Establecimiento del espectro de huellas dactilares y determinación del contenido de componentes multiíndice de los gránulos de la fórmula Chaihu Baiyaoyao
Chaihu, registrado por primera vez en el Shennong Bencao Jing, es la planta entera o la raíz seca de Bupleurum scorzonerifolium Willd. o Bupleurum chinense DC., una planta de la familia de las umbelíferas. Tiene un sabor amargo y acre, una ligera frialdad y pertenece a los meridianos del hígado, la vesícula biliar y los pulmones. Tiene los efectos de calmar el hígado, aliviar la depresión, dispersar la fiebre y promover el yang qi. Con el desarrollo de la química medicinal natural moderna, se han descubierto en el Bupleurum chinense varios efectos valiosos e importantes, como antiinflamatorio, antitumoral, antidepresivo, antiviral, regulador inmunitario y regulador neural. Paeonia lactiflora Pall, una planta de la familia Ranunculaceae, es la raíz seca de Paeonia lactiflora Pall. Tiene un sabor amargo y agrio y un carácter ligeramente frío. Se produce principalmente en Shandong, Hunan y otros lugares. Actualmente, Bozhou tiene la mayor producción de Paeonia lactiflora, que es una famosa medicina tradicional china en China. Tiene las funciones de calmar el hígado y aliviar el dolor, nutrir la sangre y regular los meridianos, y reducir el yin y la sudoración. La investigación farmacológica moderna ha demostrado que la Paeonia lactiflora tiene efectos antiinflamatorios, analgésicos, antitumorales y antioxidantes. El par Chaihu Bai Shaoyao, como medicamento básico para calmar el hígado y aliviar la depresión, apareció por primera vez en el "Tratado sobre los daños causados por el frío" de la dinastía Han. Fórmulas como Sini San, Xiaoyao San, Chaihu Shugan San y Anshen Jieyu Tang utilizan Chaihu como medicamento principal y Bai Shaoyao como medicamento subordinado. Los dos medicamentos se utilizan en combinación, con uno dispersante y otro convergente, lo que se ajusta a las características de la medicina hepática en la teoría de la medicina tradicional china.
Los gránulos de fórmula de medicina china se elaboran a partir de piezas individuales de decocción de medicina china, utilizando tecnología farmacéutica moderna, y se extraen, separan, concentran, secan y granulan mediante calentamiento de agua. Las ventajas de la baja dosificación, la fácil portabilidad y el ajuste según los síntomas dotan a los gránulos de fórmula de medicina china de amplias perspectivas de desarrollo. Y los gránulos de fórmula de medicina tradicional china ya no se limitan al desarrollo de piezas de decocción de un solo ingrediente, como la madreselva Forsythia suspensa, la efedra almendra, la efedra cassia ramita, el cártamo Danshen, el Huanglian wuzhuyu y otros gránulos de fórmula medicinal están siendo gradualmente ampliamente utilizados en aplicaciones de compatibilidad clínica. La tasa de extracción de los gránulos de fórmula de ingrediente único Chaihu es relativamente baja. Al mismo tiempo, la combinación de peonía blanca y Chaihu puede aumentar la cantidad de decocción de paeoniflorin y reducir la cantidad de decocción del componente tóxico ácido benzoico, lo que puede mejorar la solubilidad de los ingredientes activos, eliminar o reducir los efectos secundarios tóxicos y garantizar la precisión de la dosificación de la medicación clínica. En la actualidad, no existen informes sobre los gránulos de la fórmula Chaihu Baiyaoyao. Por lo tanto, este estudio establece una huella digital HPLC, la tecnología de reconocimiento de patrones químicos, y la determinación simultánea del contenido de cuatro componentes para los gránulos de fórmula Chaihu Baiyaoyao, con el fin de mejorar el sistema de evaluación de la calidad de los gránulos de fórmula Chaihu Baiyaoyao y proporcionar alguna referencia para el uso clínico de la medicina tradicional china.

En este estudio se utilizó la HPLC para establecer el espectro de huellas dactilares de las partículas de la fórmula Chaihu Baiyaoyao. Se investigaron diferentes sistemas de fase móvil (agua de acetonitrilo, agua de ácido fosfórico de acetonitrilo-0,1%, agua de ácido fórmico de acetonitrilo-0,1% y agua de ácido fosfórico de metanol-0,1%) y se descubrió que el agua de ácido fosfórico de acetonitrilo-0.1% agua de ácido fosfórico tenía mejor curtosis y valores de respuesta más altos cuando se lavaba con agua; Se examinaron los disolventes de extracción: agua, metanol, etanol, 5% metanol de amoníaco concentrado y 5% solución de etanol de amoníaco concentrado. Se comprobó que al utilizar una solución concentrada de metanol amoniacal 5%, los picos cromatográficos estaban intactos; Al escanear la solución de prueba de gránulos de fórmula Chaihu Baiyaoyao a dos longitudes de onda (210 nm, 230 nm), los resultados mostraron que a 210 nm, el espectro de la huella tenía un mayor número de picos cromatográficos y una línea de base estable; Al mismo tiempo, las columnas cromatográficas (columna COSMOSIL 5C18-MS-II, WONDASIL C18, Amethyst C18-H (4.6 mm × 250 mm, 5 μ m, 120 Å)) y las temperaturas de la columna (20 ℃, 25 ℃, 30 ℃) se compararon. Los resultados mostraron que la columna COSMOSIL 5C18-MS-II tenía una mejor eficiencia de separación cuando se detecta a 30 ℃.
Los Gránulos de Fórmula de Peonía Blanca Chaihu son gránulos preparados a partir de trozos de decocción de Peonía Blanca Chaihu mediante una serie de procesos estandarizados como extracción, separación, concentración, secado y granulación. Comparten similitudes en composición y farmacología con la Peonía Blanca Chaihu y son una nueva forma de pieza de decocción. La saponina a del Chaihu, la saponina d del Chaihu y la paeoniflorina son los principales indicadores de detección para controlar la calidad del Chaihu y la Paeonia lactiflora en la edición de 2020 de la Farmacopea China. Las investigaciones han demostrado que tanto la saikosaponina a como la saikosaponina d pueden mejorar el comportamiento depresivo en ratas mediante la inhibición de la vía p-CREB/BDNF, suprimiendo así la apoptosis neuronal del hipocampo y la activación microglial. La paeoniflorina puede aliviar el dolor inflamatorio inducido por CFA mediante la inhibición de las vías TRPV1 y ácido succínico/SUCNR1-HIF-1 α/NLPR3. La paeoniflorina oxidada puede activar los receptores mediante la regulación al alza de la expresión de la proteína alfa del proliferador de peroxisomas, promover la expresión del gen del transportador A1 de unión a ATP y mejorar la distribución de lípidos. Los anteriores son los principales ingredientes activos de los gránulos de la fórmula Chaihu Baiyaoyao, y la determinación del contenido de estos cuatro ingredientes es de gran importancia para el control de calidad de los gránulos de la fórmula Chaihu Baiyaoyao. Además, los espectros de huellas dactilares pueden reflejar de forma exhaustiva la base material de la medicina tradicional china. Por lo tanto, este estudio combina los espectros de huellas dactilares con la determinación del contenido con el fin de proporcionar algunas referencias para mejorar los estándares de calidad de los gránulos de la fórmula Chaihu Bai Shao.
El espectro de huellas dactilares combinado con la tecnología de reconocimiento de patrones químicos se utiliza ampliamente en la evaluación de la calidad de la medicina tradicional china, las piezas de decocción de hierbas chinas y los gránulos de fórmula. El uso de este método en este estudio puede medir intuitivamente la similitud de los cambios de patrones de huellas dactilares entre las muestras de partículas de fórmula de Chaihu Baiyaoyao de diferentes orígenes. Los resultados de la evaluación de la similitud de los espectros de huellas dactilares mostraron que la similitud entre los gránulos de fórmula y los espectros de huellas dactilares de control de 15 lotes de Chaihu Baiyaoyao era superior a 0,90, lo que indica que el Chaihu Baiyaoyao de diferentes orígenes tenía un mejor rendimiento general en los gránulos de fórmula, pero había diferencias en el contenido de componentes indicadores. El análisis puede deberse al procesamiento, los métodos de recolección y los procesos de producción de los materiales medicinales de distintos orígenes. Los resultados del análisis de componentes principales y del análisis de conglomerados se confirman mutuamente, mostrando la regularidad del origen de los materiales medicinales. El origen y el lote de las muestras recogidas por este instituto de investigación son limitados, por lo que es necesario mejorarlos en una fase posterior.
En resumen, este estudio estableció 15 lotes de espectros de huellas dactilares y la determinación simultánea de cuatro componentes indicadores de los gránulos de fórmula Chaihu Baiyaoyao mediante el método HPLC. Se utilizaron la evaluación de similitud, el análisis de conglomerados y el análisis de componentes principales para evaluar y clasificar la calidad de los gránulos de fórmula Chaihu Baiyaoyao. Este método es fácil de utilizar, tiene buena repetibilidad y resultados precisos y fiables, y puede proporcionar una base científica para el control y la evaluación exhaustivos de la calidad de los gránulos de la fórmula Chaihu Baiyaoyao.