A HPLC-ujjlenyomat, a kémiai mintafelismerés és a Houttuynia cordata gyógyászati anyagok minőségének több indexkomponensű kvantitatív értékelése a HPLC-ujjlenyomat alapján
A Peucedamum praeruptorum Dunn gyógynövényt az Umbelliferae családba tartozó fehér virágú Peucedamum praeruptorum Dunn növény szárított gyökeréből nyerik. Először a "Híres orvosok feljegyzései" című könyvben jelent meg, és a szélhő eloszlatására, a qi csökkentésére és a váladék feloldására van hatással. Általában olyan tünetekre használják, mint a váladékhő köhögés és asztma, sárga sűrű váladék, szélhő köhögés és túlzott váladék. A modern kémiai összetétel és a klinikai alkalmazások szempontjából a Peucedanum praeruptorum hatóanyagai főként szarv típusú kumarinok, beleértve a Peucedanum praeruptorum A, Peucedanum praeruptorum B, Peucedanum praeruptorum Ding stb., amelyek farmakológiai hatásai közé tartozik a köptető, szívelégtelenség elleni, vérnyomáscsökkentő és gyulladáscsökkentő. Az ősi idők óta a Qianhu gyógynövénye főként vadon termő források, amelyek Anhui, Hunan, Jiangxi, Zhejiang, Jiangsu és más helyeken terjedtek el. Az utóbbi években az erőforrás iránti kereslet megugrása miatt a mesterséges termesztés fokozatosan felváltotta a vadon termesztést. Fő termesztési területei: Ningguo Anhui-ban, Huarong Hunan-ban, Zunyi Guizhou-ban, Fengjie Chongqing-ban és más helyeken. A fehér virágú Peucedanum praeruptorum mesterséges termesztése után különböző termőterületek vezették be és telepítették, a keleti Zhejiangtól a nyugati Yunnanig és Sichuanig. A termelési környezetek közötti nagy különbségek miatt azonban a Peucedanum praeruptorum gyógynövények minőségében jelentős különbségek vannak, és a minőségük is eltérő. Ezenkívül a fehér virágú Peucedanum praeruptorum mesterséges ültetése hajlamos olyan problémákra, mint a korai bimbósodás, ami a Peucedanum praeruptorum gyógynövények korai betakarítását kényszeríti ki. Az elégtelen növekedési időszak a gyógyászati anyagok minősíthetetlen arányának jelentős növekedéséhez vezet. A Kínai Gyógyszerkönyv 2020-as kiadása előírja, hogy "a Peucedanum praeruptorum A tartalma nem lehet kevesebb, mint 0,90%, és a Peucedanum praeruptorum B tartalma nem lehet kevesebb, mint 0,24%". A Peucedanum praeruptorum gyógyászati anyagok minőségi megfelelési aránya a piacon azonban csak 26%, és a nem minősített Peucedanum praeruptorum gyógyászati anyagok elárasztják a piacot. A kiváló minőségű új fajták termesztése, a megfelelő ültetési technikák kialakítása és a kezdeti feldolgozás szabványosítása mellett a termelési területeken az objektív, tudományos és ésszerű minőségértékelési módszerek és szabványok is fontos szempontok a Qianhu gyógyászati anyagok minőségének biztosításában. Jelenleg a Houttuynia cordata gyógyászati anyagok minőségértékelésének kulcsa a fehér virágú Houttuynia cordata berberin és berberin tartalma. Ez azonban gyakran nem képes átfogóan értékelni a Houttuynia cordata gyógyászati anyagok belső minőségét, és közvetlenül befolyásolja a hagyományos kínai orvoslás klinikai alkalmazását.

A HPLC-ujjlenyomat átfogóan képes tükrözni a gyógyászati anyagok belső minőségét, és széles körben elismert minőségellenőrzési módszer. A többindexes tartalom meghatározásával kombinálva a hagyományos kínai gyógyászati anyagok minőségellenőrzésének főáramává vált. A felügyelet nélküli módszerek, mint a hierarchikus klaszterelemzés (HCA) és a főkomponens-elemzés (PCA), valamint a felügyelt kémiai modellezési módszerek, mint a részleges legkisebb négyzetek (PLS) és a mesterséges neurális hálózatok, jobban tükrözik a gyógyászati anyagok belső minőségét, és az utóbbi években széles körben használt új módszerek. Ez a tanulmány a korábbi alapokra épül, HPLC-ujjlenyomatot hoz létre, és olyan kémiai modellezési módszereket kombinál, mint a klaszterelemzés, a főkomponens-elemzés és a részleges legkisebb négyzetek regresszióelemzése, hogy átfogóan értékelje a Houttuynia cordata különböző eredetű gyógyászati anyagait; Ugyanakkor négy kumarin komponens, nevezetesen a bergamott-lakton, a paeoniflorin, a paeoniflorin és a paeoniflorin E tartalmát kvantitatív módon határozták meg, hogy tisztázzák a különböző régiókból származó paeoniflorin összetételbeli különbségeit, referenciát biztosítva a paeoniflorin minőségi szabványainak kidolgozásához.

A Houttuynia cordata HPLC-ujjlenyomatának kromatográfiás körülményeinek optimalizálása érdekében ez a tanulmány a korábbi kutatások alapján optimalizálta a detektálási hullámhosszt, a mobilfázist és az áramlási sebességet. Az elemzést teljes hullámhosszú pásztázó módszerrel végeztük, és az eredmények 190-245 nm és 290-340 nm hullámhosszon mutattak abszorpciót. A 321 nm-es detektálási hullámhossz kiválasztása nagy mennyiségű információval, jó válaszértékkel és kevesebb szennyeződésből származó interferenciával jár. Ezért a 321 nm-t határoztuk meg detektálási hullámhosszként. Az "acetonitril víz" és a "metanol víz" mobilfázisok vizsgálata azt mutatta, hogy a "metanol víz" elválasztó hatása jobb volt, és a 0,5% hangyasavas vízzel jobb csúcsformákat lehetett elérni. Ezért a "metanol-0,5% hangyasavas víz" fázist határozták meg mozgófázisként. Ezenkívül vizsgálatokat végeztek az áramlás 1, 0,8 és 0,5 ml/perc sebességgel, és megállapították, hogy a 0,5 ml/perc jobb elválasztási hatékonysággal rendelkezik. Ezért a módszerhez 0,5 ml/perc áramlási sebességet határoztunk meg.

Ebben a tanulmányban HPLC-ujjlenyomat-elemzéssel elemezték a Hunan, Anhui, Chongqing, Hubei, Guizhou, Yunnan és más termőterületekről származó mintákat. A 16 kínai gyógynövénytétel ujjlenyomata nagyfokú hasonlóságot mutatott, összesen 21 közös csúcsot és 7 komponenst azonosítottak. A kémiai mintaelemzés során a 16 tétel mintát három kategóriába sorolták. A szakirodalmi referenciák alapján három kategóriába sorolhatók: autentikus termőterületek, mint például Ningguo és Bozhou Anhui-ban, Qianhu főként Hunanban, Guizhou, Chongqing és a magasan fekvő termőterületek Yunnanban. A főkomponens és a PLS-DA elemzés révén a hat főkomponens kumulatív variancia-hozzájárulási aránya 86,213% volt. A további elemzés nyolc közös csúcsot azonosított, amelyek megkülönböztetik a származást, és amelyek a származás fő jellemző összetevőiként használhatók. A berberin és a bergamott tartalma a magasan fekvő Yunnan termőterületéről származó Houttuynia cordata mintákban szignifikánsan magasabb, mint más termőterületeken, míg a berberiné kissé magasabb, mint más termőterületeken. Feltételezzük, hogy a nagy tengerszint feletti magasság elősegíti a bergamott-lakton, a berberin és a berberin felhalmozódását a Houttuynia cordata gyógyászati anyagokban. Yang és munkatársai úgy vélik, hogy a nagy tengerszint feletti magasság elősegíti a Peucedanum praeruptorum és a Peucedanum praeruptorum keletkezését és felhalmozódását, míg Luo és munkatársai úgy vélik, hogy a tengerszint feletti magasság nagyobb hatással van a Peucedanum praeruptorum tartalmára, mint a Peucedanum praeruptoruméra. Bár ez a tanulmány eltér a korábbi kutatásoktól, tisztázható, hogy a magaslati környezet jobban elősegíti a Houttuynia cordata gyógyászati anyagok minőségének kialakulását.

A multiindex komponens tartalom meghatározásának elemzése során a Peucedanum praeruptorum minták összesen 9 tétele felelt meg a Kínai Gyógyszerkönyv Peucedanum praeruptorum A-ra vonatkozó követelményeinek, ami 56,25%-t tett ki. Egyetlen tétel sem felelt meg azonban a Peucedanum praeruptorum B-re vonatkozó határértékkövetelményeknek, a legmagasabb érték mindössze 2,01 mg/g volt. Xu et al. és Liu et al. azt is megállapította, hogy a Houttuynia cordata gyógynövény esetében a fehér virágú Houttuynia cordata A nagyobb valószínűséggel felel meg a szabványnak, míg a fehér virágú Houttuynia cordata B esetében gyakoribb az a jelenség, hogy nem felel meg a szabványnak. A fehér virágú Houttuynia cordata egy évelő növény, amely egyszer virágzik. A nagyüzemi ültetvények egynyári fajtává váltak, és a Houttuynia cordata gyógynövény minőségének romlásában fontos szerepet játszik az elégtelen életkor. Ezenkívül a fehér virágú Houttuynia cordata hajlamos a korai elvirágzásra, és a "puskaporos magok" (egynyári magok) elárasztják a piacot. A hosszú távú iteratív szelekció révén a Houttuynia cordata gyógyászati anyagok minősége évről évre mesterségesen szelektíven romlik. További kutatásokra van szükség annak megállapítására, hogy a Qianhu gyógynövények minőségének széles körű romlása befolyásolja-e a klinikai hatékonyságot.

A szakirodalmi jelentések szerint a Peucedanum praeruptorum A és a Peucedanum praeruptorum B tartalma között bizonyos fokú negatív korreláció van. Ez a tanulmány is ezt a tendenciát találta, de a konkrét okokat tovább kell erősíteni. A piacon lévő kínai gyógynövények rossz minőségének okai az ökológiai környezet, a genetikai tényezők és a mesterséges beavatkozás mellett szorosan összefügghetnek a jelenlegi minőségértékeléssel is. A jelenlegi szabványok szerint a piacon lévő Hu gyógyászati anyagok értékesítés előtti minősítési aránya rendkívül alacsony, különösen a Baihua Qianhu Yi tartalmának megfelelőségi aránya, ami már nincs összhangban a Qianhu gyógyászati anyagok klinikai felhasználásával és ipari fejlődésével. Ebben az összefüggésben Qiu et al. feltárta a Peucedanum praeruptorum A és a Peucedanum praeruptorum B arányának vagy összegének használatát a Peucedanum praeruptorum gyógyászati anyagok minőségének átfogó értékelésére. Liu et al., Xiao et al., Shi et al. mindannyian különböző szempontokból végeztek értékelő vizsgálatokat a Peucedanum praeruptorum gyógyászati anyagok ujjlenyomat-spektrumáról, és jó eredményeket értek el.

Ez a tanulmány az ujjlenyomat-elemzés, a többindexes komponenselemzés és a kémiai modellelemzés kombinációját használta a gyógyászati anyagok minőségének elemzésére és értékelésére, ami fontos referenciaként szolgál a Qianhu gyógyászati anyagok minőségértékelési szabványainak megfogalmazásához. Hiányossága azonban, hogy a tanulmányban gyűjtött minták főként piacokról, ültetvényekről és egyéb forrásokból származnak, a csíraplazma, az ökológiai környezet, az ültetési technikák és egyéb információk részletes nyilvántartása nélkül. A minták konzisztenciájának korlátozása hatással lehet erre a tanulmányra. A későbbi kutatás során erőfeszítéseket kell tenni az ökológiai környezetnek a Houttuynia cordata minőségére gyakorolt hatásának vizsgálatára, a fehér virágú Houttuynia cordata korai elvirágzásának alapvető kérdésére, a minőségi szabványok kutatásának mintaméretének növelésére, valamint a piaci elvárásoknak megfelelő és az ágazat fenntartható fejlődését elősegítő minőségértékelési szabványok kidolgozására.