Identifikation af karakteristiske peptider fra forskellige primitive igler
I 2020-udgaven af Folkerepublikken Kinas farmakopé (i det følgende benævnt "farmakopéen") hedder det, at den traditionelle kinesiske medicin igle er en tørret helhed af iglefamiliens dyr, iglen Whitman pigra Whitman, iglen Hirudo nipponica Whitman eller pilebladets igle Whitman acranulata Whitman. Dens smag er salt, bitter og mild; der er et lille giftstof, som hører til levermeridianen. Den har den funktion at bryde blod og fremme cirkulation, fjerne blodstasis og eliminere stagnation. Det bruges ofte til blodstasis og meridianobstruktion, behandling af masser, slagtilfælde hemiplegi og fald og skader. I de senere år er antallet af patienter med kardiovaskulære og cerebrovaskulære sygdomme steget markant, hvilket har resulteret i en stigende efterspørgsel efter medicinske materialer til igler. Der er dog mange komplekse og varierende kvalitetsmaterialer til igler på markedet. Ud over igler er der et forfalsket produkt kaldet Poecilobdra manillensis Lesson på markedet. I øjeblikket er både igler og blodigler tørrede varer med betydelige forskelle i udseende og egenskaber, hvilket gør dem nemme at skelne fra hinanden. Derfor fokuserer denne undersøgelse kun på at studere forskellige oprindelser af igler. En litteraturgennemgang har vist, at den nuværende forskning i igler fokuserer på antikoagulerende mekanismer og bestemmelse af aminosyrer, mens der er relativt få omfattende undersøgelser af kvaliteten af forskellige primitive igler og deres blandinger. Identifikationsstudier mellem forskellige primitive igler er for det meste baseret på trækidentifikation i henhold til 2020-udgaven af den kinesiske farmakopé. Nogle undersøgelser har gennem DNA-molekylær identifikation og proteinanalyseteknikker fundet, at DNA-molekylær identifikationsteknologi for igler kan etableres gennem PCR, og proteiner fra forskellige primitive igler kan skelnes ved hjælp af SDS-PAGE og 2-DE. Derudover er der undersøgelser, der også kan skelne mellem dem baseret på HPLC-karakteristiske spektrummetoder eller high-throughput-sekventeringsmetoder, men sådanne metoder har problemer såsom lang detektionstid og lav popularitet af detektionsinstrumenter. Denne undersøgelse brugte LC-MS-metoden til at detektere iglepeptid I og iglepeptid II. Den etablerede metode har stærk specificitet, høj følsomhed, kort analysetid og kan bruges til at skelne mellem igler med forskellig oprindelse, forbedre deres kvalitetskontrolniveau og give reference til sikkerheden og effektiviteten ved klinisk brug af relaterede lægemidler.

Identifikationen af medicinske materialer fra dyr har altid været et centralt og vanskeligt spørgsmål i forskningen i traditionel kinesisk medicin. De nuværende identifikationsmetoder er dog hovedsageligt baseret på traditionelle identifikationsmetoder, som er meget subjektive og kræver stor faglig viden og erfaring af den, der skal identificere materialet. Der mangler videnskabelige, effektive og nøjagtige identifikationsmetoder baseret på moderne detektionsmetoder. Igler er en værdifuld traditionel kinesisk medicin med stor medicinsk og forskningsmæssig værdi. Den medicinske værdi af igler er også blevet anerkendt over hele verden, og igler er blevet brugt til at behandle sygdomme i Europa, Egypten og Indien. I 2020-udgaven af den kinesiske farmakopé står der, at igler indeholder tre grundelementer, men i øjeblikket kontrollerer den kinesiske farmakopé dem kun gennem tests som fugt, samlet askeindhold, surhedsgrad og alkalinitet samt antitrombinaktivitet. Der er i øjeblikket ingen registrering af differentiel karakterisering mellem forskellige grundstoffer, som mangler videnskabeligt grundlag og ikke kan identificere afkog eller formulering af medicinske materialer efter kogning.
Denne undersøgelse testede 22 partier af igler med forskellig oprindelse, herunder 15 partier af igler, 2 partier af pileblade og 5 partier af igler. Resultaterne viste, at alle 15 partier af igler kunne registrere iglepeptid I og iglepeptid II kromatografiske toppe, 2 partier af pileblade kunne kun registrere iglepeptid II, og 5 partier af igler kunne kun registrere iglepeptid I. Fra inspektionsresultaterne kan man se, at igler med forskellig oprindelse kan skelnes ved at måle iglepeptid I og iglepeptid II. Gennem PLS-DA-analyse kan det ses, at igler med forskellig oprindelse klart kan opdeles i tre kategorier, og analyseresultaterne er i overensstemmelse med identifikationsresultaterne af oprindelsen. Ifølge andre dokumenter er aktiviteten af hirudo-polypeptid hovedsageligt antikoagulerende aktivitet og involverer også proteasehæmning, antiinflammatorisk, hydrolase, hæmning af makrofagmigration i aterosklerose og andre farmakologiske aktiviteter. Dette indikerer, at ud over aminosyrer og nukleosider er hirudo-polypeptid også en af hovedkomponenterne i dets farmakologiske virkning. Ovenstående dokumenter fokuserer imidlertid på den farmakologiske undersøgelse af polypeptid, og der er ikke etableret nogen påvisningsmetode for polypeptid. Denne artikel bruger LC-MS-metoden til at bestemme hirudo-polypeptid med henvisning til ekstraktions- og inspektionsmetoderne for andre sorter af polypeptid, hvilket giver et videnskabeligt og teknisk middel til kvalitetskontrol, som kan afspejle kvaliteten af dets farmakologiske virkning ved at måle topområdet for hirudo-polypeptid; Derudover er det under indholdsbestemmelsen af igler i den kinesiske farmakopé fastsat, at "anti-thrombinaktiviteten af igler ikke bør være mindre end 16.0U pr. 1 g; igler og pileblade bør ikke være mindre end 3,0U". Dette viser, at igler har betydelige forskelle i antitrombinaktivitet sammenlignet med igler og pileblade, det vil sige, at igler med forskellig oprindelse har betydelige kvalitetsforskelle. Derfor er det af stor betydning at bruge denne metode til hurtigt og præcist at skelne mellem medicinske iglematerialer med forskellig oprindelse og deres vandafkog, formelpræparater osv., der har mistet deres grundlæggende egenskaber, for at forbedre kvaliteten af igler og relaterede produkter.
Den metode, som dette forskningsinstitut har etableret, er hurtig, effektiv og reproducerbar, hvilket kan forbedre kvalitetskontrollen og give en reference for sikkerheden og effektiviteten ved klinisk brug af iglerelaterede lægemidler. Den løser effektivt problemet med igler, som i lang tid kun har kunnet skelne mellem forskellige oprindelser ved hjælp af traditionelle identifikationsmetoder.