Purification, propriétés physicochimiques et activité antioxydante des oligosaccharides de Rehmannia glutinosa frais
Le Rehmannia glutinosa Libosch, plante de la famille des Scrophulariaceae et du genre Rehmannia, est le tubercule de la racine du Rehmannia glutinosa Libosch. Il s'agit d'un remède traditionnel chinois couramment utilisé sous trois formes (Rehmannia fraîche, Rehmannia crue et Rehmannia cuite). La racine fraîche de Rehmannia glutinosa est appelée Rehmannia glutinosa fraîche. La Rehmannia glutinosa fraîche a une nature froide, un goût doux et amer, et a pour effet d'abaisser le taux de sucre dans le sang, de nourrir le foie et les reins. Ses effets particuliers ont été évoqués dans l'histoire de la médecine et ont été cliniquement prouvés. Dans la culture populaire du Henan, le Rehmannia glutinosa frais a l'habitude d'être consommé frais, notamment dans les plats froids et les plats sautés. Les composés sucrés du Rehmannia glutinosa occupent une grande partie de la surface totale, et ses oligosaccharides sont un autre type de composant actif découvert après les glycosides et les polysaccharides. On sait que les oligosaccharides de Rehmannia glutinosa ont des activités pharmacologiques telles que la tonification du sang et la réduction de la glycémie, et qu'ils sont les ingrédients efficaces de Rehmannia glutinosa. En raison des difficultés de stockage et de transport, le développement et l'application du Rehmannia glutinosa frais sont limités dans une certaine mesure. Actuellement, la recherche se concentre principalement sur le Rehmannia glutinosa cru et cuit, et il y a relativement peu de recherches sur le système de Rehmannia glutinosa frais. Les résultats des recherches de Jia et al. montrent que la teneur en raffinose de la Rehmannia glutinosa fraîche est de 26,45%, ce qui est significativement plus élevé que celle de la Rehmannia glutinosa crue (9,16%) et de la Rehmannia glutinosa cuite (5,98%), et présente une valeur potentielle pour la recherche. Cette expérience a utilisé des comprimés frais lyophilisés comme matières premières pour préparer des oligosaccharides à l'aide des méthodes aux ultrasons et à l'eau chaude. Après purification, deux groupes de fragments d'oligosaccharides (GRCP et GRSP) ont été obtenus, et leurs propriétés physicochimiques et leur capacité antioxydante ont été analysées de manière systématique et exhaustive. L'objectif est de fournir une base théorique pour le développement et l'utilisation de Rehmannia glutinosa frais.

En utilisant des comprimés lyophilisés de Rehmannia glutinosa frais comme matières premières, les oligosaccharides qu'ils contiennent ont été extraits et purifiés à l'aide d'ultrasons et d'eau chaude, ce qui a permis d'obtenir deux ensembles de fragments, GRCP et GRSP. Les teneurs en hydrates de carbone de ces deux fragments sont respectivement de 901,39 et 948,06 mg/g. Ils présentent peu d'impuretés et une grande pureté. Tous deux présentent peu d'impuretés et une grande pureté, ce qui indique une purification réussie, bien supérieure à la conclusion précédente selon laquelle la proportion de raffinose dans les sucres extraits est de 26,45%. Cette expérience a étudié en détail l'extraction, la purification et les propriétés physicochimiques du raffinose dans la Rehmannia glutinosa fraîche. Les résultats ont montré que les principaux groupes fonctionnels du GRCP et du GRSP étaient les mêmes et que les principaux composants étaient des oligosaccharides, principalement du raffinose. L'analyse thermique a montré que leurs structures étaient relativement stables en dessous de 205,5 et 209,0 ℃, respectivement. La composition en monosaccharides des deux fragments est la même, mais les proportions sont différentes. L'observation par MEB montre que leur apparence et leur morphologie présentent certaines différences, ce qui indique que les différentes méthodes d'extraction ont une certaine influence sur la structure des oligosaccharides. Les résultats du test d'activité indiquent que les deux groupes de fragments ont une certaine activité antioxydante. Les résultats de la spectrométrie de masse indiquent également que le principal composant du GRCP et du GRSP est le stachyose, un oligosaccharide fonctionnel composé de deux molécules de galactose alpha, d'une molécule de glucose alpha et d'une molécule de fructose bêta. Il a pour effet de réguler l'équilibre du microbiote intestinal et la régulation immunitaire, et constitue un excellent ingrédient alimentaire fonctionnel. Les oligosaccharides sont formés en reliant 2 à 10 monosaccharides par des liaisons glycosidiques. La méthode couramment utilisée pour extraire les oligosaccharides est l'extraction à l'eau et la précipitation à l'alcool, qui implique la précipitation avec 80% d'éthanol par volume pour éliminer les polysaccharides et réduire leur interférence, ce qui est bénéfique pour la suite de la purification. Wu a utilisé de l'éthanol 75% pour extraire les oligosaccharides frais de Rehmannia et a prélevé le surnageant pour une extraction ultérieure. Par ailleurs, l'éthanol avec une fraction volumique d'environ 80% est souvent utilisé pour la précipitation afin d'obtenir des polysaccharides. Comme l'ont constaté Wang et al., des polysaccharides de différents poids moléculaires peuvent être obtenus par précipitation avec de l'éthanol à des fractions volumiques de 30%, 60% et 80%, respectivement, pour obtenir des polysaccharides à partir de Pleurotus ostreatus. Yang et al. ont utilisé de l'éthanol 80% pour précipiter les polysaccharides et les ont purifiés, obtenant finalement des polysaccharides de Botrytis cinerea et de jujube, respectivement. Ye et al. ont obtenu des polysaccharides d'Hedyotis diffusa à partir de la précipitation de la solution d'extraction dans l'éthanol 90%. Dans cette expérience, quatre fois le volume de la solution d'extraction ont été ajoutés à de l'éthanol anhydre (avec une concentration finale de 80%) pour la précipitation dans l'alcool. Le précipité a ensuite été purifié et le principal composant du produit final purifié était le raffinose, ce qui indique que des oligosaccharides étaient présents dans 80% du précipité d'éthanol, et que tous n'étaient pas des polysaccharides. Ce résultat peut s'expliquer par le fait que le stachyose est encapsulé et fortement précipité par l'éthanol 80%, ou que le stachyose a une solubilité limitée dans l'éthanol 80% et peut partiellement précipiter. Cependant, les raisons spécifiques doivent encore faire l'objet de recherches plus approfondies. Lors de l'expérience préliminaire, le précipité d'alcool a été dialysé à l'aide d'un sac de dialyse de 3500Da, et il a été constaté que le rendement des substances sucrées dans le sac de dialyse de 3500Da n'était que de 0,61%, ce qui indique que la majorité des substances dans le précipité d'alcool ont un faible poids moléculaire. Par conséquent, à un stade ultérieur, un sac de dialyse de 500~1000Da est utilisé pour séparer la substance purifiée des autres substances à petites molécules et des impuretés, ce qui constitue une méthode simple et efficace pour améliorer la pureté de l'échantillon. Cette étude fournit une base théorique pour la recherche systématique et la poursuite du développement et de l'utilisation rationnels des oligosaccharides frais de Rehmannia, en particulier des ressources en raffinose.