Caractérisation des composants actifs inhibiteurs de la lipase dans les feuilles de gougu par la méthode de chromatographie sur couche mince Bioautographie MSn
Ilex cornuta Lindl Ex Paxt est une plante du genre Ilex de la famille des Ilex, largement répandue en Chine. Les feuilles séchées de Gougu, un remède traditionnel chinois, ont été incluses dans de nombreuses monographies de plantes depuis la dynastie Tang et ont une histoire médicinale de plus de mille ans. Selon la pharmacopée de la République populaire de Chine (édition 2020, volume 1), les feuilles de Ligusticum barbarum ont un goût amer et frais. Il appartient aux méridiens du foie et des reins et a pour fonctions d'éliminer la chaleur et de nourrir le yin, d'être bénéfique aux reins et de calmer le foie. Elle est utilisée dans les cas d'hémoptysie due à la tuberculose, de vapeur osseuse et de bouffées de chaleur, d'étourdissements et de vertiges, etc. Dans la culture populaire, les feuilles tendres de Gougu sont infusées et consommées sous forme de thé Kuding, en raison de leur effet de dissipation de la chaleur. La recherche moderne a montré que les feuilles de Cornus officinalis sont riches en triterpénoïdes et en saponines, qui sont ses principaux ingrédients actifs. En outre, il existe divers composants tels que les flavonoïdes, les polyphénols, les stérols, etc., qui ont diverses activités telles que la réduction des lipides sanguins, la lutte contre l'ischémie myocardique, l'antioxydation, l'immunosuppression et la lutte contre la fertilité. En raison de l'efficacité insignifiante et des effets secondaires importants de la plupart des médicaments amaigrissants, l'activité hypolipidémiante des feuilles de Ligusticum barbarum a progressivement attiré l'attention du public. Les chercheurs nationaux et étrangers ont mené des recherches approfondies sur les composants chimiques des feuilles de Ligusticum barbarum, mais les méthodes traditionnelles de séparation chimique ont été utilisées pour rechercher les ingrédients actifs hypolipidémiants, ce qui présente des inconvénients tels que le temps nécessaire, la complexité de l'opération et la perte d'ingrédients actifs.
La bioluminescence par chromatographie sur couche mince est une technique de dépistage des médicaments qui intègre l'identification, la séparation et la détermination de l'activité. Au cours des 20 dernières années, elle a été largement utilisée pour le dépistage rapide des antioxydants, des inhibiteurs de la cholinestérase et des inhibiteurs de la lipase. En outre, cette méthode se caractérise par sa simplicité d'utilisation et son faible coût expérimental. La technologie d'ionisation directe fait référence à une nouvelle technique d'ionisation utilisée pour l'analyse rapide par spectrométrie de masse d'échantillons à matrice complexe sans prétraitement à la pression atmosphérique. La chromatographie sur couche mince couplée à la spectrométrie de masse à plusieurs niveaux par ionisation par pulvérisation induite par un champ électrostatique (TLC-EFISI-MSn) peut réaliser la caractérisation structurelle in situ des composants actifs dans l'autoradiographie sur couche mince des feuilles de Lycium barbarum. Cette technologie d'ionisation directe peut extraire des composés sur des plaques de chromatographie en couche mince par extraction de microgouttelettes sans gaz ni dispositifs de chauffage supplémentaires, et les ioniser directement sous l'action d'un champ électrostatique avant de les introduire dans le spectromètre de masse pour analyse ; il s'agit d'une méthode d'ionisation facile à démonter, à utiliser et à détecter rapidement. Par conséquent, cet article adopte la méthode de la chromatographie sur couche mince et de la spectrométrie de masse par autoradiographie biologique pour identifier rapidement les composants ayant une activité hypolipidémiante dans les feuilles de Ligustrum lucidum, ce qui permet de clarifier la base de la substance de l'effet hypolipidémiant des feuilles de Ligustrum lucidum.

Cet article a d'abord développé l'échantillon de test des feuilles de Ligustrum lucidum dans deux systèmes : chloroforme, acétate d'éthyle, méthanol et eau (1:3:1:0,3, V/V/V/V) et acétate d'éthyle, méthanol et eau (6:2:1, V/V/V) afin d'obtenir davantage de taches. Grâce à la chromatographie sur couche mince, à l'inhibition de la lipase et à l'examen par bioluminescence, 10 taches présentant une activité d'inhibition de la lipase dans les feuilles de Ligustrum lucidum ont été sélectionnées, puis la technologie TLC EFISI MSn a été utilisée pour l'analyse structurelle rapide des taches susmentionnées. Sur la base des données de spectrométrie de masse à plusieurs étapes combinées à des rapports de la littérature, des voies de fragmentation possibles de différents composés ont été spéculées, et 15 structures possibles ont été caractérisées de manière préliminaire, toutes étant des saponines triterpénoïdes, dont 9 triterpénoïdes d'arbutine, 1 triterpénoïde d'oléanane et 5 triterpénoïdes à 18,19 anneaux. Après comparaison avec la substance de référence, 12 composés ont été validés. Cette méthode permet de cribler et de caractériser rapidement les composants ayant une activité inhibitrice sur la lipase des feuilles de Cornus officinalis, fournissant ainsi une base pour clarifier la substance à l'origine de l'efficacité hypolipidémiante des feuilles de Cornus officinalis.