Установление спектра отпечатков пальцев и определение содержания мультииндексных компонентов в гранулах формулы Chaihu Baiyaoyao
Чайху, впервые записанное в "Шэньнун бэнькао цзин", - это целое растение или высушенный корень Bupleurum scorzonerifolium Willd. или Bupleurum chinense DC., растения семейства Зонтичные (Umbelliferae). Имеет горький и резкий вкус, легкий холодок, относится к меридианам печени, желчного пузыря и легких. Он оказывает успокаивающее действие на печень, снимает депрессию, рассеивает жар и способствует развитию ян-ци. С развитием современной химии природных лекарственных средств у Bupleurum chinense были обнаружены различные ценные и важные эффекты, такие как противовоспалительный, противоопухолевый, антидепрессивный, противовирусный, иммунный и нейрорегуляторный. Paeonia lactiflora Pall., растение семейства Ranunculaceae, представляет собой высушенный корень Paeonia lactiflora Pall. Он имеет горьковато-кислый вкус и слегка холодный характер. В основном его производят в Шаньдуне, Хунане и других местах. В настоящее время в Бочжоу производится больше всего Paeonia lactiflora, которая является известным традиционным китайским лекарством в Китае. Она обладает функциями успокоения печени и облегчения боли, питания крови и регулирования меридианов, а также уменьшения инь и потоотделения. Современные фармакологические исследования показали, что Paeonia lactiflora обладает противовоспалительным, обезболивающим, противоопухолевым и антиоксидантным действием. Пара Chaihu Bai Shaoyao, как основное лекарство для успокоения печени и снятия депрессии, впервые появилась в "Трактате о повреждении холодом" династии Хань. В таких формулах, как Сини Сань, Сяояо Сань, Чайху Шуган Сань и Аньшэнь Цзеюй Тань, Чайху используется как основное лекарство, а Бай Шаояо - как подчиненное. Эти два лекарства используются в комбинации, одно из которых рассеивает, а другое сближает, что соответствует характеристикам медицины печени в теории традиционной китайской медицины.
Гранулы формулы китайской медицины изготавливаются из отдельных частей отвара китайской медицины с использованием современных фармацевтических технологий, извлекаются, разделяются, концентрируются, высушиваются и гранулируются путем нагрева воды. Благодаря таким преимуществам, как низкая дозировка, легкая переносимость и регулировка в зависимости от симптомов, гранулы формулы китайской медицины имеют широкие перспективы развития. И гранулы формулы традиционной китайской медицины больше не ограничиваются разработкой однокомпонентных отваров, например, гранулы жимолости Forsythia suspensa, эфедры миндальной, эфедры кассии веточки, сафлора Danshen, Huanglian wuzhuyu и других лекарственных формул постепенно широко используются в клинической совместимости. Степень извлечения однокомпонентных гранул формулы Chaihu относительно низкая. В то же время, сочетание белого пиона и Chaihu может увеличить количество отвара паэонифлорина и уменьшить количество отвара токсичного компонента бензойной кислоты, что может повысить растворимость активных ингредиентов, устранить или уменьшить токсичные побочные эффекты и обеспечить точность клинической дозировки лекарств. В настоящее время нет сообщений о гранулах формулы Чайху Байяояо. Таким образом, в данном исследовании проводится ВЭЖХ-методика распознавания химических образцов и одновременное определение содержания четырех компонентов в гранулах формулы Чайху Байяояо, что позволит улучшить систему оценки качества гранул формулы Чайху Байяояо и предоставить некоторые рекомендации для клинического применения традиционной китайской медицины.

В данном исследовании использовалась ВЭЖХ для определения спектра отпечатков пальцев частиц формулы Chaihu Baiyaoyao. Были исследованы различные системы подвижных фаз (ацетонитрил-вода, ацетонитрил-0,1%-вода фосфорной кислоты, ацетонитрил-0,1%-вода муравьиной кислоты и метанол-0,1%-вода фосфорной кислоты), и было установлено, что ацетонитрил-0.1% фосфорнокислотная вода имеет лучший эксцесс и более высокие значения отклика при промывке водой; В качестве экстракционных растворителей были выбраны вода, метанол, этанол, 5% концентрированный аммиачный метанол и 5% концентрированный аммиачный этанольный раствор. Было обнаружено, что при использовании концентрированного аммиачно-метанольного раствора 5% хроматографические пики не изменяются; Сканирование тестового раствора гранул формулы Chaihu Baiyaoyao при двух длинах волн (210 нм, 230 нм) показало, что при 210 нм спектр отпечатков имеет большее количество хроматографических пиков и стабильную базовую линию; В то же время хроматографические колонки (колонки COSMOSIL 5C18-MS-II, WONDASIL C18, Amethyst C18-H (4.6 мм × 250 мм, 5 мкм, 120 Å)) и температуры колонок (20 ℃, 25 ℃, 30 ℃) сравнивались. Результаты показали, что колонка COSMOSIL 5C18-MS-II имела лучшую эффективность разделения при 30 ℃.
Гранулы Формулы Белого Пиона Chaihu - это гранулы, приготовленные из частей отвара Белого Пиона Chaihu посредством ряда стандартизированных процессов, таких как экстракция, разделение, концентрация, сушка и гранулирование. Они имеют сходство по составу и фармакологии с белым пионом Chaihu и являются новой формой отвара. Сапонин a, сапонин d и паэонифлорин Чайху являются основными показателями для контроля качества Чайху и Paeonia lactiflora в издании Китайской фармакопеи 2020 года. Исследования показали, что сайкосапонин a и сайкосапонин d могут улучшить депрессивное поведение у крыс, ингибируя p-CREB/BDNF путь, тем самым подавляя апоптоз нейронов гиппокампа и активацию микроглии. Паэонифлорин может облегчить воспалительную боль, вызванную CFA, путем ингибирования TRPV1 и янтарной кислоты/SUCNR1-HIF-1 α/NLPR3 путей. Окисленный паэонифлорин может активировать рецепторы, повышая экспрессию белка пероксисомного пролифератора альфа, способствовать экспрессии гена АТФ-связывающего транспортера A1 и улучшать распределение липидов. Вышеперечисленные вещества являются основными активными ингредиентами гранул формулы Chaihu Baiyaoyao, и определение содержания этих четырех ингредиентов имеет большое значение для контроля качества гранул формулы Chaihu Baiyaoyao. Кроме того, спектры отпечатков пальцев могут всесторонне отражать материальную основу традиционной китайской медицины. Поэтому в данном исследовании спектры отпечатков пальцев сочетаются с определением содержания ингредиентов, чтобы предоставить некоторые рекомендации для улучшения стандартов качества гранул формулы Чайху Бай Шао.
Спектр отпечатков пальцев в сочетании с технологией химического распознавания образов широко используется для оценки качества традиционной китайской медицины, отваров китайских трав и гранул формулы. Использование этого метода в данном исследовании позволяет интуитивно измерить сходство изменений отпечатков пальцев между образцами частиц формулы Чайху Байяояо различного происхождения. Результаты оценки сходства спектров отпечатков пальцев показали, что сходство между гранулами формулы и контрольными спектрами отпечатков пальцев 15 партий Chaihu Baiyaoyao было больше 0,90, что указывает на то, что Chaihu Baiyaoyao разного происхождения имеет лучшие общие характеристики гранул формулы, но есть различия в содержании индикаторных компонентов. Это может быть связано с особенностями обработки, методов сбора и производственных процессов лекарственного сырья разного происхождения. Результаты анализа главных компонент и кластерного анализа взаимно подтверждают друг друга, показывая закономерность происхождения лекарственного сырья. Происхождение и партия образцов, собранных в этом исследовательском институте, ограничены, и на более позднем этапе необходимо дальнейшее совершенствование.
Таким образом, в ходе данного исследования были получены спектры отпечатков пальцев 15 партий и проведено одновременное определение четырех индикаторных компонентов гранул молочной смеси Chaihu Baiyaoyao с использованием метода ВЭЖХ. Оценка сходства, кластерный анализ и анализ главных компонент были использованы для оценки и классификации качества гранул формулы Chaihu Baiyaoyao. Этот метод прост в эксплуатации, имеет хорошую повторяемость, точные и надежные результаты, и может обеспечить научную основу для комплексного контроля и оценки качества гранул формулы Chaihu Baiyaoyao.