Gougu Yapraklarındaki Lipaz İnhibe Edici Aktif Bileşenlerin İnce Tabaka Kromatografisi Biyootografi MSn Yöntemi ile Karakterizasyonu
Ilex cornuta Lindl Ex Paxt, Çin'de yaygın olarak bulunan Ilex familyasından Ilex cinsine ait bir bitkidir. Geleneksel bir Çin ilacı olan Gougu'nun kurutulmuş yaprakları, Tang Hanedanlığı'ndan bu yana birçok bitkisel monografide yer almıştır ve bin yılı aşkın bir tıbbi geçmişe sahiptir. Çin Halk Cumhuriyeti Farmakopesi'ne göre (2020 baskısı, Cilt 1), Ligusticum barbarum yapraklarının tadı acıdır ve serin bir yapıya sahiptir. Karaciğer ve böbrek meridyenlerine aittir ve ısıyı temizleme ve yin'i besleme, böbreklere fayda sağlama ve karaciğeri sakinleştirme işlevlerine sahiptir. Tüberküloz hemoptizi, kemik buharlaşması ve sıcak basması, baş dönmesi ve vertigo vb. için kullanılır. Halk kültüründe, Gougu yapraklarının hararet giderici etkisinden dolayı, yumuşak yaprakları Kuding çayı olarak demlenip tüketilir. Modern araştırmalar Cornus officinalis'in yapraklarının triterpenoidler ve ana aktif bileşenleri olan saponinler açısından zengin olduğunu göstermiştir. Buna ek olarak, kan lipidlerini düşürme, anti miyokardiyal iskemi, antioksidasyon, immünosupresyon ve anti fertilite gibi çeşitli aktivitelere sahip flavonoidler, polifenoller, steroller vb. gibi çeşitli bileşenler vardır. Çoğu zayıflama ilacının önemsiz etkinliği ve önemli yan etkileri nedeniyle, Ligusticum barbarum yapraklarının lipit düşürücü aktivitesi yavaş yavaş insanların dikkatini çekmiştir. Yurtiçi ve yurtdışındaki akademisyenler Ligusticum barbarum yapraklarının kimyasal bileşenleri üzerine kapsamlı araştırmalar yürütmüştür, ancak lipit düşürücü aktif bileşenleri aramak için zaman alıcı, karmaşık işlem ve aktif bileşen kaybı gibi dezavantajları olan geleneksel kimyasal ayırma yöntemleri kullanılmıştır.
İnce tabaka kromatografisi biyolüminesans, tanımlama, ayırma ve aktivite belirlemeyi entegre eden bir ilaç tarama tekniğidir. Son 20 yılda, antioksidanların, kolinesteraz inhibitörlerinin ve lipaz inhibitörlerinin hızlı taranması için yaygın olarak kullanılmıştır. Aynı zamanda, bu yöntem basit kullanım ve düşük deneysel maliyet özelliklerine sahiptir. Doğrudan iyonizasyon teknolojisi, karmaşık matris örneklerinin atmosferik basınçta ön işleme tabi tutulmadan hızlı kütle spektrometresi analizi için kullanılan yeni bir iyonizasyon tekniğini ifade eder. Elektrostatik alan kaynaklı sprey iyonizasyon çok aşamalı kütle spektrometrisi (TLC-EFISI-MSn) ile birleştirilmiş ince tabaka kromatografisi, Lycium barbarum yapraklarının ince tabaka otoradyografisinde aktif bileşenlerin yerinde yapısal karakterizasyonunu gerçekleştirebilir. Bu doğrudan iyonizasyon teknolojisi, ek gaz ve ısıtma cihazları olmadan mikro damlacık ekstraksiyonu yoluyla ince tabaka kromatografi plakalarındaki bileşikleri çıkarabilir ve analiz için kütle spektrometresine girmeden önce bunları doğrudan bir elektrostatik alanın etkisi altında iyonize edebilir; sökülmesi, çalıştırılması ve hızlı bir şekilde tespit edilmesi kolay bir iyonizasyon yöntemidir. Bu nedenle, bu makale Ligustrum lucidum yapraklarından lipid düşürücü aktiviteye sahip bileşenleri hızlı bir şekilde tanımlamak için ince tabaka kromatografisi biyolojik otoradyografi kütle spektrometresi yöntemini benimsemekte ve Ligustrum lucidum yapraklarının lipid düşürücü etkisinin madde temelini açıklığa kavuşturmak için bir temel sağlamaktadır.

Bu makale ilk olarak Ligustrum lucidum yapraklarının test örneğini iki sistemde geliştirmiştir: kloroform etil asetat metanol su (1:3:1:0.3, V/V/V/V) ve etil asetat metanol su (6:2:1, V/V/V) daha fazla nokta elde etmek için. İnce tabaka kromatografisi lipaz inhibisyonu biyolüminesans incelemesi yoluyla, Ligustrum lucidum yapraklarında lipaz inhibisyon aktivitesine sahip 10 nokta taranmış ve ardından yukarıdaki noktaların hızlı yapısal analizi için TLC EFISI MSn teknolojisi kullanılmıştır. Literatür raporlarıyla birleştirilen çok aşamalı kütle spektrometresi verilerine dayanarak, farklı bileşiklerin olası parçalanma yolları tahmin edildi ve 9 arbutin triterpenoid, 1 oleanane triterpenoid ve 5 18,19 halkalı triterpenoid dahil olmak üzere hepsi triterpenoid saponin olan 15 olası yapı ön karakterize edildi. Referans madde ile karşılaştırıldıktan sonra 12 bileşik doğrulanmıştır. Bu yöntem, Cornus officinalis yapraklarından lipaz inhibitör aktivitesi olan bileşenleri hızlı bir şekilde tarayabilir ve karakterize edebilir, Cornus officinalis yapraklarının lipit düşürücü etkinliğinin madde temelini açıklığa kavuşturmak için bir temel sağlar.