UPLC-Q-XActive Orbitrap-massespektrometri med høj opløsning - kvantitativ analyse af indholdet af 9 komponenter i Ligustrum lucidum fra forskellige oprindelser og før og efter forarbejdning.
Ligustrum Lucidum Ait. er en tørret og moden frugt af Ligustrum Lucidum Ait, en plante i Oleaceae-familien. Den har en sød, bitter og kølig smag og går ind i lever- og nyremeridianerne. Den virker nærende på lever og nyrer, forbedrer synet og gør håret sort; den kan bruges til lever- og nyre-yin-mangel, svimmelhed og tinnitus, ømhed og svaghed i talje og knæ, for tidlig grånelse af håret, uklart syn, slukning af indre varme, dampende knogler og hedeture osv. Fructus Ligustri Lucidi indeholder en række aktive ingredienser, såsom triterpenoider, iridoider, phenylethanol, flavonoider, flygtige olier, sukkerarter, aminosyrer, steroler osv. Det har en række farmakologiske virkninger, såsom antidiabetes, antitumor, leverbeskyttelse, antioxidant, antiinflammatorisk, hypoglykæmisk, lipidsænkende, immunregulering osv. Det bruges hovedsageligt til klinisk behandling af hyperlipidæmi, osteoporose, tyktarmskræft, lungekræft, hepatitis og andre sygdomme. De vigtigste aktive ingredienser i Ligustrum lucidum er iridoidglykosider, men effekten af Ligustrum lucidum bestemmes ikke af indholdet af de enkelte komponenter. Komponenter som phenylethanol, flavonoider og iridoider i Ligustrum lucidum er også blevet brugt til kvalitetsevaluering på grund af deres antioxidant- og antiosteoporose-aktiviteter, men de er stadig ikke perfekte. Kun ved at analysere indholdet af stofgrupper, der er relateret til effekten af Ligustrum lucidum, kan kvaliteten af Ligustrum lucidum-medicinske materialer virkelig evalueres. Derfor etablerede denne undersøgelse en metode til samtidig bestemmelse af indholdet af flere aktive ingredienser i Ligustrum lucidum, herunder phenylethanol (salidrosid, echinacosid), flavonoider (quercetin, apigenin, rutin, verbascosid, verbascosid) og cyclohexene ether terpener (oleuropein, astragalosid), for at evaluere kvaliteten af Ligustrum lucidum.

Forarbejdningsmetoden for Ligustrum lucidum blev første gang beskrevet i Song-dynastiets bog "Su Yang". De traditionelle forarbejdede produkter af Ligustrum lucidum bruges stadig i dag, herunder rå og alkoholiske produkter. I moderne tid tilføjes også rensede produkter, dampede produkter, saltprodukter, eddikeprodukter osv. Rå og alkoholiske produkter bruges ofte i klinisk praksis. Ligustrum lucidum-råprodukter renser leveren og øjnene, nærer yin og fugter tørhed, og den nærende effekt på leveren og nyrerne forbedres betydeligt efter alkoholproduktion. Forskning har vist, at Ligustrum lucidum-vinens styrkende virkning på lever og nyrer er tæt forbundet med hydrolyse og omdannelse af iridoidglykosider i Ligustrum lucidum under forarbejdningen. Efter forarbejdning falder indholdet af iridoidglykosider og phenylethanoliske glykosider i Ligustrum lucidum, mens indholdet af salidrosid og phenylethanoliske glykosider stiger. Disse undersøgelser er dog relativt spredte og mangler systematik, hvilket er utilstrækkeligt til videnskabeligt at evaluere ændringerne i den kemiske sammensætning før og efter forarbejdningen af Fructus Zhenzi. I lyset af dette brugte denne undersøgelse UPLC-Q Exactive-Orbitrap-massespektrometri med høj opløsning til at etablere en samtidig bestemmelse af indholdet af salidrosid, rutin, verbascosid, ligustilid, oleuropein, luteolin, apigenin, quercetin og pineal syre i Ligustrum lucidum. Fordelingsmønsteret for kemiske komponenter i Ligustrum lucidum fra forskellige regioner blev analyseret, og ændringerne i indholdet af kemiske komponenter før og efter forarbejdning blev undersøgt for at skabe et teoretisk grundlag for standardisering af kvalitetsstandarderne for Ligustrum lucidum-afkogsstykker og forarbejdede produkter.

Analyse af resultaterne af indholdsbestemmelsen af Ligustrum lucidum fra forskellige oprindelser. Denne undersøgelse etablerede en LC-MS-metode til at bestemme indholdet af 9 komponenter i Ligustrum lucidum fra forskellige oprindelser. 2020-udgaven af den kinesiske farmakopé foreskriver, at grænsen for ligustilid ikke bør være mindre end 0,70%. Blandt de 22 partier af Ligustrum lucidum-lægemidler, der blev testet fra forskellige oprindelser, var indholdet af ligustilid i Ligustrum lucidum-lægemidler fra tre oprindelser (Xinxiang, Henan, Baoding, Hebei og Huixian, Henan) lavere end grænsen i 2020-udgaven af den kinesiske farmakopé, hvilket svarer til 13,64%. Årsagerne til dette kræver yderligere forskning. I forskellige produktionsområder er indholdet af salidrosid og paeoniflorin relativt højt i Zhengzhou, Henan, Dangyang, Hubei, Guangyuan, Sichuan, Yangling, Shaanxi, Nanyang, Henan, Changsha, Hunan, og Changde, Hunan, med koncentrationer fra henholdsvis 0,9862 til 1,5440 mg/g og 12,8500 til 18,1066 mg/g. Efter forarbejdning af Ligustrum lucidum steg indholdet af Ligustrum lucidum-glykosider betydeligt, og de var alle højere end indholdsgrænsen i 2020-udgaven af den kinesiske farmakopé. Ved hjælp af SIMCA14.1-software blev der foretaget en hovedkomponentanalyse af Ligustrum lucidum fra forskellige oprindelser og forarbejdet Ligustrum lucidum fra forskellige oprindelser. Ligustrum lucidum fra forskellige oprindelser og forarbejdet Ligustrum lucidum fra forskellige oprindelser kan inddeles i to kategorier: Kategori I omfatter S2 S4、S6、S8、S13、S14、S15；Z2、Z4、26、Z8、Z13、Z14、Z15； Klasse II omfatter S1 S3、S5、S7、S9、S10、S11、S12、S16~S22；Z1、Z3、Z5、Z7、Z9、Z10、Z11、Z12、Z16~Z22。 I henhold til VIP-plottet i partiel mindste kvadraters diskriminantanalyse, kan det ses, at bidraget fra ligustilid, verbascosid og salidrosid til opdelingen af produktionsområder er signifikant. Analyseresultaterne indikerer, at der er betydelige forskelle i kvaliteten af Ligustrum lucidum-lægemidler fra forskellige produktionsområder, hvilket kan hænge sammen med forskelle i lægemidlets vækstmiljø. En simpel måling af indholdet af en eller to komponenter kan ikke effektivt afspejle kvaliteten af de medicinske materialer. Det er nødvendigt at måle flere komponenter i Ligustrum lucidum på samme tid for at få et fyldestgørende billede af den iboende kvalitet.

Analyse af resultaterne af indholdsbestemmelsen af Ligustrum lucidum før og efter forarbejdning. Der er forskellige metoder til forarbejdning af Ligustrum lucidum, hvoraf den mest anvendte metode er alkoholgæring, som omfatter alkoholstuvning og alkoholdampning. I denne undersøgelse blev der brugt en metode til at stege vin for at undersøge ændringerne i indholdet af komponenter i Ligustrum lucidum under forarbejdningen. Efter stuvning af Ligustrum lucidum med alkohol steg indholdet af salidrosid, astragalosid og oleuropein i Ligustrum lucidum markant. Måske på grund af ændringer i komponenternes organisationsstruktur eller fysisk-kemiske egenskaber efter alkoholproduktion er det gavnligt for komponenternes infiltration, opløsning, fortrængning, diffusion og andre opløsningsprocesser, hvilket resulterer i en opløsende effekt og forbedrer opløsningshastigheden for effektive ingredienser. De specifikke påvirkningsfaktorer skal undersøges nærmere. Osmanthusglykosider, luteolin og rutin har bidraget væsentligt til klassificeringen af Ligustrum lucidum før og efter forarbejdning. Undersøgelser har vist, at efter forarbejdning af Ligustrum lucidum hydrolyseres især Ligustrum lucidum-glykosider til salidrosid, og indholdet af salidrosid i forarbejdet Ligustrum lucidum øges betydeligt. Denne undersøgelse etablerede en metode til bestemmelse af indholdet af ni komponenter, herunder salidrosid, rutin, verbascosid, rutinosid, oleuropein, luteolin, apigenin, quercetin og pinealglykosid, i Ligustrum lucidum fra forskellige oprindelser og før og efter forarbejdning ved hjælp af ultrahøjtydende væskekromatografi-massespektrometri. Sammenlignet med UV-detektion har denne forskningsmetode stærk adskillelsesevne, høj følsomhed, pålidelige kvalitative analyseresultater og lav detektionsgrænse. De betydelige forskelle i kvaliteten af Ligustrum lucidum-medicinske materialer fra forskellige oprindelser kan være relateret til faktorer som region, klima, jord, vækstperiode og høsttidspunkt. Især Ligustrum lucidum glycosid, verbascosid og salidrosid bidrager væsentligt til opdelingen af oprindelser. Efter produktionen af Ligustrum lucidum-sprit steg indholdet af salidrosid, ligustilid og oleuropein markant, hvilket kan skyldes den øgede opløsningshastighed af aktive ingredienser i spritproduktionen. De specifikke årsager skal undersøges nærmere. Denne eksperimentelle metode er enkel, pålidelig og meget følsom, hvilket giver en reference til forbedring og forbedring af kvalitetsstandarder for rå og forarbejdede produkter af Ligustrum lucidum.