Evaluación de la calidad del polvo de Yupingfeng a partir de la huella dactilar por HPLC y la determinación del contenido multicomponente combinada con la quimiometría
Yuping Fengsan aparece registrado por primera vez en el "Método del Corazón Danxi" de Zhu Zhenheng, de la dinastía Yuan. Consta de tres hierbas: a prueba de viento, astrágalo y Atractylodes macrocephala. En la medicina tradicional china, hay un dicho que dice que "la combinación Yuping es menos y más refinado, mientras que Qishu a prueba de viento y el movimiento del pie trípode". Esta fórmula nutre el qi, solidifica el exterior y detiene la sudoración. Se utiliza para aquellos con deficiencia superficial pero no firme, sudoración propia y aversión al viento, tez pálida, o aquellos que son susceptibles al mal del viento debido a la deficiencia corporal. Huangqi, una medicina tradicional china, es de naturaleza dulce y cálida, nutre el qi y promueve el yang, estabiliza la superficie y detiene la sudoración. Tiene efectos antitumorales, cardiovasculares y cerebrovasculares, sobre la función inmunológica, la función pulmonar, el tejido renal, las lesiones hepáticas, la función intestinal, la regulación de la presión sanguínea, el antienvejecimiento y la prevención y el tratamiento de la osteoporosis; La hierba medicinal Atractylodes macrocephala tiene un sabor dulce y ligeramente cálido, que puede vigorizar el bazo y el qi, secar la humedad y promover la diuresis. Atractylodes macrocephala puede ayudar a fortalecer la función de nutrir el qi; Windproof es un suplemento para disipar el viento y aliviar el dolor, así como para suprimir la humedad y aliviar el dolor. Huangqi combinado con Atractylodes macrocephala evita la salida del sudor y dificulta la invasión interna de patógenos externos. Esta fórmula utiliza principalmente medicamentos tonificantes del Qi, combinados con pequeñas cantidades de productos que disipan el viento y alivian la superficie para prevenir los daños causados por el viento y favorecer la absorción de nutrientes. Se utiliza comúnmente en la práctica clínica para tratar la constitución de deficiencia de Qi, reducir eficazmente la frecuencia de infecciones recurrentes del tracto respiratorio superior, asma pediátrica, urticaria crónica, eczema y cáncer de hígado.
En la actualidad, existen algunos informes bibliográficos sobre el análisis de la calidad del polvo de Yupingfeng, pero la calidad de los trozos de decocción se ve afectada por el lugar de origen, los métodos de procesamiento, etc., y también hay ciertas diferencias en la eficacia clínica. Por lo tanto, en este estudio, se establecieron los espectros de huellas dactilares por HPLC de 15 lotes de polvo de Yupingfeng mediante el método HPLC, y se determinó simultáneamente el contenido de 11 componentes en el polvo de Yupingfeng. Al mismo tiempo, se evaluó exhaustivamente la calidad combinando métodos quimiométricos, proporcionando una base segura para establecer normas de calidad para la decocción de polvo de Yupingfeng, dilucidar el mecanismo farmacológico del polvo de Yupingfeng y guiar el uso clínico racional del medicamento.
Al optimizar el método de extracción de la solución de prueba del polvo de Yupingfeng, este experimento comparó tres métodos de extracción: ultrasonido, reflujo y reflujo continuo. Se analizaron como indicadores el número de picos cromatográficos, el grado de separación y la tasa de extracción de 11 componentes objetivo determinados cuantitativamente en el cromatograma del polvo de Yupingfeng. La RSD del tiempo de retención relativo de los picos cromatográficos fue inferior a 3,0%, y hubo una diferencia significativa en la tasa de extracción total. Entre ellos, los métodos de ultrasonidos y de extracción obtuvieron un mayor contenido de sustancias, pero el tiempo de extracción fue más largo. Por último, se consideró exhaustivamente el método de ultrasonidos para la extracción.
En el experimento se investigaron diferentes sistemas de fase móvil, como agua metanol y agua acetonitrilo. Los resultados mostraron que el agua de acetonitrilo tenía menos interferencias y un mejor efecto de separación, un tiempo de análisis más corto y una línea de base estable durante el proceso de elución del gradiente. Por lo tanto, se seleccionó el agua de acetonitrilo como fase móvil.
Comparando los cromatogramas de 11 compuestos detectados a cinco longitudes de onda de 230, 254, 276, 300 y 320 nm, se observó que Huangqi tenía relativamente más picos característicos detectados a la longitud de onda de 230 nm, con alta separación de picos y absorción máxima; El número de picos característicos detectados por Fangfeng a longitudes de onda de detección de 230 y 254 nm es básicamente el mismo; Atractylodes macrocephala tiene la absorción máxima a una longitud de onda de detección de 230 nm, mientras que Atractylodes macrocephala I y Atractylodes macrocephala III tienen una absorción más débil a otras longitudes de onda. Por lo tanto, se utilizó 230 nm como longitud de onda de detección.
Este experimento estableció los espectros de huellas dactilares por HPLC para 15 lotes de polvo de Yupingfeng. Los principales indicadores cuantitativos para la determinación del contenido fueron glucosinolatos, isoflavonas, mangiferina y mangiferina en Astragalus membranaceus, así como glucósidos sesquiterpenoides, glucósidos sesquiterpenoides, glucósidos de 5-O-metilvisamminol y glucósidos de paeonol en Windproof, y Atractylodes macrocephala III, Atractylodes macrocephala I y Atractylodes macrocephala II en Atractylodes macrocephala. Se utilizaron métodos estequiométricos como HCA, PCA y OPLS-DA para investigar la integridad y las diferencias de los distintos lotes de polvo de Yupingfeng. Los resultados mostraron que la similitud de los espectros de huellas dactilares HPLC de los 15 lotes de muestras oscilaba entre 0,835 y 0,965, Los resultados de los análisis HCA y PCA son básicamente coherentes, y las muestras se dividen en dos categorías. En combinación con la información sobre el origen de las piezas de decocción, se observa que las piezas de decocción de la primera categoría proceden en su mayoría de Mongolia Interior y otras regiones, mientras que las piezas de decocción de la segunda categoría proceden en su mayoría de Zhejiang y otras regiones. Existen diferencias significativas en el suelo, el clima y los métodos de cultivo entre el norte y el sur, y las piezas de decocción de cada farmacia proceden de diferentes fábricas de procesamiento de piezas de decocción de distintos orígenes. Las auténticas hierbas medicinales chinas y los excelentes orígenes son los factores clave que afectan a la calidad de las piezas de decocción. Los ingredientes eficaces contenidos en las hierbas medicinales chinas varían debido a los diferentes entornos de crecimiento. Por lo tanto, existe una cierta correlación entre la calidad de las piezas de decocción y la producción de piezas de decocción de medicina tradicional china, incluyendo el origen de los materiales medicinales, la temporada de recolección y procesamiento, y el procesamiento y la fabricación. El método de evaluación de la calidad establecido por nuestro instituto de investigación es sencillo y tiene buena repetibilidad, lo que puede servir de referencia para los fabricantes de medicamentos en el proceso de materias primas y preparación, y es propicio para el uso racional clínico del polvo de Yupingfeng.