Évaluation quantitative de la qualité des matières médicinales de Houttuynia cordata basée sur l'empreinte HPLC combinée à la reconnaissance de motifs chimiques et à l'évaluation quantitative de composants multi-index
La plante médicinale Peucedamum praeruptorum Dunn est dérivée des racines séchées du Peucedamum praeruptorum Dunn, plante à fleurs blanches de la famille des ombellifères. Il a été mentionné pour la première fois dans le "Record of Famous Doctors" et a pour effet de disperser la chaleur du vent, de réduire le qi et de résoudre les mucosités. Il est couramment utilisé pour traiter des symptômes tels que la toux et l'asthme dus à la chaleur des mucosités, les mucosités jaunes et épaisses, la toux due à la chaleur du vent et les mucosités excessives. En termes de composition chimique moderne et d'applications cliniques, les ingrédients actifs de Peucedanum praeruptorum sont principalement des coumarines de type corne, notamment Peucedanum praeruptorum A, Peucedanum praeruptorum B, Peucedanum praeruptorum Ding, etc., qui ont des effets pharmacologiques tels qu'expectorant, anti-insuffisance cardiaque, abaissement de la tension artérielle et anti-inflammatoire. Depuis l'Antiquité, les plantes médicinales de Qianhu sont principalement des ressources sauvages, réparties dans l'Anhui, le Hunan, le Jiangxi, le Zhejiang, le Jiangsu et d'autres régions. Ces dernières années, en raison de la forte demande en ressources, la culture artificielle a progressivement remplacé la culture sauvage. Les principales zones de culture sont Ningguo dans l'Anhui, Huarong dans le Hunan, Zunyi dans le Guizhou, Fengjie dans le Chongqing, etc. Après la culture artificielle du Peucedanum praeruptorum à fleurs blanches, diverses zones de production l'ont introduit et planté, allant du Zhejiang à l'est au Yunnan et au Sichuan à l'ouest. Toutefois, en raison des grandes différences entre les environnements de production, il existe des différences significatives dans la qualité des matériaux médicinaux de Peucedanum praeruptorum, avec des niveaux de qualité variables. En outre, la plantation artificielle de Peucedanum praeruptorum à fleurs blanches est sujette à des problèmes tels que la montaison précoce, ce qui oblige à une récolte précoce des matières médicinales de Peucedanum praeruptorum. La période de croissance insuffisante entraîne une augmentation significative du taux de matières médicinales non qualifiées. L'édition 2020 de la pharmacopée chinoise stipule que "la teneur en Peucedanum praeruptorum A ne doit pas être inférieure à 0,90%, et la teneur en Peucedanum praeruptorum B ne doit pas être inférieure à 0,24%". Cependant, le taux de conformité de la qualité des produits médicinaux de Peucedanum praeruptorum sur le marché n'est que de 26%, et les produits médicinaux de Peucedanum praeruptorum non qualifiés inondent le marché. Outre la culture de nouvelles variétés de haute qualité, l'élaboration de techniques de plantation appropriées et la normalisation du traitement initial dans les zones de production, des méthodes et des normes d'évaluation de la qualité objectives, scientifiques et raisonnables constituent également des aspects importants pour garantir la qualité des produits médicinaux Qianhu. À l'heure actuelle, la clé de l'évaluation de la qualité des matières médicinales d'Houttuynia cordata réside dans la teneur en berbérine et en berbérine de l'Houttuynia cordata à fleurs blanches. Toutefois, cette méthode ne permet souvent pas d'évaluer de manière exhaustive la qualité intrinsèque des substances médicinales d'Houttuynia cordata et affecte directement l'application clinique de la médecine traditionnelle chinoise.
L'empreinte HPLC peut refléter de manière exhaustive la qualité intrinsèque des matières médicinales et constitue une méthode de contrôle de la qualité largement reconnue. Associée à la détermination du contenu multi-index, elle est devenue la principale méthode de contrôle de la qualité des substances médicinales chinoises traditionnelles. Les méthodes non supervisées telles que l'analyse de regroupement hiérarchique (HCA) et l'analyse des composantes principales (PCA), ainsi que les méthodes de modélisation chimique supervisées telles que les moindres carrés partiels (PLS) et les réseaux neuronaux artificiels, peuvent mieux refléter la qualité intrinsèque des matières médicinales et sont de nouvelles méthodes largement utilisées au cours des dernières années. Cette étude s'appuie sur les fondements précédents, en créant une empreinte HPLC et en combinant des méthodes de modélisation chimique telles que l'analyse en grappes, l'analyse en composantes principales et l'analyse de régression par moindres carrés partiels, afin d'évaluer de manière exhaustive les matières médicinales de différentes origines de Houttuynia cordata ; Parallèlement, la teneur de quatre composants de la coumarine, à savoir la lactone de bergamote, la paeoniflorine, la paeoniflorine et la paeoniflorine E, a été déterminée quantitativement pour clarifier les différences de composition de la paeoniflorine provenant de différentes régions, fournissant ainsi une référence pour le développement de normes de qualité pour la paeoniflorine.
Afin d'optimiser les conditions chromatographiques de l'empreinte HPLC de Houttuynia cordata, cette étude, basée sur des recherches antérieures, a optimisé la longueur d'onde de détection, la phase mobile et le débit. L'analyse a été effectuée en utilisant la méthode de balayage de la longueur d'onde complète, et les résultats ont montré une absorption à des longueurs d'onde de 190-245nm et 290-340nm. Le choix de 321 nm comme longueur d'onde de détection permet d'obtenir une grande quantité d'informations, une bonne valeur de réponse et moins d'interférences dues aux impuretés. Par conséquent, la longueur d'onde de détection a été fixée à 321 nm. L'étude des phases mobiles "eau acétonitrile" et "eau méthanol" a montré que l'effet de séparation de l'"eau méthanol" était meilleur et que l'eau d'acide formique 0,5% permettait d'obtenir de meilleures formes de pics. Par conséquent, l'eau de méthanol-0,5% d'acide formique a été choisie comme phase mobile. En outre, des études ont été menées sur l'écoulement La méthode a été appliquée à des débits de 1, 0,8 et 0,5mL/min, et il a été constaté que le débit de 0,5mL/min avait une meilleure efficacité de séparation. Par conséquent, le débit de 0,5mL/min a été déterminé pour cette méthode.
Cette étude a utilisé l'empreinte HPLC pour analyser des échantillons provenant de Hunan, Anhui, Chongqing, Hubei, Guizhou, Yunnan et d'autres zones de production. Les empreintes digitales de 16 lots d'herbes médicinales chinoises ont montré une grande similarité, avec un total de 21 pics communs identifiés et 7 composants identifiés. Dans l'analyse des motifs chimiques, les 16 lots d'échantillons ont été divisés en trois catégories. Sur la base des rapports de la littérature de référence, ils peuvent être divisés en trois catégories : les zones de production authentiques telles que Ningguo et Bozhou dans l'Anhui, Qianhu principalement dans le Hunan, Guizhou, Chongqing, et les zones de production de haute altitude dans le Yunnan. L'analyse des composantes principales et l'analyse PLS-DA ont permis de déterminer que le taux de contribution à la variance cumulée des six composantes principales était de 86,213%. Une analyse plus poussée a permis d'identifier huit pics communs qui distinguent l'origine et qui peuvent être utilisés comme les principales composantes caractéristiques de l'origine. La teneur en berbérine et en bergamote des échantillons d'Houttuynia cordata provenant des zones de production de haute altitude du Yunnan est significativement plus élevée que dans les autres zones de production, tandis que la berbérine est légèrement plus élevée que dans les autres zones de production. Nous supposons que l'altitude élevée favorise l'accumulation de lactone de bergamote, de berbérine et de berbérine dans les matières médicinales d'Houttuynia cordata. Yang et al. pensent que l'altitude élevée favorise la production et l'accumulation de Peucedanum praeruptorum et de Peucedanum praeruptorum, tandis que Luo et al. pensent que l'altitude a un impact plus important sur le contenu de Peucedanum praeruptorum que sur celui de Peucedanum praeruptorum. Bien que cette étude diffère des recherches précédentes, il est possible de préciser que les environnements de haute altitude sont plus propices à la formation de la qualité des matières médicinales d'Houttuynia cordata.
Dans l'analyse de la détermination de la teneur en composants multi-index, un total de 9 lots d'échantillons de Peucedanum praeruptorum ont satisfait aux exigences de la pharmacopée chinoise pour Peucedanum praeruptorum A, représentant 56,25%. Cependant, aucun lot n'a satisfait aux exigences de Peucedanum praeruptorum B, la valeur la plus élevée n'étant que de 2,01 mg/g. Xu et al. et Liu et al. ont également constaté que dans l'herbe médicinale de Houttuynia cordata, Houttuynia cordata à fleurs blanches A est plus susceptible de satisfaire à la norme, tandis que le phénomène de Houttuynia cordata à fleurs blanches B ne satisfaisant pas à la norme est plus courant. L'Houttuynia cordata à fleurs blanches est une plante vivace qui ne fleurit qu'une fois. La plantation à grande échelle a entraîné le passage à une variété annuelle, et l'âge insuffisant est une raison importante de la baisse de la qualité des matières médicinales d'Houttuynia cordata. En outre, l'Houttuynia cordata à fleurs blanches est sujette à la montaison précoce, et les "graines de poudre à canon" (graines annuelles) inondent le marché. Grâce à une sélection itérative à long terme, la qualité des matières médicinales d'Houttuynia cordata a diminué artificiellement d'année en année. Des recherches supplémentaires sont nécessaires pour déterminer si la baisse généralisée de la qualité des herbes médicinales Qianhu affecte l'efficacité clinique.
Selon les rapports de la littérature, il existe un certain degré de corrélation négative entre la teneur en Peucedanum praeruptorum A et Peucedanum praeruptorum B. Cette étude a également constaté cette tendance, mais les raisons spécifiques doivent être confirmées davantage. Les raisons de la mauvaise qualité des plantes médicinales chinoises sur le marché, outre l'environnement écologique, les facteurs génétiques et l'intervention artificielle, peuvent également être étroitement liées à l'évaluation actuelle de la qualité. Dans les normes actuelles, le taux de qualification des produits médicinaux Hu en prévente sur le marché est extrêmement faible, en particulier le taux de conformité du contenu du Baihua Qianhu Yi, qui ne correspond plus à l'utilisation clinique et au développement industriel des produits médicinaux Qianhu. Dans ce contexte, Qiu et al. ont étudié l'utilisation du ratio ou de la somme de Peucedanum praeruptorum A et de Peucedanum praeruptorum B pour évaluer de manière exhaustive la qualité des matières médicinales de Peucedanum praeruptorum. Liu et al, Xiao et al, Shi et al ont tous mené des études d'évaluation sur le spectre d'empreintes digitales des matières médicinales de Peucedanum praeruptorum sous différents angles et ont obtenu de bons résultats.
Cette étude a utilisé une combinaison d'analyse d'empreintes digitales, d'analyse de composants à indices multiples et d'analyse de modèles chimiques pour analyser et évaluer la qualité des matières médicinales, ce qui constitue une référence importante pour la formulation de normes d'évaluation de la qualité des matières médicinales de Qianhu. Toutefois, les échantillons collectés dans le cadre de cette étude ont été principalement obtenus sur les marchés, dans les bases de plantation et auprès d'autres sources, sans enregistrement détaillé du matériel génétique, de l'environnement écologique, des techniques de plantation et d'autres informations. La limitation de la cohérence des échantillons peut avoir un certain impact sur cette étude. Dans les recherches ultérieures, des efforts devraient être faits pour renforcer l'étude de l'impact de l'environnement écologique sur la qualité de l'Houttuynia cordata, traiter le problème central de la montaison précoce de l'Houttuynia cordata à fleurs blanches, augmenter la taille de l'échantillon de la recherche sur les normes de qualité et développer des normes d'évaluation de la qualité qui répondent aux attentes du marché et promeuvent le développement durable de l'industrie.