Kvalitetsevaluering af Yupingfeng-pulver baseret på HPLC-fingeraftryk og bestemmelse af multikomponentindhold kombineret med kemometri
Yuping Fengsan blev første gang beskrevet i Zhu Zhenhengs "Danxi Heart Method" fra Yuan-dynastiet. Den består af tre urter: vindtæt, astragalus og Atractylodes macrocephala. I traditionel kinesisk medicin er der et ordsprog, der siger, at "Yuping-kombinationen er mindre og mere raffineret, mens Qishu er vindtæt og stativets fodbevægelse". Denne formel nærer qi, stivner det ydre og stopper sveden. Den bruges til dem med overfladisk mangel, men ikke fast, selvsvedende og aversion mod vind, bleg hudfarve eller dem, der er modtagelige for ond vind på grund af kropsmangel. Huangqi, en traditionel kinesisk medicin, er sød og varm af natur, nærer qi og fremmer yang, stabiliserer overfladen og stopper svedtendens. Det har antitumor, kardiovaskulær og cerebrovaskulær, immunfunktion, lungefunktion, nyrevæv, leverskade, tarmfunktion, blodtryksregulering, anti-aging og forebyggelse og behandling af osteoporose; Lægemiddelurten Atractylodes macrocephala har en sød og lidt varm smag, som kan styrke milten og qi, tørre fugt og fremme diurese. Atractylodes macrocephala kan hjælpe med at styrke funktionen af nærende qi; Windproof er et supplement til at fordrive vind og lindre smerte samt undertrykke fugt og lindre smerte. Huangqi kombineret med Atractylodes macrocephala forhindrer sved i at lække ud og gør det vanskeligt for eksterne patogener at invadere internt. Denne formel bruger hovedsageligt Qi-tonificerende lægemidler kombineret med små mængder vinddæmpende og overfladelindrende produkter for at forhindre vindskader og fremme optagelsen af næringsstoffer. Anvendes ofte i klinisk praksis til behandling af Qi-mangel, reducerer effektivt hyppigheden af tilbagevendende infektioner i de øvre luftveje, børneastma, kronisk urticaria, eksem og leverkræft.
På nuværende tidspunkt er der nogle litteraturrapporter om kvalitetsanalysen af Yupingfeng-pulver, men kvaliteten af afkogningsstykkerne påvirkes af oprindelsesstedet, behandlingsmetoder osv. og der er også visse forskelle i klinisk effekt. Derfor blev der i denne undersøgelse etableret HPLC-fingeraftryksspektre af 15 partier Yupingfeng-pulver ved hjælp af HPLC-metoden, og indholdet af 11 komponenter i Yupingfeng-pulver blev samtidig bestemt. Samtidig blev kvaliteten grundigt evalueret ved at kombinere kemometriske metoder, hvilket gav et vist grundlag for at etablere kvalitetsstandarder for afkog af Yupingfeng-pulver, belyse den farmakologiske mekanisme for Yupingfeng-pulver og vejlede om rationel klinisk lægemiddelbrug.
Ved optimering af ekstraktionsmetoden for Yupingfeng Powder-testopløsning sammenlignede dette eksperiment tre ekstraktionsmetoder: ultralyd, tilbagesvaling og kontinuerlig tilbagesvaling. Antallet af kromatografiske toppe, separationsgrad og ekstraktionshastighed for 11 målkomponenter, der blev kvantitativt bestemt i Yupingfeng-pulverets kromatogram, blev analyseret som indikatorer. RSD for den relative retentionstid for de kromatografiske toppe var mindre end 3,0%, og der var en signifikant forskel i den samlede ekstraktionshastighed. Blandt dem opnåede ultralyds- og ekstraktionsmetoder højere stofindhold, men ekstraktionstiden var længere. Endelig blev ultralydsmetoden grundigt overvejet til ekstraktion.
I forsøget blev forskellige mobilfasesystemer som methanolvand og acetonitrilvand undersøgt. Resultaterne viste, at acetonitrilvand havde mindre interferens og bedre separationseffekt, kortere analysetid og en stabil basislinje under gradientelueringsprocessen. Derfor blev acetonitrilvand valgt som mobil fase.
Ved at sammenligne kromatogrammerne af 11 forbindelser, der blev påvist ved fem bølgelængder på 230, 254, 276, 300 og 320 nm, blev det konstateret, at Huangqi havde relativt flere karakteristiske toppe, der blev påvist ved bølgelængden 230 nm, med høj topadskillelse og maksimal absorption; Antallet af karakteristiske toppe påvist af Fangfeng ved detektionsbølgelængder på 230 og 254 nm er stort set det samme; Atractylodes macrocephala har den maksimale absorption ved en detektionsbølgelængde på 230 nm, mens Atractylodes macrocephala I og Atractylodes macrocephala III har svagere absorption ved andre bølgelængder. Derfor blev 230 nm brugt som detektionsbølgelængde.
Dette eksperiment etablerede HPLC-fingeraftryksspektre for 15 partier af Yupingfeng-pulver. De vigtigste kvantitative indikatorer for indholdsbestemmelse var glucosinolater, isoflavoner, mangiferin og mangiferin i Astragalus membranaceus samt sesquiterpenoidglykosider, sesquiterpenoidglykosider, 5-O-methylvisamminolglykosider og paeonolglykosider i Windproof og Atractylodes macrocephala III, Atractylodes macrocephala I og Atractylodes macrocephala II i Atractylodes macrocephala. Støkiometriske metoder som HCA, PCA og OPLS-DA blev brugt til at undersøge integriteten og forskellene mellem forskellige partier af Yupingfeng-pulver. Resultaterne viste, at ligheden mellem HPLC-fingeraftryksspektrene for de 15 partier af prøver varierede fra 0,835 til 0,965. Resultaterne af HCA- og PCA-analysen er stort set konsistente, og prøverne er opdelt i to kategorier. Kombineret med oplysningerne om afkogningsstykkernes oprindelse viser det sig, at afkogningsstykkerne i den første kategori for det meste kommer fra Indre Mongoliet og andre regioner, mens afkogningsstykkerne i den anden kategori for det meste kommer fra Zhejiang og andre regioner. Der er betydelige forskelle i jordbund, klima og dyrkningsmetoder mellem nord og syd, og afkogningsstykkerne i hvert apotek kommer fra forskellige fabrikker, der forarbejder afkogningsstykker med forskellig oprindelse. Autentiske kinesiske plantelægemidler og fremragende oprindelse er de vigtigste faktorer, der påvirker kvaliteten af afkogningsstykkerne. De effektive ingredienser i kinesisk urtemedicin varierer på grund af forskellige vækstmiljøer. Derfor er der en vis sammenhæng mellem kvaliteten af afkogningsstykker og produktionen af afkogningsstykker til traditionel kinesisk medicin, herunder de medicinske materialers oprindelse, sæsonen for høst og forarbejdning samt forarbejdning og fremstilling. Den kvalitetsevalueringsmetode, der er etableret af vores forskningsinstitut, er enkel og har god repeterbarhed, hvilket kan give reference til lægemiddelproducenter i processen med råvarer og forberedelse og bidrager til den kliniske rationelle anvendelse af Yupingfeng-pulver.