Établissement d'un spectre d'empreintes digitales et détermination de la teneur en composants multi-indices des granulés de la formule Chaihu Baiyaoyao
Le Chaihu, mentionné pour la première fois dans le Shennong Bencao Jing, est la plante entière ou la racine séchée de Bupleurum scorzonerifolium Willd. ou Bupleurum chinense DC, une plante de la famille des ombellifères. Il a un goût amer et piquant, une légère froideur et appartient aux méridiens du foie, de la vésicule biliaire et des poumons. Elle a pour effet d'apaiser le foie, de soulager la dépression, de disperser la fièvre et de favoriser le yang qi. Le développement de la chimie médicinale naturelle moderne a permis de découvrir dans le Bupleurum chinense divers effets précieux et importants, tels que des effets anti-inflammatoires, antitumoraux, antidépresseurs, antiviraux, de régulation immunitaire et de régulation neuronale. Paeonia lactiflora Pall, plante de la famille des Ranunculaceae, est la racine séchée de Paeonia lactiflora Pall. Elle a un goût amer et acide et une nature légèrement froide. Elle est principalement produite dans le Shandong, le Hunan et d'autres régions. Actuellement, Bozhou a la plus grande production de Paeonia lactiflora, qui est une célèbre médecine traditionnelle chinoise en Chine. Elle a pour fonction de calmer le foie et de soulager la douleur, de nourrir le sang et de réguler les méridiens, de réduire le yin et la transpiration. La recherche pharmacologique moderne a montré que Paeonia lactiflora a des effets anti-inflammatoires, analgésiques, antitumoraux et antioxydants. La paire Chaihu Bai Shaoyao, en tant que médicament de base pour apaiser le foie et soulager la dépression, est apparue pour la première fois dans le "Traité sur les dommages causés par le froid" de la dynastie Han. Des formules telles que Sini San, Xiaoyao San, Chaihu Shugan San et Anshen Jieyu Tang utilisent toutes Chaihu comme médicament principal et Bai Shaoyao comme médicament secondaire. Les deux médicaments sont utilisés en combinaison, l'un dispersant et l'autre convergeant, ce qui est conforme aux caractéristiques de la médecine du foie dans la théorie de la médecine traditionnelle chinoise.
Les granulés de formule de médecine chinoise sont fabriqués à partir de morceaux de décoction de médecine chinoise, en utilisant une technologie pharmaceutique moderne, et sont extraits, séparés, concentrés, séchés et granulés par chauffage à l'eau. Les avantages d'un faible dosage, d'une portabilité facile et d'un ajustement en fonction des symptômes confèrent aux granulés de formule de médecine chinoise de vastes perspectives de développement. Les granulés de formule de médecine traditionnelle chinoise ne se limitent plus au développement de morceaux de décoction à ingrédient unique, tels que le chèvrefeuille Forsythia suspensa, l'éphédra amande, l'éphédra brindille de cassia, le carthame Danshen, le wuzhuyu Huanglian et d'autres granulés de formule médicinale sont progressivement utilisés à grande échelle dans des applications de compatibilité clinique. Le taux d'extraction des granulés de formule à ingrédient unique de Chaihu est relativement faible. En même temps, la combinaison de pivoine blanche et de Chaihu peut augmenter la quantité de décoction de paeoniflorin et réduire la quantité de décoction du composant toxique qu'est l'acide benzoïque, ce qui peut améliorer la solubilité des ingrédients actifs, éliminer ou réduire les effets secondaires toxiques et garantir la précision du dosage des médicaments cliniques. À l'heure actuelle, il n'existe aucun rapport sur les granulés de la formule Chaihu Baiyaoyao. C'est pourquoi cette étude établit une empreinte CLHP, une technologie de reconnaissance des formes chimiques et une détermination simultanée de la teneur en quatre composants pour les granulés de la formule Chaihu Baiyaoyao, afin d'améliorer le système d'évaluation de la qualité des granulés de la formule Chaihu Baiyaoyao et de fournir des références pour l'utilisation clinique de la médecine traditionnelle chinoise.
Cette étude a utilisé la CLHP pour établir le spectre d'empreintes digitales des particules de la formule Chaihu Baiyaoyao. Différents systèmes de phase mobile (eau acétonitrile, eau acétonitrile-0,1% acide phosphorique, eau acétonitrile-0,1% acide formique et eau méthanol-0,1% acide phosphorique) ont été étudiés, et il a été constaté que l'eau acétonitrile-0.1% d'acide phosphorique présentait un meilleur kurtosis et des valeurs de réponse plus élevées lorsqu'elle était lavée à l'eau. Les solvants d'extraction ont été examinés pour l'eau, le méthanol, l'éthanol, le méthanol concentré d'ammoniac 5% et la solution d'éthanol concentré d'ammoniac 5%. Il a été constaté que l'utilisation d'une solution de méthanol ammoniacal concentré 5% permettait de conserver les pics chromatographiques ; En scannant la solution d'essai des granulés de la formule Chaihu Baiyaoyao à deux longueurs d'onde (210 nm, 230 nm), les résultats ont montré qu'à 210 nm, le spectre d'empreinte présentait un plus grand nombre de pics chromatographiques et une ligne de base stable ; en même temps, les colonnes chromatographiques (colonne COSMOSIL 5C18-MS-II, WONDASIL C18, Amethyst C18-H (4.6mm × 250mm, 5 μ m, 120 Å)) et les températures des colonnes (20 ℃, 25 ℃, 30 ℃) ont été comparées. Les résultats ont montré que la colonne COSMOSIL 5C18-MS-II avait une meilleure efficacité de séparation lorsqu'elle était détectée à 30 ℃.
Les Chaihu White Peony Formula Granules sont des granulés préparés à partir de morceaux de décoction de pivoine blanche de Chaihu par une série de processus normalisés tels que l'extraction, la séparation, la concentration, le séchage et la granulation. Ils présentent des similitudes de composition et de pharmacologie avec la pivoine blanche de Chaihu et constituent une nouvelle forme de morceaux de décoction. La saponine a de Chaihu, la saponine d de Chaihu et la paeoniflorine sont les principaux indicateurs de détection pour le contrôle de la qualité de Chaihu et de Paeonia lactiflora dans l'édition 2020 de la pharmacopée chinoise. Des recherches ont montré que la saikosaponine a et la saikosaponine d peuvent améliorer le comportement dépressif des rats en inhibant la voie p-CREB/BDNF, supprimant ainsi l'apoptose neuronale de l'hippocampe et l'activation microgliale. La paeoniflorine peut atténuer la douleur inflammatoire induite par la CFA en inhibant les voies TRPV1 et acide succinique/SUCNR1-HIF-1 α/NLPR3. La paeoniflorine oxydée peut activer les récepteurs en augmentant l'expression de la protéine alpha du proliférateur de peroxysomes, promouvoir l'expression du gène du transporteur A1 de liaison à l'ATP et améliorer la distribution des lipides. Il s'agit là des principaux ingrédients actifs des granulés de la formule Chaihu Baiyaoyao, et la détermination de la teneur de ces quatre ingrédients est d'une grande importance pour le contrôle de la qualité des granulés de la formule Chaihu Baiyaoyao. En outre, les spectres d'empreintes digitales peuvent refléter de manière exhaustive la base matérielle de la médecine traditionnelle chinoise. Par conséquent, cette étude associe les spectres d'empreintes digitales à la détermination de la teneur afin de fournir des références pour améliorer les normes de qualité des granulés de la formule Chaihu Bai Shao.
Le spectre d'empreintes digitales combiné à la technologie de reconnaissance des formes chimiques est largement utilisé dans l'évaluation de la qualité de la médecine traditionnelle chinoise, des morceaux de décoction d'herbes chinoises et des granulés de formule. L'utilisation de cette méthode dans cette étude permet de mesurer intuitivement la similarité des changements de motifs d'empreintes digitales entre les échantillons de particules de formule de Chaihu Baiyaoyao de différentes origines. Les résultats de l'évaluation de la similarité des spectres d'empreintes digitales ont montré que la similarité entre les granulés de formule et les spectres d'empreintes digitales de contrôle de 15 lots de Chaihu Baiyaoyao était supérieure à 0,90, ce qui indique que le Chaihu Baiyaoyao de différentes origines avait une meilleure performance globale sur les granulés de formule, mais qu'il y avait des différences dans la teneur en composants indicateurs. L'analyse peut être due au traitement, aux méthodes de récolte et aux processus de production des matières médicinales de différentes origines. Les résultats de l'analyse en composantes principales et de l'analyse en grappes se confirment mutuellement, montrant la régularité de l'origine des matières médicinales. L'origine et le lot d'échantillons collectés par cet institut de recherche sont limités, et des améliorations supplémentaires sont nécessaires à un stade ultérieur.
En résumé, cette étude a établi 15 lots de spectres d'empreintes digitales et la détermination simultanée de quatre composants indicateurs des granulés de formule Chaihu Baiyaoyao à l'aide de la méthode CLHP. L'évaluation de la similarité, l'analyse en grappes et l'analyse en composantes principales ont été utilisées pour évaluer et classer la qualité des granulés de la formule Chaihu Baiyaoyao. Cette méthode est facile à utiliser, a une bonne répétabilité, des résultats précis et fiables, et peut fournir une base scientifique pour le contrôle et l'évaluation complets de la qualité des granulés de la formule Chaihu Baiyaoyao.