Количественная оценка качества лекарственного сырья Houttuynia cordata на основе ВЭЖХ-отпечатков в сочетании с распознаванием химических образов и многокомпонентным индексом
Лекарственная трава Peucedamum praeruptorum Dunn получена из высушенных корней белоцветкового растения Peucedamum praeruptorum Dunn семейства Зонтичные (Umbelliferae). Впервые он был записан в "Записях знаменитых врачей" и обладает эффектами рассеивания тепла ветра, уменьшения ци и рассасывания мокроты. Его обычно используют для лечения таких симптомов, как кашель с тепловой мокротой и астма, желтая густая мокрота, кашель с тепловой мокротой и избыточная мокрота. С точки зрения современного химического состава и клинического применения, активные ингредиенты Peucedanum praeruptorum - это в основном кумарины рогового типа, включая Peucedanum praeruptorum A, Peucedanum praeruptorum B, Peucedanum praeruptorum Ding и т.д., которые обладают такими фармакологическими эффектами, как отхаркивающий, противосердечный, понижающий кровяное давление и противовоспалительный. С древних времен лекарственные травы Цяньху были в основном дикими ресурсами, распространенными в Аньхой, Хунань, Цзянси, Чжэцзян, Цзянсу и других местах. В последние годы, в связи с резким ростом спроса на ресурсы, искусственное культивирование постепенно вытеснило дикорастущее. Основными районами его выращивания являются Нинго в Аньхой, Хуаронг в Хунань, Цзуньи в Гуйчжоу, Фэнцзе в Чунцин и другие места. После искусственного культивирования белоцветкового Peucedanum praeruptorum его стали выращивать в различных регионах, от Чжэцзяна на востоке до Юньнани и Сычуани на западе. Однако из-за значительных различий в условиях производства качество лекарственного сырья Peucedanum praeruptorum существенно отличается, причем в разной степени. Кроме того, искусственная посадка белоцветкового Peucedanum praeruptorum подвержена таким проблемам, как раннее полегание, что вынуждает собирать лекарственное сырье Peucedanum praeruptorum раньше срока. Недостаточный период роста приводит к значительному увеличению доли неквалифицированного лекарственного сырья. В китайской фармакопее издания 2020 года указано, что "содержание Peucedanum praeruptorum A должно быть не менее 0,90%, а содержание Peucedanum praeruptorum B должно быть не менее 0,24%". Однако уровень соответствия качества лекарственного сырья Peucedanum praeruptorum на рынке составляет всего 26%, и неквалифицированное лекарственное сырье Peucedanum praeruptorum наводняет рынок. Помимо культивирования высококачественных новых сортов, формирования подходящих технологий посадки и стандартизации первичной обработки в производственных зонах, важными аспектами обеспечения качества лекарственного сырья Цяньху являются объективные, научные и обоснованные методы и стандарты оценки качества. В настоящее время ключ к оценке качества лекарственного сырья Houttuynia cordata лежит в содержании берберина и берберина в белоцветковой Houttuynia cordata. Однако этот показатель зачастую не может всесторонне оценить внутреннее качество лекарственного сырья Houttuynia cordata и напрямую влияет на клиническое применение традиционной китайской медицины.

ВЭЖХ отпечаток пальца может всесторонне отражать внутреннее качество лекарственных материалов и является широко признанным методом контроля качества. В сочетании с многоиндексным определением содержания он стал основным методом контроля качества традиционных китайских лекарственных средств. Неконтролируемые методы, такие как иерархический кластерный анализ (HCA) и анализ главных компонент (PCA), а также контролируемые методы химического моделирования, такие как частичные наименьшие квадраты (PLS) и искусственные нейронные сети, могут лучше отражать внутреннее качество лекарственных материалов и широко используются в последние годы. Данное исследование основывается на предыдущем фундаменте, создавая ВЭЖХ-отпечаток и сочетая методы химического моделирования, такие как кластерный анализ, анализ главных компонент и регрессионный анализ по методу частичных наименьших квадратов, для всесторонней оценки лекарственного сырья различного происхождения Houttuynia cordata; В то же время, содержание четырех кумариновых компонентов, а именно лактона бергамота, паэонифлорина, паэонифлорина и паэонифлорина Е, было определено количественно, чтобы прояснить композиционные различия паэонифлорина из разных регионов, обеспечивая ссылку для разработки стандартов качества паэонифлорина.

Для оптимизации хроматографических условий ВЭЖХ отпечатков пальцев Houttuynia cordata в данной работе на основе предыдущих исследований были оптимизированы длина волны обнаружения, подвижная фаза и скорость потока. Анализ проводился с использованием метода сканирования по полной длине волны, и результаты показали поглощение при длинах волн 190-245 нм и 290-340 нм. Выбор длины волны 321 нм в качестве длины волны обнаружения характеризуется большим количеством информации, хорошим значением отклика и меньшей интерференцией от примесей. Поэтому в качестве длины волны обнаружения была выбрана 321 нм. Исследование подвижных фаз "ацетонитрил-вода" и "метанол-вода" показало, что эффект разделения "метанол-вода" лучше, а вода с 0,5% муравьиной кислотой позволяет получить лучшие формы пиков. Поэтому в качестве подвижной фазы была выбрана "метанол-0,5% муравьиная кислота вода". Кроме того, были проведены исследования потока 1, 0,8 и 0,5 мл/мин, и было обнаружено, что 0,5 мл/мин имеет лучшую эффективность разделения. Поэтому скорость потока 0,5 мл/мин была определена как скорость потока для данного метода.

В данном исследовании для анализа образцов из Хунани, Аньхой, Чунцин, Хубэй, Гуйчжоу, Юньнань и других регионов производства использовался метод ВЭЖХ-отпечатков. Отпечатки пальцев 16 партий китайских лекарственных трав показали высокую степень сходства, в общей сложности был идентифицирован 21 общий пик и 7 компонентов. При анализе химического состава 16 партий образцов были разделены на три категории. Основываясь на данных справочной литературы, их можно разделить на три категории: аутентичные районы производства, такие как Нингуо и Бочжоу в Аньхой, Цяньху в основном в Хунань, Гуйчжоу, Чунцин, и высокогорные районы производства в Юньнань. В результате анализа главных компонент и PLS-DA совокупный вклад шести главных компонент в дисперсию составил 86,213%. Дальнейший анализ выявил восемь общих пиков, отличающих происхождение, которые могут быть использованы в качестве основных характерных компонентов происхождения. Содержание берберина и бергамота в образцах Houttuynia cordata из высокогорных районов производства Юньнань значительно выше, чем в других районах производства, в то время как берберина немного больше, чем в других районах производства. Мы предполагаем, что высокогорье способствует накоплению лактона бергамота, берберина и берберина в лекарственном сырье Houttuynia cordata. Ян и др. считают, что высокогорье способствует образованию и накоплению Peucedanum praeruptorum и Peucedanum praeruptorum, в то время как Луо и др. полагают, что высокогорье оказывает большее влияние на содержание Peucedanum praeruptorum, чем Peucedanum praeruptorum. Несмотря на то, что данное исследование отличается от предыдущих, можно утверждать, что высокогорные условия более благоприятны для формирования качества лекарственного сырья Houttuynia cordata.

При анализе многоиндексного определения содержания компонентов, в общей сложности 9 партий образцов Peucedanum praeruptorum соответствовали требованиям Китайской Фармакопеи для Peucedanum praeruptorum A, составляя 56,25%. Однако ни одна партия не соответствовала предельным требованиям для Peucedanum praeruptorum B, а самое высокое содержание составило всего 2,01 мг/г. Сюй и др. и Лю и др. также обнаружили, что в лекарственной траве Houttuynia cordata, белоцветковая Houttuynia cordata A с большей вероятностью соответствует стандарту, в то время как феномен белоцветковой Houttuynia cordata B не соответствует стандарту является более распространенным. Белоцветковая Houttuynia cordata - многолетнее растение, цветущее один раз. Масштабные посадки привели к переходу на однолетние сорта, и недостаточный возраст является важной причиной снижения качества лекарственного сырья Houttuynia cordata. Кроме того, белоцветковая Houttuynia cordata склонна к раннему увяданию, и "пороховые семена" (однолетние семена) наводняют рынок. В результате длительной итеративной селекции качество лекарственного сырья Houttuynia cordata искусственно селективно снижается год от года. Необходимы дальнейшие исследования, чтобы определить, влияет ли повсеместное снижение качества лекарственных трав Цяньху на клиническую эффективность.

Согласно литературным данным, существует определенная степень отрицательной корреляции между содержанием Peucedanum praeruptorum A и Peucedanum praeruptorum B. Данное исследование также выявило эту тенденцию, но конкретные причины нуждаются в дальнейшем подтверждении. Причины низкого качества китайских лекарственных трав на рынке, помимо экологической обстановки, генетических факторов и искусственного вмешательства, также могут быть тесно связаны с текущей оценкой качества. В соответствии с действующими стандартами, уровень квалификации предпродажных лекарственных материалов Ху на рынке крайне низок, особенно уровень соответствия содержания Baihua Qianhu Yi, что уже не соответствует клиническому использованию и промышленному развитию лекарственных материалов Цяньху. В связи с этим Цю и др. исследовали использование соотношения или суммы Peucedanum praeruptorum A и Peucedanum praeruptorum B для комплексной оценки качества лекарственного сырья Peucedanum praeruptorum. Лю и др., Сяо и др., Ши и др. провели исследования по оценке спектра отпечатков пальцев лекарственного сырья Peucedanum praeruptorum с разных точек зрения и достигли хороших результатов.

В данном исследовании для анализа и оценки качества лекарственных материалов использовалось сочетание анализа отпечатков пальцев, многоиндексного компонентного анализа и анализа химических моделей, что имеет важное справочное значение для разработки стандартов оценки качества лекарственных материалов Цяньху. Однако недостатком является то, что образцы, собранные в данном исследовании, были получены в основном с рынков, посадочных баз и других источников, без подробных записей о зародышевой плазме, экологической среде, методах посадки и другой информации. Ограничение согласованности образцов может оказать некоторое влияние на данное исследование. В последующих исследованиях необходимо усилить изучение влияния экологической среды на качество Houttuynia cordata, решить основную проблему раннего созревания белоцветковой Houttuynia cordata, увеличить размер выборки для исследования стандартов качества и разработать стандарты оценки качества, которые соответствуют ожиданиям рынка и способствуют устойчивому развитию отрасли.