UPLC-Q-XActive Orbitrap hochauflösende Massenspektrometrie zur quantitativen Analyse des Gehalts von 9 Komponenten in Ligustrum lucidum unterschiedlicher Herkunft und vor und nach der Verarbeitung
Ligustrum Lucidum Ait. ist eine getrocknete und reife Frucht von Ligustrum Lucidum Ait, einer Pflanze aus der Familie der Oleaceae. Sie hat einen süßen, bitteren und kühlen Geschmack und dringt in die Leber- und Nierenmeridiane ein. Sie hat die Wirkung, Leber und Nieren zu nähren, die Sehkraft zu verbessern und das Haar zu schwärzen. Sie kann bei Leber- und Nieren-Yin-Mangel, Schwindel und Tinnitus, Schmerzen und Schwäche in der Taille und in den Knien, vorzeitigem Ergrauen der Haare, unklarer Sicht, Unterdrückung der inneren Hitze, dampfenden Knochen und Hitzewallungen usw. eingesetzt werden. Fructus Ligustri Lucidi enthält eine Vielzahl von Wirkstoffen, wie Triterpenoide, Iridoide, Phenylethanol, Flavonoide, ätherische Öle, Zucker, Aminosäuren, Sterole usw. Es hat eine Vielzahl pharmakologischer Wirkungen, wie Anti-Diabetes, Anti-Tumor, Leberschutz, Antioxidantien, entzündungshemmend, blutzuckersenkend, lipidsenkend, immunregulierend, usw. Es wird hauptsächlich bei der klinischen Behandlung von Hyperlipidämie, Osteoporose, Dickdarmkrebs, Lungenkrebs, Hepatitis und anderen Krankheiten eingesetzt. Die Hauptwirkstoffe in Ligustrum lucidum sind Iridoidglykoside, aber die Wirksamkeit von Ligustrum lucidum wird nicht durch den Gehalt der einzelnen Bestandteile bestimmt. Die Bestandteile wie Phenylethanol, Flavonoide und Iridoide in Ligustrum lucidum wurden aufgrund ihrer antioxidativen und osteoporosehemmenden Wirkung ebenfalls zur Qualitätsbewertung herangezogen, sind aber noch nicht perfekt. Nur durch die Analyse des Gehalts von Stoffgruppen, die mit der Wirksamkeit von Ligustrum lucidum in Verbindung stehen, kann die Qualität der medizinischen Materialien von Ligustrum lucidum wirklich bewertet werden. Daher wurde in dieser Studie eine Methode zur gleichzeitigen Bestimmung des Gehalts mehrerer Wirkstoffe in Ligustrum lucidum, einschließlich Phenylethanol (Salidrosid, Echinacosid), Flavonoide (Quercetin, Apigenin, Rutin, Verbascosid, Verbascosid) und Cyclohexenetherterpene (Oleuropein, Astragalosid), entwickelt, um die Qualität von Ligustrum lucidum zu bewerten.
Die Verarbeitungsmethode von Ligustrum lucidum wurde erstmals in dem Buch "Su Yang" aus der Song-Dynastie beschrieben. Die traditionellen Verarbeitungsprodukte von Ligustrum lucidum werden auch heute noch verwendet, darunter rohe und alkoholische Produkte. In der modernen Zeit werden auch gereinigte Produkte, gedämpfte Produkte, Salzprodukte, Essigprodukte usw. hinzugefügt. Rohe und alkoholische Produkte werden in der klinischen Praxis häufig verwendet. Die rohen Produkte von Ligustrum lucidum reinigen die Leber und die Augen, nähren das Yin und befeuchten die Trockenheit, und die nährende Wirkung auf die Leber und die Nieren wird nach der Herstellung von Alkohol deutlich verstärkt. Untersuchungen haben gezeigt, dass die verstärkte leber- und nierenstärkende Wirkung von Ligustrum lucidum-Wein eng mit der Hydrolyse und Umwandlung der Iridoidglykoside in Ligustrum lucidum während der Verarbeitung zusammenhängt. Nach der Verarbeitung nimmt der Gehalt an Iridoidglykosiden und Phenylethanolglykosiden in Ligustrum lucidum ab, während der Gehalt an Salidrosid und Phenylethanolglykosiden zunimmt. Diese Studien sind jedoch relativ verstreut und nicht systematisch genug, um die Veränderungen in der chemischen Zusammensetzung vor und nach der Verarbeitung von Fructus Zhenzi wissenschaftlich zu bewerten. Vor diesem Hintergrund wurde in dieser Studie die hochauflösende Massenspektrometrie UPLC-Q Exactive-Orbitrap verwendet, um den Gehalt an Salidrosid, Rutin, Verbascosid, Ligustilid, Oleuropein, Luteolin, Apigenin, Quercetin und Pinealsäure in Ligustrum lucidum gleichzeitig zu bestimmen. Das Verteilungsmuster der chemischen Komponenten in Ligustrum lucidum aus verschiedenen Regionen wurde analysiert, und die Veränderungen des Gehalts an chemischen Komponenten vor und nach der Verarbeitung wurden untersucht, um eine theoretische Grundlage für die Standardisierung der Qualitätsstandards von Ligustrum lucidum-Abkochungen und verarbeiteten Produkten zu schaffen.
Analyse der Ergebnisse der Inhaltsstoffbestimmung von Ligustrum lucidum aus verschiedenen Herkünften. In dieser Studie wurde eine LC-MS-Methode zur Bestimmung des Gehalts von 9 Komponenten in Ligustrum lucidum verschiedener Herkunft entwickelt. Die Ausgabe 2020 des chinesischen Arzneibuchs schreibt vor, dass der Grenzwert für Ligustilid nicht unter 0,70% liegen sollte. Bei den 22 getesteten Chargen von Ligustrum lucidum-Arzneimitteln unterschiedlicher Herkunft lag der Gehalt an Ligustilid in Ligustrum lucidum-Arzneimitteln aus drei Herkunftsländern (Xinxiang, Henan, Baoding, Hebei, und Huixian, Henan) mit 13,64% unter dem Grenzwert der Ausgabe 2020 des chinesischen Arzneibuchs. Die Gründe hierfür müssen weiter untersucht werden. In den verschiedenen Anbaugebieten ist der Gehalt an Salidrosid und Paeoniflorin relativ hoch in Zhengzhou, Henan, Dangyang, Hubei, Guangyuan, Sichuan, Yangling, Shaanxi, Nanyang, Henan, Changsha, Hunan, und Changde, Hunan, mit Konzentrationen von 0,9862 bis 1,5440 mg/g bzw. 12,8500 bis 18,1066 mg/g. Nach der Verarbeitung von Ligustrum lucidum stieg der Gehalt an Ligustrum lucidum-Glykosiden deutlich an, die alle über dem Grenzwert der Ausgabe 2020 des chinesischen Arzneibuchs lagen. Mit Hilfe der Software SIMCA14.1 wurde eine Hauptkomponentenanalyse für Ligustrum lucidum aus verschiedenen Herkünften und für verarbeitetes Ligustrum lucidum aus verschiedenen Herkünften durchgeführt. Ligustrum lucidum aus verschiedenen Herkünften und verarbeitetes Ligustrum lucidum aus verschiedenen Herkünften kann in zwei Kategorien unterteilt werden: Kategorie I umfasst S2 S4、S6、S8、S13、S14、S15;Z2、Z4、26、Z8、Z13、Z14、Z15; Klasse II umfasst S1 S3、S5、S7、S9、S10、S11、S12、S16~S22;Z1、Z3、Z5、Z7、Z9、Z10、Z11、Z12、Z16~Z22。 Gemäß dem VIP-Plot in der partiellen Kleinstquadrat-Diskriminanzanalyse, ist zu erkennen, dass der Beitrag von Ligustilid, Verbascosid und Salidrosid zur Aufteilung der Anbaugebiete signifikant ist. Die Analyseergebnisse deuten darauf hin, dass es signifikante Unterschiede in der Qualität von Ligustrum lucidum-Arzneimitteln aus verschiedenen Anbaugebieten gibt, die möglicherweise mit Unterschieden in der Wachstumsumgebung der Arzneistoffe zusammenhängen. Die bloße Messung des Gehalts von einem oder zwei Bestandteilen kann die Qualität der Arzneidrogen nicht wirksam widerspiegeln. Es ist notwendig, mehrere Bestandteile von Ligustrum lucidum gleichzeitig zu messen, um die inhärente Qualität umfassend wiedergeben zu können.
Analyse der Ergebnisse der Inhaltsbestimmung von Ligustrum lucidum vor und nach der Verarbeitung. Es gibt verschiedene Methoden zur Verarbeitung von Ligustrum lucidum, von denen die am häufigsten angewandte Methode die alkoholische Gärung ist, zu der auch das Dünsten in Alkohol und das Dämpfen von Alkohol gehören. In dieser Studie wurde die Methode des Weindämpfens verwendet, um vorläufig die Veränderungen des Inhaltsstoffs von Ligustrum lucidum während der Verarbeitung zu untersuchen. Nach dem Dünsten von Ligustrum lucidum mit Alkohol stieg der Gehalt an Salidrosid, Astragalosid und Oleuropein in Ligustrum lucidum deutlich an. Möglicherweise aufgrund von Veränderungen in der Organisationsstruktur oder in den physikalisch-chemischen Eigenschaften der Bestandteile nach der Alkoholherstellung begünstigt der Alkohol die Infiltration, Auflösung, Verdrängung, Diffusion und andere Auflösungsprozesse der Bestandteile, was zu einem Solubilisierungseffekt führt und die Auflösungsgeschwindigkeit der wirksamen Bestandteile verbessert. Die spezifischen Einflussfaktoren müssen weiter untersucht werden. Osmanthusglykoside, Luteolin und Rutin haben wesentlich zur Klassifizierung von Ligustrum lucidum vor und nach der Verarbeitung beigetragen. Studien haben gezeigt, dass nach der Verarbeitung von Ligustrum lucidum insbesondere die Ligustrum lucidum-Glykoside zu Salidrosid hydrolysiert werden und dass der Gehalt an Salidrosid in verarbeitetem Ligustrum lucidum deutlich erhöht ist. In dieser Studie wurde eine Methode zur Bestimmung des Gehalts von neun Komponenten, darunter Salidrosid, Rutin, Verbascosid, Rutinosid, Oleuropein, Luteolin, Apigenin, Quercetin und Pineal-Glykosid, in Ligustrum lucidum unterschiedlicher Herkunft und vor und nach der Verarbeitung mit Hilfe der Ultra-Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie-Massenspektrometrie entwickelt. Im Vergleich zur UV-Detektion verfügt diese Forschungsmethode über eine starke Trennfähigkeit, hohe Empfindlichkeit, zuverlässige qualitative Analyseergebnisse und eine niedrige Nachweisgrenze. Die signifikanten Unterschiede in der Qualität von Ligustrum lucidum-Arzneimitteln unterschiedlicher Herkunft können mit Faktoren wie Region, Klima, Boden, Wachstumsperiode und Erntezeit zusammenhängen. Insbesondere die Glykoside, Verbascoside und Salidroside von Ligustrum lucidum tragen wesentlich zur Aufteilung der Herkunft bei. Nach der Herstellung von Ligustrum lucidum Liquor stieg der Gehalt an Salidrosid, Ligustilid und Oleuropein deutlich an, was auf die erhöhte Auflösungsrate der Wirkstoffe bei der Liquorherstellung zurückzuführen sein könnte. Die genauen Gründe müssen noch weiter untersucht werden. Diese experimentelle Methode ist einfach, zuverlässig und hochempfindlich und bietet eine Referenz für die Verbesserung und Erhöhung der Qualitätsstandards für rohe und verarbeitete Produkte von Ligustrum lucidum.