HPLC Parmak İzi ve Kimyasal Örüntü Tanıma Yöntemine Dayalı Huangqi Farklı İşlenmiş Ürünlerin Çoklu İndeks Bileşen Analizi Üzerine Araştırma
Huangqi, Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge. var. mongholicus (Bge.) Hsiao veya Astragalus membranaceus (Fisch.) Bge. baklagil bitkisinin kurutulmuş köküdür. İlkbahar ve sonbaharda kazın, lifli kökleri ve kök başlarını çıkarın ve güneşte kurutun. Esas olarak polisakkaritler, saponinler, flavonoidler ve vücudun bağışıklığını arttırma, antiviral, anti-inflamatuar vb. gibi farmakolojik aktivitelere sahip diğer bileşenleri içerir. Huangqi'nin işlenmesi uzun bir geçmişe sahiptir. Song Hanedanlığı döneminde balla yapılan Huangqi ve tuzlu kızartma ortaya çıkmıştır. Ming Hanedanlığı'nın başlarında şarapla kızartma, tuzla kızartma ve pirinçle kızartma gibi yöntemler eklenmiştir. Huangqi ham ürünleri qi'yi tonifiye etme ve yang'ı teşvik etme, yüzeyi stabilize etme ve terlemeyi durdurma, diürezi teşvik etme ve şişmeyi azaltma etkilerine sahiptir; Balla kavrulduktan sonra tatlı, ılık ve hafif nemlidir. Qi'yi beslemek ve ortayı beslemek için iyidir ve tıbbi özellikleri hafifletebilir; Alkol üretimi ilacın yukarı doğru hareketini uyarabilir, kan dolaşımını teşvik edebilir ve teminatların engelini kaldırabilir; Tuz, şifalı bitkilerin böbrek meridyenine inmesine neden olabilir, besleyici yin'i artırabilir ve ateşi azaltabilir ve bitkilerin kuruluğunu hafifletebilir; Bal kepeği kavrulmuş Astragalus membranaceus, Jianchang Bang'in benzersiz bir işleme yöntemidir. Bal kepeği kavrulduktan sonra, Astragalus membranaceus sadece taze ve hoş kokulu bir renge sahip olmakla kalmaz, aynı zamanda önemli ölçüde geliştirilmiş bir besleyici etkiye sahiptir. Farklı işleme yöntemleri maddi temellerini etkiler, ayrıca ilaç etkinliğinde değişikliklere yol açar ve geleneksel Çin tıbbının farmakolojik etkilerinin gücü kimyasal bileşimi ile yakından ilgilidir.
Şu anda, Astragalus membranaceus'un parmak izi hakkında hem yurt içinde hem de yurt dışında birçok rapor bulunmaktadır. İşlendikten sonra etkinliğindeki değişiklikler, esas olarak iç bileşenlerindeki değişen derecelerdeki değişikliklerden kaynaklanmaktadır. Araştırmalar, Astragalus membranaceus'taki flavonoid, polisakkarit ve glikozit içeriğinin balın işlenmesinden sonra değiştiğini gösterirken, bal kepeğinin kızartılması, tuzla işleme ve alkolle işlemeden önce ve sonra bileşen içeriğindeki değişiklikler hakkında çok az rapor bulunmaktadır. Bu nedenle, bu çalışmada, Astragalus membranaceus'un farklı işlenmiş ürünlerinin parmak izi spektrumlarını oluşturmak ve aktif bileşenlerin içeriğini belirlemek için HPLC kullanılmıştır. Astragalus membranaceus'un farklı işlenmiş ürünlerinin kalitesini analiz etmek için hiyerarşik kümeleme analizi (HCA), temel bileşen analizi (PCA) ve ortogonal kısmi en küçük kareler diskriminant analizi (OPLS-DA) gibi kimyasal nicel örüntü tanıma yöntemleri kullanılmıştır, Balda kızartılmış Astragalus membranaceus, tuzlu Astragalus membranaceus ve şarap Astragalus membranaceus, Astragalus membranaceus'un farklı işlenmiş ürünlerinin kalitesi için etkili referanslar ve diğer geleneksel Çin ilaçlarının farklı işlenmiş ürünlerinin kalite değerlendirmesi için fikirler sağlar.
Geleneksel Çin tıbbının özelliklerinden biri, sadece yetiştirme, su arıtma, ateş arıtma ve su ateş kombinasyonu dahil olmak üzere belirli işleme yöntemlerinden geçtikten sonra tıbbi amaçlar için kullanılabilmesidir. Farklı işleme teknikleri malzeme temelinde değişikliklere neden olarak ilaç etkinliğinde farklılıklara yol açabilir. Bu nedenle, ilaçların orijinal özellikleri işlenerek, TCM sendromu farklılaşması ve esnek ilaç tedavisinin gerekliliklerine uyum sağlamak için değişiklikler yapılabilir.
Deneysel sonuçlar kümeleme analizinin temel bileşen analizi ile tutarlı olduğunu göstermiştir. İşlenmiş dört Huangqi ürünü temel olarak üç kategoriye ayrılmıştır: bal kepeği ile kızartılmış Huangqi ve balla kızartılmış Huangqi tek bir kategori olarak sınıflandırılırken, tuzlu Huangqi ve şarap Huangqi tek bir kategori olarak birbirine yakın bir şekilde kümelenmiştir. Gösterge bileşenlerinin içeriğinin analizi yoluyla, farklı işlenmiş Huangqi ürünlerinde 5-hidroksimetilfurfural, flavonol glukozit, Meidi gül ağacı glikozit, mangiferin, flavonol ve mangiferin içeriğinde farklılıklar olduğu bulunmuştur. Bunların içeriğindeki değişikliklerin, işleme sırasında ısı, zaman ve eklenen yardımcı maddeler gibi faktörlerle ilişkili olabileceği tahmin edilmektedir. Çalışmalar, işleme, depolama ve bileşik uyumluluk süreçlerinin hepsinin 5-hidroksimetilfurfural ürettiğini veya içeriğini arttırdığını göstermiştir. Bu, araştırma ekibi tarafından ham Astragalus membranaceus ve bal kepeği Astragalus membranaceus içeriğindeki değişiklikler üzerine yapılan önceki karşılaştırmalı çalışmanın sonuçlarıyla tutarlıdır. 5-hidroksimetilfurfural, işleme sonrasında yeni eklenen bir bileşendir. İşleme ve yardımcı malzeme hazırlama işlemlerinden sonra, geleneksel Çin tıbbının bazı kimyasal bileşenleri miktar ve kalite açısından değişikliğe uğrayacaktır. Bu deneyde Astragalus membranaceus'un dört işlenmiş ürünü üzerinde kalite analizi yapılmış ve 5-hidroksimetilfurfural'ın dört işlenmiş ürüne de yeni eklendiği tespit edilmiştir. Bal kepeği Astragalus membranaceus ve balda kızartılmış Astragalus membranaceus ile karşılaştırıldığında, tuz Astragalus membranaceus ve şarap Astragalus membranaceus'daki 5-hidroksimetilfurfural içeriği azalmıştır. Bu durum, Astragalus membranaceus'un işlenmesi sırasında meydana gelen kimyasal reaksiyonlarla yakından ilgili olabilir; bu reaksiyonlar, tuzlu su ve alkolde bekletme ve ısıtma işleminden sonra iç bileşenleri arasındaki karmaşık kimyasal reaksiyonlardan kaynaklanır. Bal işleme, tuz veya şarap işleme ile karşılaştırıldığında, Huangqi bal kepeği karıştırılarak kızartıldıktan sonra Meidi gül ağacı glikozit içeriği artar. İçerikteki değişimin, eklenen yardımcı maddeler ve dengesiz ısı etkisi altında flavonoid glikozitlerin dönüşümü ile ilgili olabileceği tahmin edilmektedir. Bal kepeği ile karıştırılarak kızartıldıktan sonra, Huangqi'deki flavonoid içeriği artarken, şarap ve tuz işleme flavonoid içeriğini azaltacaktır. Geleneksel bal kavurma yönteminin de flavonoidlerin çözünmesi üzerinde bir etkisi vardır, muhtemelen Huangqi bal kavurmasının yüksek viskozitesi nedeniyle tıbbi malzemenin yüzeyine sızar, ezilmesini zorlaştırır ve çözünme oranını sınırlar.
Özetle, Astragalus membranaceus'un kimyasal bileşimi farklı işleme yöntemlerinden sonra değişir ve kimyasal bileşim ilaçların farklı farmakolojik etkileri için maddi temeldir. Bu nedenle, farklı bileşenler Astragalus membranaceus ve işlenmiş ürünlerinin etkinliğini değiştiren aktif maddeler olabilir. Buna ek olarak, Astragalus membranaceus'un farklı işlenmiş ürünlerinin parmak izi spektrumları karşılaştırıldığında, 21 numaralı pikin hem bal kepeği Astragalus membranaceus hem de şarap Astragalus membranaceus için ortak bir pik olduğu, 22 numaralı pikin ise balla kavrulmuş Astragalus membranaceus için benzersiz bir pik olduğu bulunmuştur. Yazar, bu farklı işlenmiş ürünlerdeki benzersiz piklerin ilaç etkinliğinin maddi temelini etkileyebileceğini düşünmektedir. Şu anda araştırma grubu, analiz için Astragalus membranaceus'un dört işlenmiş ürününün parmak izi spektrumlarını oluşturmak üzere yalnızca HPLC kullanmaktadır. UPLC, LC-MS ve GC-MS gibi müteakip analiz yöntemlerinin, her bir işlenmiş üründe yeni eklenen zirveleri daha fazla analiz etmek ve tartışmak için kullanılması gerekmektedir. Kimyasal bileşimdeki değişiklikleri ve farklı işlenmiş ürünler arasındaki kalite farklılıklarını daha fazla araştırmak için görünüm, morfoloji, tanımlama vb. açılardan kalite değerlendirmesi de yapılabilir.
Bu deney, Astragalus membranaceus'un farklı işlenmiş ürünlerinin parmak izi spektrumlarını ve içerik tespitini birleştiren bir yöntem oluşturmaktadır ve metodolojik inceleme yoluyla oluşturulan yöntem etkili ve doğrudur. Altı bileşenin içeriğini nicel olarak analiz etmek için çok değişkenli istatistiksel yöntemlerle birleştirilerek Huangqi'nin işleme araştırması için referans sağlanmış ve ayrıca diğer geleneksel Çin ilaçlarının farklı işlenmiş ürünlerinin kalite değerlendirmesi için yeni fikirler sunulmuştur.