Détermination simultanée de cinq composants flavonoïdes dans différents types de branches de mûrier à l'aide d'une méthode UPLC
Les branches de mûrier, également appelées bandes de mûrier, sont les plantes Morus alba L. et Morus alba M. de la famille des mûriers Australis Poir. et Huasan M Dry, branches tendres de cathayana Hemsl. Les branches de mûrier ont une nature plate, un goût légèrement amer et appartiennent au méridien du foie. Il s'agit d'une plante médicinale chinoise traditionnelle qui a pour effet de dissiper le vent et l'humidité, de favoriser la santé des articulations et qui est principalement utilisée pour traiter des symptômes tels que les rhumatismes, la paralysie, l'engourdissement des articulations et les douleurs au niveau des bras et des épaules. D'anciens livres indiquent que les branches de mûrier peuvent "traiter la sécheresse de la bouche, nourrir les fluides corporels et l'eau des reins" et qu'elles ont pour effets thérapeutiques d'assécher l'humidité, de favoriser la circulation sanguine et la circulation des méridiens. Elles ont une longue histoire d'application clinique dans la médecine traditionnelle chinoise en Chine. Les branches de mûrier contiennent divers principes actifs efficaces, tels que des flavonoïdes, des alcaloïdes, des acides aminés, etc. Selon la recherche pharmacologique moderne, les branches de mûrier ont des effets multiples, notamment anti-inflammatoires, antioxydants, hypoglycémiques, hypolipidémiants, hypotenseurs, antibactériens, antiviraux et antitumoraux. Les flavonoïdes des branches de mûrier ont de bons effets sur la réduction des lipides sanguins et de la glycémie, ainsi que des propriétés antibactériennes et antioxydantes.
Cette étude a utilisé comme échantillons expérimentaux 18 lots de branches de mûrier provenant de 9 zones de production différentes et de 3 types différents à Chongqing. Une extraction ultrasonique a été réalisée et une chromatographie liquide ultra performante (UPLC) a été utilisée pour déterminer et analyser la teneur en cinq flavonoïdes, dont la rutine, le pigment de mûrier, le kaempférol, l'isoquercitrine et la quercétine de mûrier, dans ces 18 lots de branches de mûrier provenant de 9 zones de production différentes et de 3 types différents. Les différences de teneur en flavonoïdes entre les 18 lots de branches de mûrier ont été comparées, fournissant des données de soutien et de référence pour la recherche et le développement ultérieurs des branches de mûrier.

Sélection des conditions d'extraction. Cette étude a examiné la méthode d'extraction à reflux par chauffage au méthanol, la méthode d'extraction par ultrasons au méthanol, la méthode d'extraction à reflux par chauffage à l'éthanol et la méthode d'extraction par ultrasons à l'éthanol. Il a été constaté que l'utilisation du méthanol comme solvant d'extraction donnait de meilleurs résultats. Les effets d'extraction de la méthode d'extraction par reflux chauffant et de la méthode d'extraction par ultrasons n'étaient pas significativement différents. Compte tenu de la simplicité d'utilisation de la méthode d'extraction par ultrasons, la méthode d'extraction par ultrasons au méthanol a été choisie dans cette étude. Cette étude a pris en compte simultanément les effets de la température d'extraction, de la durée d'extraction et des temps d'extraction sur l'efficacité de l'extraction. Les résultats expérimentaux finaux ont montré que l'effet d'extraction global était optimal lorsque la température d'extraction était de 25 ℃, la durée d'extraction de 30 minutes et les temps d'extraction de 2 fois. Par conséquent, les conditions d'extraction finales de cette expérience ont été déterminées comme étant l'utilisation d'une solution de méthanol et d'une méthode d'extraction par ultrasons, avec une température d'extraction de 25 ℃, une durée d'extraction de 30 minutes et des temps d'extraction de 2 fois.
Sélection de la phase mobile. Cette étude a examiné les différences entre les effets de quatre compositions de phase mobile (solution d'acide formique 0,2%+méthanol, solution d'acide formique 0,2%+acétonitrile, solution d'acide phosphorique 0,2%+méthanol, solution d'acide phosphorique 0,2%+acétonitrile) sur la formation des pics. Les résultats expérimentaux ont montré que lorsque la phase mobile était une solution d'acide formique 0,2%+méthanol et une solution d'acide phosphorique 0,2%+méthanol, le temps de formation du pic était plus tardif et le temps d'analyse plus long, en particulier pour la quercétine. Lorsque la phase mobile était le méthanol, le temps de formation du pic était plus tardif, ce qui affectait la durée totale de l'analyse. Lorsque la phase mobile était une solution d'acide phosphorique 0,2%+acétonitrile, le temps d'analyse était plus court, la forme du pic et l'effet de séparation étaient meilleurs. Par conséquent, cette étude a choisi la solution d'acide phosphorique 0,2%+acétonitrile comme phase mobile. Parallèlement, l'influence de différentes températures de colonne (30, 35, 40 ℃) sur les résultats expérimentaux a également été étudiée. Les résultats expérimentaux ont montré que l'effet de séparation était optimal lorsque la température de la colonne était de 35 ℃.
La teneur en flavonoïdes des branches de mûrier. Les résultats de la recherche ont montré que la rutine, l'isoquercitrine, le pigment de mûre, le kaempférol et le kaempférol ont été détectés dans les 18 lots d'échantillons de branches de mûrier, mais qu'il y avait des différences significatives dans leur contenu. La teneur moyenne en kaempférol la plus élevée était de 135,154 μ g/g, et la teneur moyenne en kaempférol la plus faible était de 6,929 μ g/g. Cela suggère que les branches de mûrier (en particulier Huasang dans la ville de Huangjueya, district de Nan'an) peuvent être utilisées comme matière première pour extraire le kaempférol et continuer à le développer et à l'utiliser. La teneur de ces cinq flavonoïdes dans les branches de mûrier est influencée par divers facteurs, tels que la période de récolte des branches, le type de mûrier, les parties des branches (avant, milieu et arrière), l'origine des branches, etc. Le sangxinsu a des effets anti-virus du SIDA et anti-tumoraux. Les pigments de mûrier et l'isoquercitrine ont tous deux une activité antioxydante et peuvent piéger l'activité des radicaux libres DPPH. La rutine peut améliorer l'élasticité des capillaires, protéger divers tissus et organes et induire l'apoptose des cellules. Le kaempférol a un bon effet inhibiteur sur les cellules cancéreuses. Comme la rutine, il induit l'apoptose au cours du processus de mort cellulaire et a des effets anticancéreux. En résumé, l'extrait de mûrier, le pigment de mûrier, l'isoquercitrine, la rutine et le kaempférol ont tous une bonne valeur médicinale et sont d'une grande importance pour la médecine clinique. Les ressources en mûriers ont une vaste zone de plantation dans la région du réservoir des Trois Gorges, sont faciles à obtenir et ont un faible coût d'acquisition des matières premières. L'utilisation des branches de mûrier comme matières premières pour extraire des flavonoïdes tels que la quercétine, le pigment de mûrier, l'isoquercitrine, la rutine et le kaempférol constituera une nouvelle tendance pour le développement et l'utilisation des branches de mûrier.