Parmak izi spektrumunun oluşturulması ve Chaihu Baiyaoyao formül granüllerinin çoklu indeks bileşen içeriğinin belirlenmesi
İlk olarak Shennong Bencao Jing'de kaydedilen Chaihu, Umbelliferae familyasından bir bitki olan Bupleurum scorzonerifolium Willd. veya Bupleurum chinense DC. bitkisinin bütün bitkisi veya kurutulmuş köküdür. Acı ve keskin bir tadı, hafif bir soğukluğu vardır ve karaciğer, safra kesesi ve akciğer meridyenlerine aittir. Karaciğeri yatıştırma, depresyonu hafifletme, ateşi dağıtma ve yang qi'yi teşvik etme etkilerine sahiptir. Modern doğal tıbbi kimyanın gelişmesiyle birlikte, Bupleurum chinense'de anti-enflamatuar, anti-tümör, antidepresan, antiviral, bağışıklık düzenleme ve sinirsel düzenleme gibi çeşitli değerli ve önemli etkiler keşfedilmiştir. Ranunculaceae familyasından bir bitki olan Paeonia lactiflora Pall. kurutulmuş köküdür. Acı, ekşi bir tada ve hafif soğuk bir yapıya sahiptir. Ağırlıklı olarak Shandong, Hunan ve diğer yerlerde üretilmektedir. Şu anda Bozhou, Çin'de ünlü bir geleneksel Çin ilacı olan Paeonia lactiflora'nın en büyük üretimine sahiptir. Karaciğeri sakinleştirme ve ağrıyı dindirme, kanı besleme ve meridyenleri düzenleme, yin ve terlemeyi azaltma işlevlerine sahiptir. Modern farmakolojik araştırmalar, Paeonia lactiflora'nın anti-enflamatuar, analjezik, anti-tümör ve antioksidan etkilere sahip olduğunu göstermiştir. Chaihu Bai Shaoyao çifti, karaciğeri yatıştırmak ve depresyonu hafifletmek için temel ilaç olarak ilk kez Han Hanedanlığı'nın "Soğuk Hasarı Üzerine İnceleme" adlı eserinde görülmüştür. Sini San, Xiaoyao San, Chaihu Shugan San ve Anshen Jieyu Tang gibi formüllerin hepsi Chaihu'yu ana ilaç ve Bai Shaoyao'yu alt ilaç olarak kullanır. Bu iki ilaç, geleneksel Çin tıbbı teorisindeki karaciğer tıbbının özelliklerine uygun olarak biri dağıtıcı diğeri birleştirici olmak üzere birlikte kullanılır.
Çin tıbbı formül granülleri, modern farmasötik teknoloji kullanılarak tek Çin tıbbı kaynatma parçalarından yapılır ve su ısıtma ile ekstrakte edilir, ayrılır, konsantre edilir, kurutulur ve granüle edilir. Düşük dozaj, kolay taşınabilirlik ve semptomlara göre ayarlama avantajları, Çin tıbbı formül granüllerine geniş gelişme beklentileri kazandırmaktadır. Geleneksel Çin tıbbı formül granülleri artık hanımeli Forsythia suspensa, efedra badem, efedra cassia dal, Danshen aspir, Huanglian wuzhuyu ve diğer tıbbi formül granülleri gibi tek bileşenli kaynatma parçalarının geliştirilmesiyle sınırlı değildir ve klinik uyumluluk uygulamalarında giderek yaygın olarak kullanılmaktadır. Chaihu tek bileşenli formül granüllerinin ekstraksiyon oranı nispeten düşüktür. Aynı zamanda, beyaz şakayık ve Chaihu kombinasyonu, paeoniflorin kaynatma miktarını artırabilir ve aktif bileşenlerin çözünürlüğünü artırabilen, toksik yan etkileri ortadan kaldırabilen veya azaltabilen ve klinik ilaç dozajının doğruluğunu sağlayabilen toksik bileşen benzoik asidin kaynatma miktarını azaltabilir. Şu anda, Chaihu Baiyaoyao formül granülleri hakkında herhangi bir rapor bulunmamaktadır. Bu nedenle, bu çalışma Chaihu Baiyaoyao formül granüllerinin kalite değerlendirme sistemini iyileştirmek ve geleneksel Çin tıbbının klinik kullanımı için bazı referanslar sağlamak amacıyla bir HPLC parmak izi, kimyasal desen tanıma teknolojisi ve Chaihu Baiyaoyao formül granülleri için dört bileşenin içeriğinin eşzamanlı olarak belirlenmesini sağlar.

Bu çalışmada Chaihu Baiyaoyao formül partiküllerinin parmak izi spektrumunu oluşturmak için HPLC kullanılmıştır. Farklı mobil faz sistemleri (asetonitril su, asetonitril-0.1% fosforik asit su, asetonitril-0.1% formik asit su ve metanol-0.1% fosforik asit su) incelenmiş ve asetonitril-0.1% fosforik asit suyunun su ile yıkandığında daha iyi basıklık ve daha yüksek yanıt değerlerine sahip olduğu; ekstraksiyon çözücüleri su, metanol, etanol, 5% konsantre amonyak metanol ve 5% konsantre amonyak etanol çözeltisi için taranmıştır. 5% konsantre amonyak metanol çözeltisi kullanıldığında kromatografik piklerin bozulmadığı görülmüştür; Chaihu Baiyaoyao formül granüllerinin test çözeltisi çift dalga boyunda (210nm, 230nm) tarandığında, sonuçlar 210nm'de parmak izi spektrumunun daha fazla sayıda kromatografik pike ve sabit bir taban çizgisine sahip olduğunu göstermiştir; Aynı zamanda, kromatografik kolonlar (COSMOSIL 5C18-MS-II kolon, WONDASIL C18, Amethyst C18-H (4.6mm × 250mm, 5 μm, 120 Å)) ve kolon sıcaklıkları (20 ℃, 25 ℃, 30 ℃) karşılaştırılmıştır. Sonuçlar, COSMOSIL 5C18-MS-II kolonunun 30 ℃'de tespit edildiğinde daha iyi ayırma verimliliğine sahip olduğunu göstermiştir.
Chaihu Beyaz Şakayık Formül Granülleri, Chaihu Beyaz Şakayık kaynatma parçalarından ekstraksiyon, ayırma, konsantrasyon, kurutma ve granülasyon gibi bir dizi standartlaştırılmış işlemle hazırlanan granüllerdir. Bileşim ve farmakoloji açısından Chaihu Beyaz Şakayık ile benzerlikler gösterirler ve yeni bir kaynatma parçası formudurlar. Chaihu saponin a, Chaihu saponin d ve paeoniflorin, Çin Farmakopesi'nin 2020 baskısında Chaihu ve Paeonia lactiflora'nın kalitesini kontrol etmek için ana tespit göstergeleridir. Araştırmalar, hem saikosaponin a hem de saikosaponin d'nin p-CREB/BDNF yolunu inhibe ederek sıçanlarda depresif davranışı iyileştirebileceğini ve böylece hipokampal nöronal apoptozu ve mikroglial aktivasyonu baskılayabileceğini göstermiştir. Paeoniflorin, TRPV1 ve süksinik asit/SUCNR1-HIF-1 α/NLPR3 yolaklarını inhibe ederek CFA kaynaklı enflamatuar ağrıyı hafifletebilir. Oksitlenmiş paeoniflorin, peroksizom proliferatör alfa proteininin ekspresyonunu yukarı düzenleyerek reseptörleri aktive edebilir, ATP bağlayıcı taşıyıcı A1 geninin ekspresyonunu teşvik edebilir ve lipit dağılımını iyileştirebilir. Yukarıdakiler Chaihu Baiyaoyao formül granüllerinin ana aktif bileşenleridir ve bu dört bileşenin içeriğinin belirlenmesi Chaihu Baiyaoyao formül granüllerinin kalite kontrolü için büyük önem taşımaktadır. Buna ek olarak, parmak izi spektrumları geleneksel Çin tıbbının maddi temelini kapsamlı bir şekilde yansıtabilir. Bu nedenle, bu çalışma Chaihu Bai Shao formül granüllerinin kalite standartlarını iyileştirmek için bazı referanslar sağlamak amacıyla parmak izi spektrumlarını içerik belirleme ile birleştirmektedir.
Kimyasal örüntü tanıma teknolojisi ile birleştirilmiş parmak izi spektrumu, geleneksel Çin tıbbı, Çin bitkisel kaynatma parçaları ve formül granüllerinin kalite değerlendirmesinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu çalışmada bu yöntemin kullanılması, farklı kökenlerden gelen Chaihu Baiyaoyao formül parçacık örnekleri arasındaki parmak izi desen değişikliklerinin benzerliğini sezgisel olarak ölçebilir. Parmak izi spektrumlarının benzerlik değerlendirme sonuçları, formül granülleri ile 15 parti Chaihu Baiyaoyao'nun kontrol parmak izi spektrumları arasındaki benzerliğin 0,90'dan fazla olduğunu göstermiştir, bu da farklı kökenlerden gelen Chaihu Baiyaoyao'nun formül granülleri üzerinde daha iyi genel performansa sahip olduğunu, ancak gösterge bileşenlerinin içeriğinde farklılıklar olduğunu göstermektedir. Analiz, farklı kökenlerden gelen tıbbi malzemelerin işlenmesi, hasat yöntemleri ve üretim süreçlerinden kaynaklanıyor olabilir. Temel bileşen analizi ve küme analizi sonuçları, tıbbi malzemelerin kökeninin düzenliliğini göstererek birbirlerini karşılıklı olarak doğrulamaktadır. Bu araştırma enstitüsü tarafından toplanan örneklerin menşei ve partisi sınırlıdır ve sonraki aşamada daha fazla iyileştirme yapılması gerekmektedir.
Özetle, bu çalışmada 15 parti parmak izi spektrumu oluşturulmuş ve HPLC yöntemi kullanılarak Chaihu Baiyaoyao formül granüllerinin dört gösterge bileşeninin eşzamanlı tayini yapılmıştır. Chaihu Baiyaoyao formül granüllerinin kalitesini değerlendirmek ve sınıflandırmak için benzerlik değerlendirmesi, küme analizi ve temel bileşen analizi kullanılmıştır. Bu yöntemin kullanımı kolaydır, iyi tekrarlanabilirliğe, doğru ve güvenilir sonuçlara sahiptir ve Chaihu Baiyaoyao formül granüllerinin kalitesinin kapsamlı kontrolü ve değerlendirilmesi için bilimsel bir temel sağlayabilir.