Étude sur le transfert des valeurs de dosage des morceaux de décoction Bu Zha Ye et des décoctions standard sur la base d'un spectre d'empreintes digitales UPLC et d'une quantification multi-composants
Bu Zha Ye est une plante médicinale caractéristique du Lingnan, principalement composée de flavonoïdes, d'alcaloïdes, de terpènes, d'acides organiques, etc. Il favorise le péristaltisme gastro-intestinal et la sécrétion du suc gastrique, abaisse les lipides sanguins, réduit le jaunissement, est anti-inflammatoire, analgésique, protège le système cardiovasculaire, lutte contre le vieillissement, etc. Il s'agit d'une médecine chinoise à double usage, à la fois médicale et alimentaire. Ces dernières années, le Bu Zha Ye a fait l'objet d'une attention accrue et les recherches à son sujet sont devenues de plus en plus approfondies.
La médecine traditionnelle chinoise utilise principalement des décoctions, qui constituent la base matérielle de l'efficacité de la médecine chinoise. Après des milliers d'années de pratique clinique, l'établissement de normes de qualité pour les décoctions standard de la médecine chinoise peut fournir des références importantes pour l'établissement de normes de qualité pour les préparations modernes de la médecine chinoise telles que les granulés de formule. À l'heure actuelle, il n'existe aucun rapport de recherche sur la décoction standard de Bu Zha Ye. Dans le cadre des recherches menées par notre société sur la norme nationale des granulés de formule Bu Zha Ye, nous avons étudié les principaux indicateurs de qualité de la décoction standard conformément aux "exigences techniques pour le contrôle de la qualité et l'élaboration de normes pour les granulés de formule de médecine traditionnelle chinoise" (ci-après dénommées "exigences techniques"), notamment le rendement de la pâte, l'extrait, la teneur et le taux de transfert des composants indicateurs, le spectre des empreintes digitales, afin d'étudier la loi de transfert de la valeur quantitative des morceaux de décoction Bu Zha Ye vers la décoction standard, fournissant ainsi une référence pour l'élaboration de normes de qualité pour les granulés de formule Bu Zha Ye et les préparations apparentées.

La qualité du Bu Zha Ye est relativement légère, mais sa composition chimique est complexe. Au cours du processus de décoction, une grande quantité de composants déborde, ce qui entraîne une augmentation des impuretés dans la décoction standard et affecte la séparation chromatographique et l'analyse des ingrédients efficaces. Lorsque l'on utilise des solvants à forte polarité tels que le méthanol et l'éthanol pour traiter la décoction standard, la ligne de base du spectre d'empreintes digitales est instable, la séparation des pics chromatographiques est médiocre, les pics chromatographiques sont désordonnés et il y a de nombreux petits pics. Par conséquent, dans la méthode de prétraitement des échantillons d'essai de la décoction standard, la méthode de séparation, de purification et d'enrichissement par extraction à l'acétate d'éthyle a été étudiée pour réduire l'interférence des impuretés, et comparée aux méthodes de traitement conventionnelles. Les résultats ont montré que l'utilisation de l'acétate d'éthyle comme solvant d'extraction pouvait améliorer de manière significative l'influence des pics d'impuretés, garantir la pureté et la séparation des principaux pics chromatographiques et résoudre les problèmes d'instabilité de la ligne de base chromatographique et de faible absorption de certains pics chromatographiques. Lors de l'étude des conditions chromatographiques, différents systèmes d'élution de la phase mobile ont été examinés, tels que la solution d'acide phosphorique acétonitrile-0,1%, la solution d'acide acétique acétonitrile-0,1%, la solution d'acide formique méthanol-0,1%, la solution d'acide acétique méthanol-0,1%, etc. Les résultats ont montré que l'utilisation de la solution d'acide acétique méthanol-0,1% comme système d'élution permettait d'obtenir un plus grand nombre de pics chromatographiques et une meilleure séparation globale. Compte tenu de l'établissement des spectres d'empreintes digitales par chromatographie liquide à ultra-haute performance, la sélection des colonnes chromatographiques est cruciale. Par conséquent, cette expérience a étudié des colonnes chromatographiques de différentes tailles de particules et marques, et a finalement choisi la colonne chromatographique Agilent ZORBAX SB C18 (2,1 mm × 150 mm, 1,8 μ m), qui présente la meilleure forme de pic et la meilleure résolution de chaque pic d'empreinte partagée.
Des recherches ont montré que les feuilles de Bu Zha Ye contiennent de nombreux flavonoïdes. Xiao et al. ont réussi à identifier 31 composés de Bu Zha Ye en utilisant la technologie UPLC-Q-TOF-MS/MS, dont 28 flavonoïdes et 3 acides phénoliques. Des études pharmacologiques ont montré que les flavonoïdes constituent une base matérielle importante pour les effets de digestion, d'élimination de la chaleur et de soulagement de l'humidité du Bu Zha Ye. Les composants représentatifs tels que la vitexine, l'isovitexine et la narcissine ont une teneur élevée dans le Bu Zha Ye et une certaine solubilité dans l'eau. Par conséquent, la décoction standard de Bu Zha Ye utilise la vitexine, l'isovitexine et la narcissine comme indicateurs de détermination de la teneur et établit une méthode de détermination de la teneur des morceaux de décoction de Bu Zha Ye sur la base de la décoction, afin de guider l'étude du transfert des valeurs de la décoction standard.
Les herbes médicinales Bu Zha Ye sont principalement distribuées dans les régions de Guangdong, Guangxi et Hainan et font partie des herbes médicinales authentiques produites dans la région de Guangdong. 15 lots d'herbes médicinales Bu Zha Ye ont été collectés dans les trois zones de production susmentionnées, ce qui démontre une représentativité suffisante. Les résultats de la détermination de trois flavonoïdes dans 15 lots d'extrait de décoction standard, d'extrait et de 15 lots de morceaux de décoction de Bu Zha Ye montrent qu'il existe certaines différences entre les échantillons de différents lots, les valeurs maximales et minimales différant d'environ deux fois. Cette différence est liée à la qualité des matières médicinales elles-mêmes et répond aux exigences des prescriptions techniques. Il n'y a pas de valeurs anormales évidentes.
D'après les résultats de la détermination du taux de transfert, le taux de transfert moyen des trois flavonoïdes était compris entre 40% et 60%, la vitexine ayant le taux de transfert le plus élevé, suivie de la narcissine et de l'isovitexine, et le taux de transfert global était relativement stable. Les résultats de la recherche sur le spectre d'empreintes digitales ont montré qu'il y avait un certain changement dans la proportion de pics entre les morceaux de décoction Bu Zha Ye et la décoction standard. L'analyse OPLS-DA a permis d'identifier cinq pics chromatographiques significativement différents, à savoir les pics 1, 2, 3, 4 et 6. À l'exception du pic 3, qui n'a pas été identifié, tous les autres pics chromatographiques étaient connus. Parmi eux, les pics 1, 2 et 4 étaient des composants d'acide phénolique. Par conséquent, le pic 3 est supposé être un acide phénolique. Les composants d'acide phénolique sont particulièrement présents dans les plantes et peuvent servir de précurseurs pour la synthèse d'autres composés et peuvent également être hydrolysés à partir de divers composés. Par conséquent, l'augmentation significative de la surface relative du pic des composants de l'acide phénolique dans la décoction standard de Bu Zha Ye est considérée comme étant due à l'hydrolyse d'autres composants au cours du processus de décoction. La structure du pic 6 de l'isovitexine est similaire à celle du pic S de l'isovitexine, avec une faible différence de polarité, mais il existe une différence significative dans le taux de transfert. On considère qu'il existe un certain degré d'interconversion entre l'isovitexine et l'isovitexine au cours du processus de décoction de la décoction standard, et que des recherches supplémentaires sont nécessaires.
Cette étude se fonde sur les principaux indicateurs de qualité de la décoction standard de Bu Zha Ye et mène une recherche et une analyse approfondies sur le transfert de valeur de la décoction standard des morceaux de décoction de Bu Zha Ye, fournissant ainsi des références importantes pour la formulation de normes de qualité pour les granulés de formule de Bu Zha Ye et les préparations connexes.