Analyse quantitative par spectrométrie de masse UPLC-Q-XActive Orbitrap à haute résolution de la teneur en 9 composants de Ligustrum lucidum de différentes origines et avant et après traitement
Ligustrum Lucidum Ait. est un fruit séché et mûr de Ligustrum Lucidum Ait, une plante de la famille des Oleaceae. Il a un goût doux, amer et frais et pénètre dans les méridiens du foie et des reins. Il a pour effet de nourrir le foie et les reins, d'améliorer la vision et de noircir les cheveux. Il peut être utilisé en cas de déficience du yin du foie et des reins, de vertiges et d'acouphènes, de douleurs et de faiblesses au niveau de la taille et des genoux, de grisonnement prématuré des cheveux, de troubles de la vision, d'étouffement de la chaleur interne, de vaporisation des os et de bouffées de chaleur, etc. Le Fructus Ligustri Lucidi contient une variété de principes actifs, tels que des triterpénoïdes, des iridoïdes, du phényléthanol, des flavonoïdes, des huiles volatiles, des sucres, des acides aminés, des stérols, etc. Il a divers effets pharmacologiques, tels que l'antidiabète, l'antitumoral, la protection du foie, l'antioxydant, l'anti-inflammatoire, l'hypoglycémique, l'hypolipidémiant, la régulation immunitaire, etc. Il est principalement utilisé dans le traitement clinique de l'hyperlipidémie, de l'ostéoporose, du cancer du côlon, du cancer du poumon, de l'hépatite et d'autres maladies. Les principaux ingrédients actifs du Ligustrum lucidum sont des glycosides iridoïdes, mais l'efficacité du Ligustrum lucidum n'est pas déterminée par la teneur en composants individuels. Les composants tels que le phényléthanol, les flavonoïdes et les iridoïdes de Ligustrum lucidum ont également été utilisés pour l'évaluation de la qualité en raison de leurs activités antioxydantes et anti-ostéoporose, mais ils ne sont pas encore parfaits. Ce n'est qu'en analysant le contenu des groupes de composés liés à l'efficacité de Ligustrum lucidum que la qualité des matières médicinales de Ligustrum lucidum peut être véritablement évaluée. Par conséquent, cette étude a établi une méthode pour déterminer simultanément la teneur de plusieurs ingrédients actifs dans le Ligustrum lucidum, y compris le phényléthanol (salidroside, échinacoside), les flavonoïdes (quercétine, apigénine, rutine, verbascoside, verbascoside) et les terpènes d'éther cyclohexène (oleuropéine, astragaloside), afin d'évaluer la qualité du Ligustrum lucidum.

La méthode de transformation du Ligustrum lucidum est apparue pour la première fois dans le livre "Su Yang" de la dynastie Song. Les produits transformés traditionnels de Ligustrum lucidum sont toujours utilisés aujourd'hui, y compris les produits bruts et alcoolisés. À l'époque moderne, des produits purifiés, des produits cuits à la vapeur, des produits salés, des produits au vinaigre, etc. sont également ajoutés. Les produits crus et alcoolisés sont couramment utilisés dans la pratique clinique. Les produits bruts à base de Ligustrum lucidum éclaircissent le foie et les yeux, nourrissent le yin et humidifient la sécheresse, et l'effet nourrissant sur le foie et les reins est considérablement renforcé après la production d'alcool. Les recherches ont montré que les effets tonifiants sur le foie et les reins du vin de Ligustrum lucidum sont étroitement liés à l'hydrolyse et à la transformation des glycosides iridoïdes de Ligustrum lucidum au cours de la transformation. Après le traitement, la teneur en glycosides iridoïdes et en glycosides phényléthanoliques du Ligustrum lucidum diminue, tandis que la teneur en salidroside et en glycosides phényléthanoliques augmente. Toutefois, ces études sont relativement dispersées et manquent de systématicité, ce qui est insuffisant pour évaluer scientifiquement les changements dans la composition chimique avant et après le traitement du Fructus Zhenzi. C'est pourquoi cette étude a utilisé la spectrométrie de masse à haute résolution UPLC-Q Exactive-Orbitrap pour déterminer simultanément les teneurs en salidroside, rutine, verbascoside, ligustilide, oleuropéine, lutéoline, apigénine, quercétine et acide pinéal dans le Ligustrum lucidum. Le schéma de distribution des composants chimiques dans le Ligustrum lucidum de différentes régions a été analysé, et les changements dans la teneur en composants chimiques avant et après la transformation ont été examinés, afin de fournir une base théorique pour la normalisation des normes de qualité des morceaux de décoction de Ligustrum lucidum et des produits transformés.

Analyse des résultats de la détermination du contenu de Ligustrum lucidum de différentes origines. Cette étude a établi une méthode LC-MS pour déterminer la teneur de 9 composants dans le Ligustrum lucidum de différentes origines. L'édition 2020 de la pharmacopée chinoise stipule que la limite du ligustilide ne doit pas être inférieure à 0,70%. Parmi les 22 lots de matières médicinales de Ligustrum lucidum testés provenant de différentes origines, la teneur en ligustilide des matières médicinales de Ligustrum lucidum provenant de trois origines (Xinxiang, Henan, Baoding, Hebei, et Huixian, Henan) était inférieure à la limite de l'édition 2020 de la pharmacopée chinoise, représentant 13,64%. Les raisons de cette situation doivent faire l'objet de recherches plus approfondies. Dans les différentes zones de production, la teneur en salidroside et en paeoniflorine est relativement élevée à Zhengzhou, Henan, Dangyang, Hubei, Guangyuan, Sichuan, Yangling, Shaanxi, Nanyang, Henan, Changsha, Hunan, et Changde, Hunan, avec des concentrations allant de 0,9862 à 1,5440 mg/g et de 12,8500 à 18,1066 mg/g, respectivement. Après traitement du Ligustrum lucidum, la teneur en glycosides de Ligustrum lucidum a augmenté de manière significative, tous étant supérieurs à la limite de teneur de l'édition 2020 de la pharmacopée chinoise. À l'aide du logiciel SIMCA14.1, une analyse des composantes principales a été réalisée sur le Ligustrum lucidum de différentes origines et sur le Ligustrum lucidum transformé de différentes origines. Le Ligustrum lucidum de différentes origines et le Ligustrum lucidum transformé de différentes origines peuvent être divisés en deux catégories : La catégorie I comprend S2 S4、S6、S8、S13、S14、S15；Z2、Z4、26、Z8、Z13、Z14、Z15； La catégorie II comprend S1 S3、S5、S7、S9、S10、S11、S12、S16~S22；Z1、Z3、Z5、Z7、Z9、Z10、Z11、Z12、Z16~Z22。 D'après le graphique VIP de l'analyse discriminante par les moindres carrés partiels, on constate que la contribution du ligustilide, du verbascoside et du salidroside à la division des zones de production est significative. Les résultats de l'analyse indiquent qu'il existe des différences significatives dans la qualité des matières médicinales de Ligustrum lucidum provenant de différentes zones de production, qui peuvent être liées à des différences dans l'environnement de croissance des matières médicinales. La simple mesure de la teneur d'un ou deux composants ne peut pas refléter efficacement la qualité des matières médicinales. Il est nécessaire de mesurer simultanément plusieurs composants de Ligustrum lucidum afin de refléter de manière exhaustive sa qualité intrinsèque.

Analyse des résultats de la détermination du contenu de Ligustrum lucidum avant et après traitement. Il existe plusieurs méthodes de traitement du Ligustrum lucidum, dont la plus couramment utilisée est la fermentation alcoolique, qui comprend la cuisson à l'alcool et l'étuvage à l'alcool. Cette étude a utilisé la méthode de cuisson du vin pour explorer de manière préliminaire les changements dans la teneur en composants de Ligustrum lucidum au cours de la transformation. Après la cuisson à l'alcool du Ligustrum lucidum, la teneur en salidroside, en astragaloside et en oleuropéine du Ligustrum lucidum a augmenté de manière significative. Peut-être en raison de changements dans la structure organisationnelle ou les propriétés physicochimiques des composants après la production d'alcool, celui-ci est bénéfique pour l'infiltration, la dissolution, le déplacement, la diffusion et d'autres processus de dissolution des composants, ce qui entraîne un effet de solubilisation et améliore la vitesse de dissolution des ingrédients efficaces. Les facteurs d'influence spécifiques doivent faire l'objet d'une étude plus approfondie. Les glycosides d'osmanthus, la lutéoline et la rutine ont contribué de manière significative à la classification de Ligustrum lucidum avant et après traitement. Des études ont montré qu'après la transformation de Ligustrum lucidum, les glycosides de Ligustrum lucidum sont hydrolysés en salidroside, et que la teneur en salidroside de Ligustrum lucidum transformé augmente de manière significative. Cette étude a établi une méthode pour déterminer la teneur de neuf composants, dont le salidroside, la rutine, le verbascoside, le rutinoside, l'oleuropéine, la lutéoline, l'apigénine, la quercétine et le glycoside pinéal, dans le Ligustrum lucidum de différentes origines, avant et après le traitement, en utilisant la chromatographie liquide à ultra-haute performance et la spectrométrie de masse. Comparée à la détection UV, cette méthode de recherche présente une forte capacité de séparation, une sensibilité élevée, des résultats d'analyse qualitative fiables et une faible limite de détection. Les différences significatives dans la qualité des matières médicinales de Ligustrum lucidum de différentes origines peuvent être liées à des facteurs tels que la région, le climat, le sol, la période de croissance et le moment de la récolte. En particulier, le glycoside, le verbascoside et le salidroside de Ligustrum lucidum contribuent de manière significative à la division des origines. Après la production de liqueur de Ligustrum lucidum, la teneur en salidroside, ligustilide et oleuropéine a augmenté de manière significative, ce qui peut être dû à l'augmentation de la vitesse de dissolution des ingrédients actifs dans la production de liqueur. Les raisons spécifiques doivent être étudiées de manière plus approfondie. Cette méthode expérimentale est simple, fiable et très sensible, fournissant une référence pour l'amélioration et le renforcement des normes de qualité pour les produits bruts et transformés de Ligustrum lucidum.