Bewertung der Qualität von Granatapfelblättern aus verschiedenen Regionen anhand von Fingerabdruckspektren und chemischer Stöchiometrie
Granatapfelblätter sind die getrockneten Blätter der Pflanze Psidium guajava Linn. aus der Familie der Rosengewächse, die hauptsächlich in Guangdong, Guangxi, Sichuan, Yunnan, Fujian und Taiwan verbreitet sind. Sie hat feuchtigkeitstrocknende und milzstärkende, hitzeabbauende und entgiftende, darmstraffende und durchfallhemmende, entzündungshemmende und blutstillende Wirkungen. Moderne Forschungen haben gezeigt, dass zu den wichtigsten Wirkstoffen der Granatapfelblätter Flavonoide (Guajacol, Isoquercitrin, Hyperosid, Naringin, Naringenin, Quercetin) und Triterpenoide gehören, die blutzuckersenkende, antioxidative und antibakterielle Wirkungen haben.
Derzeit sind Granatapfelblätter nicht in der Ausgabe 2020 des Chinesischen Arzneibuchs enthalten, aber sie sind in den Standards für chinesische Kräutermedizin von Guangxi (Ausgabe 1990), den Standards für chinesische Kräutermedizin der Provinz Guangdong, Band 1 (Ausgabe 2004), den Standards für chinesische Kräutermedizin der Provinz Hunan (Ausgabe 2009) enthalten, Hunan Province Chinese Herbal Medicine Processing Standards (2010 edition), Guangxi Zhuang Medicine Quality Standards (Volume 2, 2011 edition), Fujian Province Chinese Herbal Medicine Processing Standards (2012 edition), und Sichuan Province Chinese Herbal Medicine Processing Standards (2015 edition), und sind lokale Standardarzneimittel. Mit den oben genannten Standards wurde Quercetin in Granatapfelblättern nur qualitativ durch Dünnschichtchromatographie identifiziert. Die Forschungs- und Analysemethoden zur Qualität von Granatapfelblättern konzentrieren sich hauptsächlich auf den Gehalt an Hauptbestandteilen und die Quantifizierung von mehreren Komponenten, was die Qualität von medizinischen Materialien nur schwer umfassend widerspiegelt. Die Guave als wichtiger wirtschaftlicher Obstbaum ist reich an Ressourcen, aber ihre Herkunft ist unterschiedlich, was die Kontrolle der Qualität der Guavenblätter erschwert. Insgesamt sind die Qualitätsstandards und die Forschung zur Bewertung von Granatapfelblättern noch nicht perfekt und müssen dringend in Angriff genommen werden.
Der Fingerabdruck der chinesischen Medizin ist ein umfassendes und quantifizierbares Identifizierungsverfahren zur Bewertung der Echtheit, Qualität und Stabilität chinesischer medizinischer Materialien und halbfertiger Zubereitungen chinesischer Medizin. Sie wird heute weithin zur Bewertung der Qualität chinesischer medizinischer Materialien eingesetzt. Die Forschungsgruppe hat schon früh eine Methode zur Mehrfachbewertung der Flavonoidkomponenten in Granatapfelblättern entwickelt, die eine sichere Grundlage für die Qualitätskontrolle von Granatapfelblättern bietet. Diese Studie nimmt Granatapfelblätter als Forschungsobjekt und sammelt 31 Partien von Granatapfelblattproben unterschiedlicher Herkunft für die Fingerabdruckanalyse. Ähnlichkeitsbewertung, Clusteranalyse, Hauptkomponentenanalyse und orthogonale partielle Kleinstquadrat-Diskriminanzanalyse werden verwendet, um die Korrelation zwischen Granatapfelblattqualität und Herkunft zu untersuchen und eine Referenz für die Qualitätsbewertung und Qualitätsstandardforschung von Granatapfelblättern zu liefern.

Unter Bezugnahme auf frühere Untersuchungen der Forschungsgruppe wurde die Extraktionsmethode als 60% Ethanol-Ultraschall-Extraktion für 30 Minuten mit einem Flusssystem von Acetonitril-0,2% Phosphorsäure-Wasser, einer Zorbax SE-C18-Säule (250mm x 4,6mm, 5um), einer Du-Temperatur von 35 ℃ und einem Injektionsvolumen von 10uL festgelegt. Gleichzeitig wurden die Auswirkungen der Wellenlängen (230, 254, 360 nm) und verschiedener Verhältnisse der Gradientenelution im Durchflusssystem auf den HPLC-Fingerprint von Granatapfelblättern untersucht. Im Ergebnis wies die Granatapfelblatt-Probenlösung unter den in diesem Experiment ermittelten chromatographischen Bedingungen die höchste Anzahl von Peaks auf, und die HPC-Basislinie hatte eine stabile Peakform und eine gute Trennung.

In diesem Experiment wurden medizinische Materialien aus Guavenblättern mit regionalen Vertretern aus Guangdong, Guangxi, Fujian, Hainan und Sichuan gesammelt, um die Universalität der Fingerabdruckspektren von Guavenblättern zu gewährleisten. Die Analyse der HPLC-Fingerprintspektren von Granatapfelblättern mittels Ähnlichkeitsbewertung ergab, dass es gewisse Unterschiede in der Ähnlichkeit der HPC-Fingerprintspektren von 31 Chargen von Granatapfelblättern gab und die Qualität von Granatapfelblättern aus verschiedenen Regionen durch geografische Faktoren beeinflusst wurde.

Die Ergebnisse der Clusteranalyse und der Hauptkomponentenanalyse waren konsistent, und es wurde festgestellt, dass die 31 Partien von Granatapfelblattproben hauptsächlich in zwei Kategorien eingeteilt wurden, wobei Guangxi, Guangdong, Fujian und Hainan zu einer Kategorie zusammengefasst wurden und Sichuan und Yunnan zu einer Kategorie zusammengefasst wurden. Nach der geografischen Verbreitungskarte und der Verwaltungsgliederung Chinas liegen Sichuan und Yunnan auf der zweiten Stufe (mit einer durchschnittlichen Höhe von 1000-2000 m) der Grenze zwischen dem Großen Khingan-Gebirge, dem Taihang-Gebirge, dem Wushan-Gebirge und dem Xuefeng-Gebirge und gehören zur südwestlichen Region; Guangxi, Guangdong, Fujian und Hainan liegen auf der dritten Ebene (mit einer durchschnittlichen Höhe von weniger als 500 m), die von der Greater Khingan Range, dem Taihang-Gebirge, dem Wushan-Gebirge und dem Xuefeng-Gebirge begrenzt wird, und gehören zu den Küstenregionen. Mit Hilfe der orthogonalen partiellen Kleinstquadrat-Diskriminanzanalyse wurden sieben Hauptkomponenten identifiziert, die Unterschiede zwischen den Granatapfelblättern dieser beiden Produktionsgebiete verursachen, wobei fünf Komponenten identifiziert wurden: Gerbsäure, Hyperosid, Isoquercitrin, Naringin und Guavaglykosid. Bei der quantitativen Analyse von Gerbsäure, Hyperosid, Isoquercetin, Naringin und Guavenglykosid in Guavenblattproben wurde festgestellt, dass der Gehalt an den fünf Komponenten in den Küstengebieten (Guangdong, Guangxi, Fujian, Hainan) niedriger war als in den südwestlichen Gebieten (Sichuan, Yunnan), und dass es einen signifikanten Unterschied gab (siehe Abbildung 7). Zusammenfassend lässt sich sagen, dass es signifikante regionale Unterschiede bei den sekundären Metaboliten der Granatapfelblätter gibt, was darauf hindeutet, dass die Qualität der Granatapfelblätter eng mit ihrer Wachstumsumgebung zusammenhängt und möglicherweise durch lokale Klimabedingungen und Umweltfaktoren beeinflusst wird. Weitere Untersuchungen und Forschungen sind erforderlich, um die spezifischen Einflussfaktoren zu ermitteln.

Diese Studie konzentriert sich auf Granatapfelblätter und verwendet Hochleistungsflüssigkeitschromatographie, um einen chemischen Fingerabdruck von Granatapfelblatt-Heilmitteln zu erstellen. Der Gehalt an Blütensäure, goldener Pfirsichrinde und Chinolonen in Granatapfelblatt-Heilmitteln wurde bestimmt, und 31 Chargen von Granatapfelblatt-Heilmitteln aus verschiedenen Regionen wurden mithilfe einer chemischen Berechnungsmethode analysiert. Es wurde festgestellt, dass die Qualität von Granatapfelblattarzneimitteln durch regionale Faktoren beeinflusst wird. Die etablierte Methode ist einfach und genau und bietet eine Methode und Datenreferenz für die Qualitätskontrolle und die Festlegung von Qualitätsstandards für Granatapfelblatt-Heilmittel.