Recherche sur l'empreinte digitale UHPLC et la reconnaissance du motif chimique du Gouteng
L'édition 2020 de la pharmacopée chinoise inclut Uncaria rhynchhophylla (Miq.) Miq.ex Havil Uncaria macrophylla Wall, Uncaria hirsuta Havil Tiges et branches séchées et crochues d'Uncaria sinensis (Oliv.) Havil. ou d'Uncaria sessilifructus Roxb. Actuellement, les principales lianes médicinales circulant sur le marché pharmaceutique sont Uncaria rhynchhophylla (Miq.) Miq.ex Havil. Le gouteng a pour effet de dissiper la chaleur et de calmer le foie, de calmer le vent et de calmer le sursaut. Il peut être utilisé pour le mouvement interne du vent du foie, les crises d'épilepsie, les crises fébriles, le choc froid, les pleurs pédiatriques, l'éclampsie de grossesse, les maux de tête et les vertiges, etc. Il est couramment utilisé en pratique clinique pour traiter des maladies telles que l'hypertension, l'arythmie, l'anxiété, l'épilepsie, etc. Le gouteng contient de nombreux composants chimiques, notamment des alcaloïdes, des flavonoïdes, des triterpénoïdes, etc. Parmi eux, les alcaloïdes sont considérés comme les principaux composants pharmacologiques du gouteng pour abaisser la tension artérielle.

L'empreinte digitale de la médecine traditionnelle chinoise est un chromatogramme complet et quantifiable qui fournit des caractéristiques de composition chimique. En ce qui concerne la plante médicinale Gouteng, de nombreux chercheurs ont mené des recherches sur le spectre d'empreintes digitales de Gouteng. Par exemple, Huang et al. ont établi des spectres d'empreintes chromatographiques CLHP d'Uncaria de différentes régions en utilisant des alcaloïdes d'Uncaria et des alcaloïdes d'Isocrocea comme composants indicateurs, tandis que Tan et al. ont établi des spectres d'empreintes CLHP d'alcaloïdes d'Uncaria de différentes régions. Ces études ont permis des explorations utiles pour l'évaluation approfondie de la qualité du Gouteng, mais en raison de l'accent mis sur quelques composants alcaloïdes tels que les alcaloïdes du Gouteng et les alcaloïdes de l'IsoGouteng, et de l'utilisation d'une seule évaluation de la similarité, des améliorations sont encore possibles pour refléter de manière précise et complète la qualité interne du Gouteng sans une extraction et une exploration plus approfondies des données d'empreintes digitales.

Afin d'évaluer de manière objective, complète et efficace la qualité des matières médicinales de Gouteng, cette expérience a établi les spectres d'empreintes digitales de 30 lots de Gouteng provenant de différentes sources à l'aide de la CLHP. Quinze pics communs ont été calibrés à l'aide du "Chinese Medicine Chromatographic Fingerprint Similarity Evaluation Software". Après comparaison avec les normes de référence, sept pics communs ont été identifiés, notamment l'acide chlorogénique, l'acide isocaprylique, l'acide isocaprylique, l'alcaloïde du Gouteng, l'éther méthylique des graines de semence, l'alcaloïde déshydrogéné du Gouteng et l'alcaloïde du Gouteng. Sur la base de l'évaluation de la similarité des spectres d'empreintes digitales, les données d'empreintes digitales sont combinées avec des méthodes chimiométriques, et des méthodes statistiques multivariées telles que l'analyse en grappes (CA), l'analyse en composantes principales (PCA) et l'analyse discriminante orthogonale des moindres carrés partiels (OPLS-DA) basées sur la chimiométrie sont appliquées pour analyser et évaluer la qualité des matières médicinales du Gouteng, afin de sélectionner et d'identifier les composés caractéristiques des différences de qualité du Gouteng et de fournir des références pour un contrôle efficace de la qualité du Gouteng.

Cette étude a examiné les effets du temps d'extraction (ultrasons 20, 40, 60 min), des solvants d'extraction (méthanol 100%, 75%, 50% et éthanol 100%, 75%, 50%), des colonnes chromatographiques (ACQUITY UPLC HSS T3, Cortecs UPLC T3, Cortecs UPLC C18, et ACQUITY UPLC BEH C18), et des différents systèmes de phase mobile (solution aqueuse de méthanol-0.1% et acétonitrile-0,1%) sur le nombre et la séparation des pics chromatographiques. Enfin, l'extraction par ultrasons du méthanol 75% pendant 40 minutes a été déterminée comme méthode de préparation de l'échantillon d'essai, et l'ACQUITY UPLC HSS T3 a été choisie comme colonne chromatographique, éluée avec une solution aqueuse d'acide formique acétonitrile-0,1% selon un gradient. Parallèlement, différentes longueurs d'onde de détection telles que 254, 274 et 366 nm ont été examinées, et il a été constaté que le chromatogramme présentait de nombreux pics à 254 nm avec une bonne séparation.

Le contrôle de la qualité des matières médicinales de Gouteng dans l'édition 2020 de la pharmacopée chinoise est qualitativement identifié en utilisant la méthode TLC avec l'isorhynchophylline comme composant indicateur. Cette méthode est lourde à mettre en œuvre et peu sensible, ce qui rend difficile le contrôle complet de la qualité des vignes à crochets. Cette étude a d'abord établi les spectres d'empreintes digitales de 30 lots de vigne à crochets provenant de différentes sources commerciales pour l'évaluation de la similarité, et a ensuite mené une recherche de reconnaissance des formes chimiques sur ces spectres. Selon le logiciel d'évaluation de la similarité, les résultats ont montré que la similarité entre 30 lots de matières médicinales de Gouteng était comprise entre 0,850 et 0,995. Au total, 15 pics communs ont été identifiés dans le spectre d'empreintes digitales et 7 composants chimiques ont été identifiés par comparaison avec des normes de référence, à savoir l'acide chlorogénique, l'isophénanthroline, l'isorhynchophylline, la rhynchophylline, l'éther méthylique de la sélégiline, la déshydrorhynchophylline et la rhynchophylline. L'acide chlorogénique a un large éventail d'effets pharmacologiques tels que des effets antibactériens, antiviraux, antitumoraux, hypolipidémiants et hypotenseurs ; l'isocamptothécine a des effets antiprolifératifs sur les cellules T de la leucémie lymphocytaire humaine ; l'isorhynchophylline et la rhynchophylline sont les principaux ingrédients actifs de la rhynchophylline dans le traitement de l'hypertension artérielle ; L'éther méthylique de Cesare est un agoniste efficace du récepteur 5-HT1A et le principal composant de la médecine traditionnelle japonaise Yigan San ; la déhydrohydroquercétine est un composant efficace de l'effet neuroprotecteur sur les cellules nerveuses ; l'alcaloïde d'Uncaria a un effet anticancéreux, qui peut inhiber la viabilité des cellules MCF-7 du cancer du sein humain in vitro, et induire une réponse aux dommages de l'ADN et une réponse au stress oxydatif. L'analyse en grappes non supervisée et l'analyse en composantes principales ont été utilisées pour diviser les 30 lots d'échantillons en différents groupes, et une évaluation différentielle a été réalisée tout en évaluant la cohérence de la qualité des matériaux médicinaux du Gouteng ; et utiliser l'analyse discriminante orthogonale des moindres carrés partiels pour sélectionner les pics chromatographiques qui ont un impact significatif sur le regroupement des échantillons. En combinant l'évaluation de la similarité des empreintes digitales et les méthodes de reconnaissance des formes, nous avons constaté que les principaux facteurs à l'origine des différences entre les lots étaient 1, 3 (acide chlorogénique), 7 (acide isocaprylique), 9 et 12 (éther méthylique de la sélégiline). Cela suggère que ces composants différentiels devraient faire l'objet d'une attention particulière lors de l'évaluation de la qualité des matériaux médicinaux du Gouteng. Il est nécessaire de combiner la spectrométrie de masse, la résonance magnétique nucléaire et d'autres techniques ou d'utiliser des normes de référence pertinentes pour mieux identifier les pics 1 et 9.

L'utilisation de la technologie de reconnaissance des formes chimiques combinée à l'analyse des données d'empreintes digitales peut fournir une évaluation plus objective et plus complète de l'authenticité et de la qualité de la médecine traditionnelle chinoise. Cette expérience a utilisé une combinaison de l'évaluation de la similarité des empreintes digitales et de la technologie de reconnaissance des formes chimiques pour étudier différentes sources de Gouteng. Par rapport aux méthodes existantes d'évaluation et de contrôle de la qualité qui reposent uniquement sur la détermination du contenu ou l'analyse des empreintes digitales, elle permet non seulement d'évaluer efficacement la cohérence de la qualité de la matière médicinale Gouteng, mais aussi de clarifier les principaux facteurs qui contribuent aux différences de qualité de la matière médicinale Gouteng. Par conséquent, elle fournit des informations plus riches pour l'évaluation et le contrôle de la qualité du Gouteng, ainsi qu'une certaine référence pour le contrôle de la qualité et le développement ultérieur du Gouteng.