végezni a kiválasztott monomer vegyületek validálására, és tovább kell vizsgálni az édesköménygyökér kéreg monomer vegyületeinek mRNS- és fehérjeszintű májfibrózis-ellenes mechanizmusát.
Összefoglalva, ez a tanulmány az UPLC Orbitrap MS/MS technológiát használta a parciális legkisebb négyzetek és a szürke korrelációs elemzéssel kombinálva az édeskömény gyökérkéreg májfibrózis elleni lehetséges összetevőinek tisztázására, ami tükrözi az édeskömény gyökérkéreg többkomponensű és többcélú májfibrózis elleni hatásának jellemzőit. Ez nagy jelentőséggel bír a hagyományos kínai gyógyászat hatékonyságának anyagi alapjainak tisztázása és a hagyományos kínai gyógyászat minőségi szabványainak javítása szempontjából, hivatkozási alapot nyújtva a hatásmechanizmus és a klinikai alkalmazás további megértéséhez.