Estudio sobre la huella dactilar por HPLC y el reconocimiento de patrones químicos de la medicina Miao Rolling Mountain Pearl
Prionobelum qianensis Chen es un insecto entero seco del género Prionobelum de la familia Zephronidae. Tiene un cuerpo cilíndrico aplanado y habita en laderas húmedas, ramas muertas, hojas o rocas. Se distribuye principalmente en Guizhou, Yunnan y otras regiones. La Perla de la Montaña Rodante es un gusano medicinal entero que tiene los efectos de eliminar el calor, reducir la hinchazón y el dolor, relajar los tendones y favorecer la circulación sanguínea. Se utiliza principalmente para tratar síntomas como espasmos musculares, contusiones, fracturas, hinchazón y dolor. Figura en libros como "Chinese Materia Medica - Miao Medicine Volume" y "Guizhou Miao Medicine Research and Development". En las zonas de etnia miao de Guizhou, el tratamiento de la inflamación es muy extenso, y el efecto terapéutico sobre los tumores es extremadamente significativo. Sin embargo, la investigación básica actual sobre las cuentas rodantes de montaña, tanto a nivel nacional como internacional, es muy débil, y hay una falta de sistema estándar de control de calidad, lo que restringe seriamente el desarrollo racional y la utilización generalizada de los materiales medicinales de las cuentas rodantes de montaña.
El espectro de huellas dactilares es un medio fiable para identificar la autenticidad, evaluar la consistencia de la calidad y la estabilidad de los componentes químicos de la medicina tradicional china obtenidos mediante técnicas como la espectroscopia o la cromatografía, basándose en la comprensión de la acción global de los grupos de sustancias. Por lo tanto, en este estudio, se utilizó HPLC para establecer la huella dactilar de Gongshanzhu, y se llevó a cabo la evaluación de la similitud. Se utilizaron métodos de reconocimiento de patrones químicos, como el análisis de conglomerados (AC), el análisis de componentes principales (ACP) y el análisis discriminante de mínimos cuadrados parciales ortogonales (OPLS-DA), para seleccionar los principales componentes característicos que causan diferencias en la composición de los distintos lotes de Gongshanzhu. El objetivo es proporcionar una referencia para el control de calidad y la investigación posterior de la medicina miao Gongshanzhu.

En la fase inicial del experimento, se investigó la influencia de los sistemas de elución de metanol y acetonitrilo en la eficacia de separación de los picos cromatográficos. Los resultados mostraron que el metanol tenía una mejor eficacia de separación y una línea de base estable cuando se utilizaba como fase móvil; Se investigó la eficacia de separación del agua de ácido fórmico metanol-0,1% y del agua de ácido acético metanol-0,1%, y finalmente se seleccionó el sistema de agua de ácido acético metanol-0.1% con mejor eficacia de separación; Se analizó el espectro de barrido de longitud de onda completa a 210-240 nm, mostrando que hay más picos a 254 nm, una línea de base estable y un gran valor de respuesta de la señal; Al examinar los efectos de diferentes caudales (0,8, 1,0, 1,2 mL/min) y temperaturas de columna (25, 30, 35, 40 ℃) en los picos cromatográficos, se determinó seleccionar un caudal de 0,8 mL/min y una temperatura de columna de 25 ℃. En la fase inicial del experimento, también se investigaron dos métodos de extracción, ultrasonidos y reflujo, y se comprobó que no había diferencias significativas en su eficacia de extracción. Por lo tanto, se eligió la extracción por ultrasonidos, que tiene una operación más sencilla; Comparando el agua, el metanol y el alcohol comestible como disolventes de extracción, los resultados mostraron que el alcohol comestible tenía más picos cromatográficos y mayores valores de respuesta durante la extracción. Y se compararon los efectos de extracción de diferentes concentraciones de alcohol comestible (30%, 50%, 70%, 90%). Los resultados mostraron que el valor de respuesta del pico cromatográfico era mayor cuando se extraía el alcohol comestible 70%. Teniendo en cuenta todos los factores, se selecciona la extracción ultrasónica de alcohol comestible 70% como método de preparación de la solución de ensayo.
Este estudio estableció por primera vez el espectro de huellas dactilares de la perla de montaña rodante de la medicina Miao, y la similitud de los espectros de huellas dactilares de 24 lotes de muestras osciló entre 0,739 y 0,957, identificando un componente. Mediante el análisis de reconocimiento de patrones químicos, se estableció un modelo de clasificación para el análisis de agrupación, el análisis de componentes principales y el análisis discriminante de mínimos cuadrados parciales ortogonales de las perlas de montaña rodantes, aclarando el estado de clasificación entre las muestras. Se agruparon 24 lotes de muestras en 3 categorías, y se examinaron 5 componentes característicos principales que afectan a las diferencias de calidad entre los materiales medicinales de Gongshanzhu. En resumen, el método de huella digital HPLC establecido en este estudio es estable, fiable y tiene buena reproducibilidad, lo que puede proporcionar una referencia para el control de calidad de la hierba medicinal Gongshanzhu.