UPLC-Q-XActive Orbitrap yüksek çözünürlüklü kütle spektrometresi ile farklı kökenlerden gelen Ligustrum lucidum'daki 9 bileşenin içeriğinin işleme öncesi ve sonrası kantitatif analizi
Ligustrum Lucidum Ait. Oleaceae familyasından bir bitki olan Ligustrum Lucidum Ait'in kurutulmuş ve olgunlaşmış meyvesidir. Tatlı, acı ve serin bir tadı vardır ve karaciğer ve böbrek meridyenlerine girer. Karaciğer ve böbrekleri besleyici, görüşü iyileştirici ve saçları siyahlaştırıcı etkileri vardır; karaciğer ve böbrek yin eksikliği, baş dönmesi ve kulak çınlaması, bel ve dizlerde ağrı ve güçsüzlük, saçların erken beyazlaması, net olmayan görüş, iç ısı söndürme, kemik buharlaşması ve sıcak basması vb. için kullanılabilir. Fructus Ligustri Lucidi, triterpenoidler, iridoitler, feniletanol, flavonoidler, uçucu yağlar, şekerler, amino asitler, steroller vb. gibi çeşitli aktif bileşenler içerir. Anti diyabet, anti-tümör, karaciğer koruma, antioksidan, anti-inflamatuar, hipoglisemik, lipid düşürücü, bağışıklık düzenleme gibi çeşitli farmakolojik etkilere sahiptir. Esas olarak hiperlipidemi, osteoporoz, kolon kanseri, akciğer kanseri, hepatit ve diğer hastalıkların klinik tedavisinde kullanılır. Ligustrum lucidum'daki ana aktif bileşenler iridoid glikozitlerdir, ancak Ligustrum lucidum'un etkinliği tek tek bileşenlerin içeriğine göre belirlenmez. Ligustrum lucidum'daki feniletanol, flavonoidler ve iridoidler gibi bileşenler de antioksidan ve anti osteoporoz aktiviteleri nedeniyle kalite değerlendirmesi için kullanılmıştır, ancak yine de mükemmel değildir. Sadece Ligustrum lucidum'un etkinliği ile ilgili bileşik gruplarının içeriği analiz edilerek Ligustrum lucidum tıbbi malzemelerinin kalitesi gerçek anlamda değerlendirilebilir. Bu nedenle, bu çalışma Ligustrum lucidum'un kalitesini değerlendirmek için feniletanol (salidroside, echinacoside), flavonoidler (quercetin, apigenin, rutin, verbascoside, verbascoside) ve sikloheksen eter terpenler (oleuropein, astragaloside) dahil olmak üzere Ligustrum lucidum'daki çoklu aktif bileşenlerin içeriğini eşzamanlı olarak belirlemek için bir yöntem oluşturmuştur.

Ligustrum lucidum'un işlenme yöntemi ilk olarak Song Hanedanlığı'nın "Su Yang" kitabında ortaya çıkmıştır. Ligustrum lucidum'un geleneksel işlenmiş ürünleri, ham ve alkollü ürünler de dahil olmak üzere günümüzde hala kullanılmaktadır. Modern zamanlarda, saflaştırılmış ürünler, buharda pişirilmiş ürünler, tuz ürünleri, sirke ürünleri vb. de eklenmiştir. Ham ve alkollü ürünler klinik uygulamalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Ligustrum lucidum ham ürünleri karaciğeri temizler ve gözleri temizler, yini besler ve kuruluğu nemlendirir ve alkol üretiminden sonra karaciğer ve böbrekler üzerindeki besleyici etki önemli ölçüde artar. Araştırmalar, Ligustrum lucidum şarabının karaciğer ve böbrekleri güçlendirici etkilerinin, işleme sırasında Ligustrum lucidum'daki iridoid glikozitlerin hidrolizi ve dönüşümü ile yakından ilişkili olduğunu göstermiştir. İşlemden sonra, Ligustrum lucidum'daki iridoid glikozitlerin ve feniletanolik glikozitlerin içeriği azalırken, salidrosid ve feniletanolik glikozitlerin içeriği artar. Ancak bu çalışmalar nispeten dağınıktır ve sistematiklikten yoksundur, bu da Fructus Zhenzi'nin işlenmesinden önce ve sonra kimyasal bileşimdeki değişiklikleri bilimsel olarak değerlendirmek için yetersizdir. Bu nedenle, bu çalışmada Ligustrum lucidum'da salidrosid, rutin, verbascoside, ligustilide, oleuropein, luteolin, apigenin, quercetin ve pineal asit içeriklerinin eş zamanlı olarak belirlenmesi için UPLC-Q Exactive-Orbitrap yüksek çözünürlüklü kütle spektrometrisi kullanılmıştır. Farklı bölgelerden elde edilen Ligustrum lucidum'daki kimyasal bileşenlerin dağılım modeli analiz edilmiş ve Ligustrum lucidum kaynatma parçalarının ve işlenmiş ürünlerin kalite standartlarını standartlaştırmak için teorik temel sağlamak amacıyla işlemeden önce ve sonra kimyasal bileşen içeriğindeki değişiklikler incelenmiştir.

Farklı kökenlerden Ligustrum lucidum'un içerik belirleme sonuçlarının analizi. Bu çalışma, farklı kökenlerden Ligustrum lucidum'daki 9 bileşenin içeriğini belirlemek için bir LC-MS yöntemi oluşturmuştur. Çin Farmakopesi'nin 2020 baskısı, ligustilid limitinin 0,70%'den az olmamasını şart koşmaktadır. Farklı kökenlerden test edilen 22 parti Ligustrum lucidum tıbbi malzemesi arasında, üç kökenden (Xinxiang, Henan, Baoding, Hebei ve Huixian, Henan) gelen Ligustrum lucidum tıbbi malzemelerindeki ligustilid içeriği, 13,64% ile Çin Farmakopesi'nin 2020 baskısının sınırından daha düşüktü. Bunun nedenlerinin daha fazla araştırılması gerekmektedir. Farklı üretim alanlarında, salidrosid ve paeoniflorin içeriği Zhengzhou, Henan, Dangyang, Hubei, Guangyuan, Sichuan, Yangling, Shaanxi, Nanyang, Henan, Changsha, Hunan ve Changde, Hunan'da sırasıyla 0,9862 ila 1,5440 mg/g ve 12,8500 ila 18,1066 mg/g arasında değişen konsantrasyonlarla nispeten yüksektir. Ligustrum lucidum işlendikten sonra, Ligustrum lucidum glikozitlerinin içeriği önemli ölçüde artmış ve bunların tümü Çin Farmakopesinin 2020 baskısının içerik sınırından daha yüksek olmuştur. SIMCA14.1 yazılımı kullanılarak, farklı kökenlerden gelen Ligustrum lucidum ve farklı kökenlerden gelen işlenmiş Ligustrum lucidum üzerinde temel bileşen analizi yapılmıştır. Farklı kökenlerden gelen Ligustrum lucidum ve farklı kökenlerden gelen işlenmiş Ligustrum lucidum iki kategoriye ayrılabilir: Kategori I S2 S4、S6、S8、S13、S14、S15；Z2、Z4、26、Z8、Z13、Z14、Z15； Sınıf II S1 içerir S3、S5、S7、S9、S10、S11、S12、S16~S22；Z1、Z3、Z5、Z7、Z9、Z10、Z11、Z12、Z16~Z22。 Kısmi en küçük kareler diskriminant analizindeki VIP grafiğine göre, ligustilid, verbascoside ve salidroside'in üretim alanlarının bölünmesine katkısının önemli olduğu görülebilir. Analiz sonuçları, farklı üretim alanlarından elde edilen Ligustrum lucidum tıbbi malzemelerinin kalitesinde önemli farklılıklar olduğunu ve bunun tıbbi malzemelerin büyüme ortamındaki farklılıklarla ilgili olabileceğini göstermektedir. Sadece bir veya iki bileşenin içeriğinin ölçülmesi tıbbi malzemelerin kalitesini etkili bir şekilde yansıtamaz. İçsel kalitesini kapsamlı bir şekilde yansıtmak için Ligustrum lucidum'un birden fazla bileşenini aynı anda ölçmek gerekir.

Ligustrum lucidum'un işlenmeden önce ve sonra içerik belirleme sonuçlarının analizi. Ligustrum lucidum'u işlemek için çeşitli yöntemler vardır ve bunlar arasında en yaygın kullanılan yöntem alkol buğulama ve alkol buğulamayı içeren alkol fermantasyonudur. Bu çalışmada, işleme sırasında Ligustrum lucidum'un bileşen içeriğindeki değişiklikleri önceden araştırmak için şarap pilaki yöntemi kullanılmıştır. Ligustrum lucidum'un alkolle buğulanmasından sonra, Ligustrum lucidum'daki salidrosid, astragalosid ve oleuropein içeriği önemli ölçüde artmıştır. Belki de alkol üretiminden sonra bileşenlerin organizasyon yapısındaki veya fizikokimyasal özelliklerindeki değişiklikler nedeniyle, bileşenlerin infiltrasyonu, çözünmesi, yer değiştirmesi, difüzyonu ve diğer çözünme süreçleri için faydalıdır, bu da çözündürücü bir etkiye neden olur ve etkili bileşenlerin çözünme oranını artırır. Etkileyen spesifik faktörlerin daha fazla araştırılması gerekmektedir. Osmanthus glikozitleri, luteolin ve rutin, Ligustrum lucidum'un işlenmeden önce ve sonra sınıflandırılmasına önemli katkılarda bulunmuştur. Çalışmalar, Ligustrum lucidum'un işlenmesinden sonra, özellikle Ligustrum lucidum glikozitlerinin salidroside hidrolize olduğunu ve işlenmiş Ligustrum lucidum'daki salidrosid içeriğinin önemli ölçüde arttığını göstermiştir. Bu çalışmada, ultra yüksek performanslı sıvı kromatografi-kütle spektrometresi kullanılarak farklı kökenlerden ve işleme öncesi ve sonrası Ligustrum lucidum'da salidrosid, rutin, verbascoside, rutinoside, oleuropein, luteolin, apigenin, quercetin ve pineal glikozit dahil olmak üzere dokuz bileşenin içeriğini belirlemek için bir yöntem oluşturulmuştur. UV tespiti ile karşılaştırıldığında, bu araştırma yöntemi güçlü ayırma kabiliyetine, yüksek hassasiyete, güvenilir kalitatif analiz sonuçlarına ve düşük tespit limitine sahiptir. Farklı kökenlerden gelen Ligustrum lucidum tıbbi malzemelerinin kalitesindeki önemli farklılıklar bölge, iklim, toprak, büyüme dönemi ve hasat zamanı gibi faktörlerle ilgili olabilir. Özellikle, Ligustrum lucidum glikozit, verbascoside ve salidroside köken ayrımına önemli ölçüde katkıda bulunur. Ligustrum lucidum likörünün üretiminden sonra, salidrosid, ligustilid ve oleuropein içeriği önemli ölçüde artmıştır; bunun nedeni likör üretiminde aktif bileşenlerin çözünme oranının artması olabilir. Spesifik nedenlerin daha fazla araştırılması gerekmektedir. Bu deneysel yöntem basit, güvenilir ve oldukça hassastır ve Ligustrum lucidum'un ham ve işlenmiş ürünleri için kalite standartlarının iyileştirilmesi ve geliştirilmesi için bir referans sağlar.