Оценка качества порошка Yupingfeng на основе ВЭЖХ-отпечатка пальца и многокомпонентного определения содержания в сочетании с хемометрикой
Юпин Фэнсан впервые был записан в "Методе сердца Даньси" Чжу Чжэньхэна времен династии Юань. Он состоит из трех трав: ветреницы, астрагала и Atractylodes macrocephala. В традиционной китайской медицине существует поговорка: "Сочетание Yuping - это меньшее и более утонченное, а Qishu - ветрозащитное и треножное движение ног". Эта формула питает ци, укрепляет внешность и останавливает потоотделение. Она используется для тех, у кого поверхностный дефицит, но не твердый, самопотоотделение и отвращение к ветру, бледный цвет лица, или для тех, кто подвержен злу ветра из-за недостатка тела. Хуанци, традиционное китайское лекарство, сладкое и теплое по своей природе, питает ци и стимулирует ян, стабилизирует поверхность и останавливает потоотделение. Он оказывает противоопухолевое, сердечно-сосудистое и цереброваскулярное, иммунное, легочное, почечное, печеночное, кишечное, регулирующее кровяное давление, антивозрастное, профилактическое и лечебное действие при остеопорозе; лекарственное растение Atractylodes macrocephala имеет сладкий и слегка теплый вкус, который может оживлять селезенку и ци, высушивать сырость и способствовать диурезу. Atractylodes macrocephala помогает усилить функцию питания ци; Windproof - это добавка для рассеивания ветра и облегчения боли, а также для подавления сырости и облегчения боли. Huangqi в сочетании с Atractylodes macrocephala предотвращает вытекание пота и затрудняет проникновение внешних патогенов внутрь. В этой формуле в основном используются препараты, тонизирующие ци, в сочетании с небольшим количеством средств для рассеивания ветра и облегчения поверхности, чтобы предотвратить повреждение ветра и способствовать усвоению питательных веществ. Обычно используется в клинической практике для лечения конституционального дефицита ци, эффективно снижает частоту рецидивирующих инфекций верхних дыхательных путей, детской астмы, хронической крапивницы, экземы и рака печени.
В настоящее время в литературе имеются некоторые сообщения об анализе качества порошка Юпинфэн, однако на качество отвара влияют место происхождения, методы обработки и т.д., а также существуют определенные различия в клинической эффективности. Поэтому в данном исследовании методом ВЭЖХ были получены спектры отпечатков пальцев 15 партий порошка Юпинфэн, и одновременно определено содержание 11 компонентов в порошке Юпинфэн. В то же время была проведена комплексная оценка качества с помощью хемометрических методов, что создало определенную основу для установления стандартов качества отвара порошка Юйпинфэн, выяснения фармакологического механизма порошка Юйпинфэн и рационального клинического применения лекарственных средств.
При оптимизации метода экстракции тестового раствора Yupingfeng Powder в данном эксперименте сравнивались три метода экстракции: ультразвук, рефлюкс и непрерывный рефлюкс. В качестве показателей анализировали количество хроматографических пиков, степень разделения и степень извлечения 11 целевых компонентов, количественно определенных на хроматограмме порошка Юпинфэн. RSD относительного времени удерживания хроматографических пиков составлял менее 3,0%, и наблюдалась значительная разница в общей скорости экстракции. Среди них ультразвуковой метод и метод экстракции позволили получить более высокое содержание вещества, но время экстракции было более длительным. В итоге ультразвуковой метод был всесторонне рассмотрен для экстракции.
В ходе эксперимента были исследованы различные системы подвижных фаз, такие как метанол-вода и ацетонитрил-вода. Результаты показали, что ацетонитрильная вода обладает меньшими помехами и лучшим эффектом разделения, меньшим временем анализа и стабильной базовой линией в процессе градиентного элюирования. Поэтому в качестве подвижной фазы была выбрана ацетонитрильная вода.
Сравнивая хроматограммы 11 соединений, обнаруженных при пяти длинах волн 230, 254, 276, 300 и 320 нм, было обнаружено, что Huangqi имеет относительно больше характерных пиков, обнаруженных при длине волны 230 нм, с высоким разделением пиков и максимальным поглощением; Количество характерных пиков, обнаруженных Fangfeng при длинах волн 230 и 254 нм, практически одинаково; Atractylodes macrocephala имеет максимальное поглощение при длине волны 230 нм, в то время как Atractylodes macrocephala I и Atractylodes macrocephala III имеют более слабое поглощение при других длинах волн. Поэтому в качестве длины волны обнаружения использовали 230 нм.
В ходе данного эксперимента были получены ВЭЖХ-спектры отпечатков пальцев для 15 партий порошка Юпинфэн. Основными количественными показателями для определения содержания были глюкозинолаты, изофлавоны, мангиферин и мангиферин в Astragalus membranaceus, а также сесквитерпеноидные гликозиды, сесквитерпеноидные гликозиды, 5-O-метилвисамминоловые гликозиды и паэоновые гликозиды в Windproof, и Atractylodes macrocephala III, Atractylodes macrocephala I, и Atractylodes macrocephala II в Atractylodes macrocephala. Для исследования целостности и различий разных партий порошка Yupingfeng были использованы такие стехиометрические методы, как HCA, PCA и OPLS-DA. Результаты показали, что сходство спектров ВЭЖХ-отпечатков 15 партий образцов варьируется от 0,835 до 0,965, результаты анализа HCA и PCA в основном совпадают, и образцы делятся на две категории. В сочетании с информацией о происхождении отваров выяснилось, что отвары первой категории в основном происходят из Внутренней Монголии и других регионов, а отвары второй категории в основном происходят из Чжэцзяна и других регионов. Между севером и югом существуют значительные различия в почве, климате и методах выращивания, а отвары в каждой аптеке поступают с разных заводов по переработке отваров разного происхождения. Аутентичные китайские травяные лекарства и отличное происхождение являются ключевыми факторами, влияющими на качество отваров. Эффективные ингредиенты, содержащиеся в китайских травяных лекарствах, варьируются из-за различных условий произрастания. Поэтому существует определенная взаимосвязь между качеством отваров и производством отваров традиционной китайской медицины, включая происхождение лекарственного сырья, сезон сбора и обработки, а также обработку и производство. Метод оценки качества, разработанный нашим исследовательским институтом, прост и обладает хорошей воспроизводимостью, что может служить ориентиром для производителей лекарств в процессе подготовки сырья и препаратов, а также способствует клиническому рациональному использованию порошка Юпинфэн.