Houttuynia cordata tıbbi malzemelerinin kalitesinin kimyasal örüntü tanıma ve çoklu indeks bileşeni kantitatif değerlendirmesi ile birleştirilmiş HPLC parmak izine dayalı
Peucedamum praeruptorum Dunn şifalı otu, Umbelliferae familyasından beyaz çiçekli Peucedamum praeruptorum Dunn bitkisinin kurutulmuş köklerinden elde edilir. İlk olarak "Ünlü Doktorların Kayıtları "nda kaydedilmiştir ve rüzgar ısısını dağıtma, qi'yi azaltma ve balgamı çözme etkilerine sahiptir. Balgam ısısı öksürüğü ve astım, sarı kalın balgam, rüzgar ısısı öksürüğü ve aşırı balgam gibi semptomlar için yaygın olarak kullanılır. Modern kimyasal bileşim ve klinik uygulamalar açısından, Peucedanum praeruptorum'un aktif bileşenleri esas olarak balgam söktürücü, kalp yetmezliği önleyici, kan basıncını düşürücü ve anti-enflamatuar gibi farmakolojik etkilere sahip Peucedanum praeruptorum A, Peucedanum praeruptorum B, Peucedanum praeruptorum Ding vb. dahil olmak üzere boynuz tipi kumarinlerdir. Eski zamanlardan beri, Qianhu'nun şifalı bitkisi çoğunlukla Anhui, Hunan, Jiangxi, Zhejiang, Jiangsu ve diğer yerlerde dağıtılan yabani kaynaklar olmuştur. Son yıllarda, kaynak talebindeki artış nedeniyle, yapay ekim yavaş yavaş yabani ekimin yerini almıştır. Başlıca ekim alanları Anhui'deki Ningguo, Hunan'daki Huarong, Guizhou'daki Zunyi, Chongqing'deki Fengjie ve diğer yerlerdir. Beyaz çiçekli Peucedanum praeruptorum'un yapay olarak yetiştirilmesinden sonra, doğuda Zhejiang'dan batıda Yunnan ve Sichuan'a kadar çeşitli üretim alanları bu bitkiyi tanıtmış ve ekmiştir. Bununla birlikte, üretim ortamlarındaki büyük farklılıklar nedeniyle, Peucedanum praeruptorum tıbbi malzemelerinin kalitesinde, değişen kalite seviyeleriyle birlikte önemli farklılıklar vardır. Buna ek olarak, beyaz çiçekli Peucedanum praeruptorum'un yapay ekimi, Peucedanum praeruptorum tıbbi malzemelerinin erken hasadını zorlayan erken bolting gibi sorunlara eğilimlidir. Yetersiz büyüme dönemi, tıbbi malzemelerin niteliksiz oranında önemli bir artışa yol açmaktadır. Çin Farmakopesi'nin 2020 baskısı, "Peucedanum praeruptorum A içeriğinin 0,90%'den az olmamasını ve Peucedanum praeruptorum B içeriğinin 0,24%'den az olmamasını" şart koşmaktadır. Ancak, piyasadaki Peucedanum praeruptorum tıbbi malzemelerinin kalite uygunluk oranı sadece 26%'dir ve kalifiye olmayan Peucedanum praeruptorum tıbbi malzemeleri piyasayı doldurmaktadır. Yüksek kaliteli yeni çeşitlerin yetiştirilmesi, uygun ekim tekniklerinin oluşturulması ve üretim alanlarında ilk işlemlerin standartlaştırılmasının yanı sıra, objektif, bilimsel ve makul kalite değerlendirme yöntemleri ve standartları da Qianhu tıbbi malzemelerinin kalitesini sağlamanın önemli yönleridir. Şu anda, Houttuynia cordata tıbbi malzemelerinin kalitesini değerlendirmenin anahtarı, beyaz çiçekli Houttuynia cordata'daki berberin ve berberin içeriğinde yatmaktadır. Ancak, bu genellikle Houttuynia cordata tıbbi malzemelerinin içsel kalitesini kapsamlı bir şekilde değerlendiremez ve geleneksel Çin tıbbının klinik uygulamasını doğrudan etkiler.

HPLC parmak izi, tıbbi malzemelerin içsel kalitesini kapsamlı bir şekilde yansıtabilir ve yaygın olarak tanınan bir kalite kontrol yöntemidir. Çoklu indeks içerik belirleme ile birleştirildiğinde, geleneksel Çin tıbbi malzemeleri için kalite kontrolün ana akımı haline gelmiştir. Hiyerarşik kümeleme analizi (HCA) ve temel bileşen analizi (PCA) gibi denetimsiz yöntemlerin yanı sıra kısmi en küçük kareler (PLS) ve yapay sinir ağları gibi denetimli kimyasal modelleme yöntemleri, tıbbi malzemelerin içsel kalitesini daha iyi yansıtabilir ve son yıllarda yaygın olarak kullanılan yeni yöntemlerdir. Bu çalışma, Houttuynia cordata'nın farklı kökenlerinden gelen tıbbi malzemeleri kapsamlı bir şekilde değerlendirmek için bir HPLC parmak izi oluşturarak ve küme analizi, temel bileşen analizi ve kısmi en küçük kareler regresyon analizi gibi kimyasal modelleme yöntemlerini birleştirerek önceki temele dayanmaktadır; Aynı zamanda, bergamot lakton, paeoniflorin, paeoniflorin ve paeoniflorin E olmak üzere dört kumarin bileşeninin içeriği, farklı bölgelerden gelen paeoniflorinin bileşimsel farklılıklarını açıklığa kavuşturmak ve paeoniflorin için kalite standartlarının geliştirilmesi için referans sağlamak üzere kantitatif olarak belirlenmiştir.

Houttuynia cordata'nın HPLC parmak izinin kromatografik koşullarını optimize etmek için, bu çalışma önceki araştırmalara dayanarak tespit dalga boyu, mobil faz ve akış hızını optimize etmiştir. Analiz tam dalga boyu tarama yöntemi kullanılarak gerçekleştirilmiş ve sonuçlar 190-245nm ve 290-340nm dalga boylarında absorpsiyon göstermiştir. Tespit dalga boyu olarak 321nm'nin seçilmesi büyük miktarda bilgiye, iyi yanıt değerine ve safsızlıklardan daha az girişime sahiptir. Bu nedenle 321nm tespit dalga boyu olarak belirlenmiştir. "Asetonitril su" ve "metanol su" mobil fazlarının incelenmesi, "metanol su "nun ayırma etkisinin daha iyi olduğunu ve 0.5% formik asit suyun daha iyi pik şekilleri elde edebileceğini göstermiştir. Bu nedenle, mobil faz olarak "metanol-0.5% formik asit suyu" belirlenmiştir. Ayrıca, akış üzerinde de incelemeler yapılmıştır 1, 0,8 ve 0,5 mL/dak akış hızlarında çalışılmış ve 0,5 mL/dak'nın daha iyi ayırma verimliliğine sahip olduğu görülmüştür. Bu nedenle, 0,5 mL/dak bu yöntem için akış hızı olarak belirlenmiştir.

Bu çalışmada Hunan, Anhui, Chongqing, Hubei, Guizhou, Yunnan ve diğer üretim alanlarından örnekleri analiz etmek için HPLC parmak izi kullanılmıştır. Çin şifalı bitkilerinden oluşan 16 partinin parmak izleri yüksek benzerlik göstermiş, toplam 21 ortak pik ve 7 bileşen tanımlanmıştır. Kimyasal desen analizinde, 16 parti numune üç kategoriye ayrılmıştır. Referans literatür raporlarına dayanarak, bunlar üç kategoriye ayrılabilir: Anhui'deki Ningguo ve Bozhou gibi otantik üretim alanları, çoğunlukla Hunan'daki Qianhu, Guizhou, Chongqing ve Yunnan'daki yüksek rakımlı üretim alanları. Temel bileşen ve PLS-DA analizi yoluyla, altı temel bileşenin kümülatif varyans katkı oranı 86.213% olmuştur. Daha ileri analizler, menşei ayırt eden ve menşein ana karakteristik bileşenleri olarak kullanılabilecek sekiz ortak tepe noktası belirlemiştir. Yüksek rakımlı Yunnan üretim alanlarından alınan Houttuynia cordata örneklerindeki berberin ve bergamot içeriği diğer üretim alanlarına göre önemli ölçüde daha yüksekken, berberin diğer üretim alanlarına göre biraz daha yüksektir. Yüksek rakımın Houttuynia cordata tıbbi malzemelerinde bergamot lakton, berberin ve berberin birikimine elverişli olduğunu tahmin ediyoruz. Yang ve arkadaşları yüksek rakımın Peucedanum praeruptorum ve Peucedanum praeruptorum'un oluşumu ve birikimi için elverişli olduğuna inanırken, Luo ve arkadaşları rakımın Peucedanum praeruptorum'un içeriği üzerinde Peucedanum praeruptorum'dan daha büyük bir etkiye sahip olduğuna inanmaktadır. Bu çalışma önceki araştırmalardan farklı olsa da, yüksek rakımlı ortamların Houttuynia cordata tıbbi malzemelerinin kalitesinin oluşumuna daha elverişli olduğu açıklığa kavuşturulabilir.

Çoklu indeks bileşen içeriği belirleme analizinde, toplam 9 parti Peucedanum praeruptorum örneği, 56.25% ile Peucedanum praeruptorum A için Çin Farmakopesi gerekliliklerini karşılamıştır. Bununla birlikte, hiçbir parti Peucedanum praeruptorum B için limit gerekliliklerini karşılamamıştır ve en yüksek değer sadece 2,01 mg/g'dır. Xu vd. ve Liu vd. ayrıca Houttuynia cordata tıbbi bitkisinde, beyaz çiçekli Houttuynia cordata A'nın standardı karşılama olasılığının daha yüksek olduğunu, beyaz çiçekli Houttuynia cordata B'nin standardı karşılamama olgusunun ise daha yaygın olduğunu tespit etmiştir. Beyaz çiçekli Houttuynia cordata bir kez çiçek açan çok yıllık bir bitkidir. Büyük ölçekli ekim, yıllık bir çeşide dönüşmesine yol açmıştır ve yetersiz yaş, Houttuynia cordata tıbbi malzemelerinin kalitesindeki düşüşün önemli bir nedenidir. Buna ek olarak, beyaz çiçekli Houttuynia cordata erken boltinge eğilimlidir ve "barut tohumları" (yıllık tohumlar) piyasayı doldurmaktadır. Uzun süreli yinelemeli seleksiyon yoluyla, Houttuynia cordata tıbbi malzemelerinin kalitesi yapay olarak seçici bir şekilde yıldan yıla düşmektedir. Qianhu şifalı bitkilerinin kalitesindeki yaygın düşüşün klinik etkinliği etkileyip etkilemediğini belirlemek için daha fazla araştırmaya ihtiyaç vardır.

Literatür raporlarına göre, Peucedanum praeruptorum A ve Peucedanum praeruptorum B içeriği arasında belirli bir derecede negatif korelasyon vardır. Bu çalışma da bu eğilimi bulmuştur, ancak belirli nedenlerin daha fazla doğrulanması gerekmektedir. Piyasadaki Çin şifalı bitkilerinin kalitesizliğinin nedenleri, ekolojik çevre, genetik faktörler ve yapay müdahalenin yanı sıra, mevcut kalite değerlendirmesiyle de yakından ilgili olabilir. Mevcut standartlarda, piyasadaki satış öncesi Hu tıbbi malzemelerinin yeterlilik oranı, özellikle de Qianhu tıbbi malzemelerinin klinik kullanımı ve endüstriyel gelişimi ile artık uyumlu olmayan Baihua Qianhu Yi'nin içeriğinin uygunluk oranı son derece düşüktür. Bu bağlamda, Qiu ve arkadaşları Peucedanum praeruptorum tıbbi malzemelerinin kalitesini kapsamlı bir şekilde değerlendirmek için Peucedanum praeruptorum A ve Peucedanum praeruptorum B oranının veya toplamının kullanımını araştırmıştır. Liu ve diğerleri, Xiao ve diğerleri, Shi ve diğerleri Peucedanum praeruptorum tıbbi malzemelerinin parmak izi spektrumu üzerinde farklı açılardan değerlendirme çalışmaları yapmış ve iyi beklentiler elde etmişlerdir.

Bu çalışmada tıbbi malzemelerin kalitesini analiz etmek ve değerlendirmek için parmak izi analizi, çoklu indeks bileşen analizi ve kimyasal model analizinin bir kombinasyonu kullanılmıştır; bu da Qianhu tıbbi malzemeleri için kalite değerlendirme standartlarının formüle edilmesinde önemli bir referans niteliği taşımaktadır. Bununla birlikte, bu çalışmada toplanan örneklerin çoğunlukla pazarlardan, dikim üslerinden ve diğer kaynaklardan elde edilmiş olması, germplazm, ekolojik çevre, dikim teknikleri ve diğer bilgilerin ayrıntılı kayıtlarının bulunmaması bir eksikliktir. Örnek tutarlılığının sınırlandırılmasının bu çalışma üzerinde bazı etkileri olabilir. Sonraki araştırmalarda, ekolojik çevrenin Houttuynia cordata'nın kalitesi üzerindeki etkisinin incelenmesini güçlendirmek, beyaz çiçekli Houttuynia cordata'nın erken boltinginin temel sorununu ele almak, kalite standardı araştırmasının örneklem boyutunu artırmak ve pazar beklentilerini karşılayan ve endüstrinin sürdürülebilir gelişimini teşvik eden kalite değerlendirme standartları geliştirmek için çaba gösterilmelidir.